Identificação de Novos Biomarcadores do Consumo de Banana e Tomate (BioBanaTom)

O surgimento da metabolômica juntamente com diferentes plataformas, como espectrômetros de massa de cromatografia líquida (LC-MS), permitiram a avaliação de milhares de metabólitos simultaneamente em amostras biológicas e o reconhecimento de padrões que podem constituir uma impressão digital da ingestão de diferentes alimentos. Estudos recentes demonstraram o grande potencial da metabolômica para descobrir novos biomarcadores de ingestão em estudos de intervenção e coorte. (FOODBALL) foi criado. Neste projeto, 22 instituições de 11 países diferentes irão colaborar em três tarefas principais: 1) Descoberta de novo biomarcador dietético usando uma abordagem metabolômica, 2) validação sistêmica de biomarcador existente e recém-descoberto para alcançar uma boa cobertura da ingestão alimentar em diferentes países europeus populações e 3) explorar os efeitos biológicos usando biomarcadores de ingestão (http://foodmetabolome.org/). Com este último surge a necessidade de construir uma biblioteca química que permita a utilização de padrões para posterior identificação. Juntamente com o FOODBALL, o Food Compound Exchange (FoodComEx) visa melhorar a disponibilidade de padrões analíticos de compostos biológicos para obter uma melhor e mais fácil identificação de biomarcadores (http://foodcomex.org/).

Como parte da colaboração do INRA com FOODBALL e FoodComEx, o presente projeto tenta identificar biomarcadores da ingestão de banana e tomate, por meio da exploração do metaboloma sérico e urinário de 12 indivíduos que consumiram esses alimentos seguindo um design randomizado, controlado e cruzado. O presente estudo foi composto por 3 diferentes períodos de intervenção e um mínimo de 3 dias de washout entre as intervenções. Os períodos de intervenção foram compostos por 2 dias de corrida, 1 dia de intervenção e 1 dia pós-intervenção. No primeiro dia do período de corrida, os sujeitos foram instruídos a evitar a ingestão de banana ou tomate ou qualquer um de seus produtos; no dia anterior à intervenção, os voluntários foram orientados a evitar a ingestão de alimentos e bebidas ricos em fitoquímicos, como vinho, café, chocolate, chá e outros alimentos à base de plantas, incluindo banana e tomate. estado de jejum para o centro de pesquisa às 7h30. Os voluntários foram aleatoriamente designados para uma das três intervenções, Fresubin ® 2kcal fibra, 240g de banana mais bebida controle, ou 300g de tomate mais bebida controle mais 12g de óleo de girassol refinado. Durante toda a intervenção, os sujeitos tiveram livre acesso à água, no máximo 250ml de água por hora até 6 horas após a ingestão do alimento teste.

Um flebotomista treinado colocou um cateter no braço do sujeito antes da ingestão dos alimentos de teste para coletar a amostra de linha de base. Em seguida, quatro outras amostras foram coletadas pós-prandialmente após 1h, 2h, 4h e 6h. Um total de 7 amostras de urina foram coletadas. A primeira urina foi coletada pelos sujeitos em casa na manhã do dia 3 e o restante das amostras após a ingestão dos alimentos de teste da seguinte forma: 0-1h, 1h-2h, 2h-4h, 4h-6h. As amostras de urina correspondentes ao intervalo de 6h-12h e 12-24h foram coletadas pelos voluntários em casa até a manhã seguinte à ingestão do alimento.

Após as 6h de coleta de sangue, o cateter periférico foi retirado e os sujeitos almoçaram composto de pão branco e massa cozida, em seguida, os sujeitos foram liberados para ir para casa. Antes de deixar o Centro de Investigação, os participantes foram instruídos a preparar um jantar padronizado à base de frango frito na manteiga e arroz cozido com sal. Os voluntários não tinham permissão para comer ou beber nada, exceto água e o jantar padronizado.

Na manhã do dia pós-intervenção, os sujeitos compareceram em jejum ao centro de pesquisa para coleta de sangue de 24h e coleta de urina de 06-12h e 12-24h. Posteriormente, os participantes receberam café da manhã no centro de pesquisa e retomaram sua dieta normal até a próxima corrida em dias do próximo período de intervenção.

Amostras de urina e amostras de soro foram divididas em alíquotas e armazenadas a -80°C até a análise.