Implikace nekonvenčních T lymfocytů u cystické fibrózy (UNLOCK) (UNLOCk)

- Klinické a vědecké zázemí

Cystická fibróza je charakterizována funkčními abnormalitami v membránovém kanálu transmembránového regulátoru vodivosti cystické fibrózy (CFTR), což vede ke snížení mukociliární clearance, opakujícím se infekcím a zánětům dýchacích cest. Tento zánětlivý proces ve sliznici dýchacích cest je perzistentní, nekontrolovaný, ale poněkud paradoxně neúčinný pro clearance patogenů. Neutrofily jsou chronicky rekrutovány ve sliznici dýchacích cest prozánětlivými mediátory, jako je IL-17, a pravděpodobně velkou měrou přispívají k poškození tkáně. Up-stream mechanismy zapojené do této dysregulované a přetrvávající imunitní reakce však nejsou dobře známy.

V tomto kontextu je kritické hledání nových kandidátů, kteří by se mohli podílet na tomto chronickém zánětu, protože dosud neexistuje žádná účinná léčba, která by modulovala imunitní odpověď u CF. Aby se to vyřešilo, měla by si větší pozornost zasloužit heterogenní subpopulace T lymfocytů nazývaná „nekonvenční T buňky“ (UTC). Tyto buňky zahrnují přirozené zabíječe T (NKT) buňky, mukózní invariantní T buňky (MAIT buňky) a y5 T buňky. Výzkumníci se domnívají, že tyto buňky by mohly být nástrojem budoucí imunitní intervence v imunopatologii CF. Za prvé, UTC hraje klíčovou roli při organizování následných vrozených a adaptivních imunitních reakcí. Jejich klíčová role při zvyšování obrany hostitele během infekce byla demonstrována výzkumníky a dalšími v různých experimentálních modelech. Pozoruhodně je dobře zdokumentována jejich klíčová role při získávání neutrofilů řízených IL-17 během akutní plicní infekce. Za druhé, jsou obdařeny četnými regulačními a efektorovými vlastnostmi. Za třetí, UTC zavádí především rezidenci v místech sliznic, včetně plic. A konečně, tyto buňky jsou již zkoumány pro terapeutické intervence (hlavně v onkologii, s probíhajícími klinickými zkouškami fáze I a II). K dnešnímu dni jsou však údaje týkající se implikace a chování UTC během cystické fibrózy extrémně omezené a předběžné.

Hypotézou je, že vzhledem k vlastnostem UTC jsou jejich funkce a chování u CF změněny, a tak by se tyto buňky mohly podílet na přetrvávajícím zánětu a špatné reakci na infekce.

- Cíl studie: Cílem je studium UTC vlastností a funkcí u cystické fibrózy pomocí vzorků krve a sputa pacientů s CF v korelaci s komplexními klinickými a mikrobiologickými daty.

- Design:

Jedná se o prospektivní explorativní studii v jednom centru zahrnující dospělé pacienty s CF, kteří jsou sledováni ve Fakultní nemocnici v Tours ve Francii.

Počet účastníků: 80

- Intervence a analýzy:

Pro každého zařazeného pacienta bude délka studie 18 měsíců, během nichž budou analyzovány vzorky krve a sputa 1/ z rutinních testů získaných v ustáleném stavu při roční kontrole a následném vyšetření a 2/ z testů provedených během léčených akutních exacerbací v nemocnici nebo ambulantně. Zařazení do této studie nezahrnuje žádné lékařské ani biologické vyšetření oproti běžnému sledování. Každý test krve nebo sputa provedený během následného vyšetření nebo léčebné péče povede k dalším vzorkům pro výzkum.

Budou shromažďovány klinické parametry včetně klinického stavu (exacerbace nebo ne), mikrobiálního stavu, testu funkce plic, léků používaných jako modulátorové terapie CFTR (lumakaftor ivakaftor) nebo antibiotik.

UTC budou zkoumány v krvi a sputu pomocí průtokové cytometrie, aby se vyhodnotila jejich relativní abundance, aktivační/inhibiční profil a funkce (produkce cytokinů a cytotoxická schopnost). V některých případech bude provedeno intracelulární barvení pro posouzení produkce cytokinů a/nebo exprese transkripčního faktoru. Funkce nekonvenčních T buněk budou také prováděny po ex vivo stimulaci na purifikované populaci (třídění buněk). Na krevních vzorcích budou také provedeny transkriptomické analýzy hladiny cytokinů. Bude provedena korelace s klinickým stavem, s longitudinálním srovnáním napříč studijním obdobím pro každého pacienta a srovnáním s ostatními pacienty a zdravými dobrovolníky.