Implicazione dei linfociti T non convenzionali nella fibrosi cistica (UNLOCk) (UNLOCk)

- Background clinico e scientifico

La fibrosi cistica è caratterizzata da anomalie funzionali nel canale della membrana del regolatore della conduttanza transmembrana della fibrosi cistica (CFTR) che porta a una diminuzione della clearance mucociliare, infezioni ricorrenti e infiammazione delle vie aeree. Questo processo infiammatorio nella mucosa delle vie aeree è persistente, incontrollato, ma, paradossalmente, inefficace per l'eliminazione del patogeno. I neutrofili sono cronicamente reclutati nella mucosa delle vie aeree da mediatori proinfiammatori come IL-17 e probabilmente contribuiscono ampiamente al danno tissutale. Tuttavia, i meccanismi a monte coinvolti in questa risposta immunitaria disregolata e persistente non sono ben compresi.

In questo contesto, la ricerca di nuovi candidati che potrebbero essere coinvolti in questa infiammazione cronica è fondamentale in quanto non esiste, ad oggi, alcun trattamento efficace per modulare la risposta immunitaria nella FC. Per risolvere questo problema, una sottopopolazione eterogenea di linfociti T chiamata "cellule T non convenzionali" (UTC) dovrebbe meritare maggiore attenzione. Queste cellule comprendono cellule Natural Killer T (NKT), cellule T invarianti associate alla mucosa (cellule MAIT) e cellule T γδ. I ricercatori ritengono che queste cellule potrebbero essere fondamentali per il futuro intervento immunitario nell'immunopatologia della FC. In primo luogo, l'UTC svolge un ruolo chiave nell'orchestrare le conseguenti risposte immunitarie innate e adattative. Il loro ruolo fondamentale nel montare la difesa dell'ospite durante l'infezione è stato dimostrato, dai ricercatori e da altri, in diversi modelli sperimentali. In particolare, il loro ruolo fondamentale per il reclutamento dei neutrofili guidato da IL-17 durante l'infezione polmonare acuta è ben documentato. In secondo luogo, sono dotati di numerose proprietà regolatrici ed effettrici. In terzo luogo, l'UTC stabilisce principalmente la residenza nei siti della mucosa, compreso il polmone. Infine, queste cellule sono già studiate per interventi terapeutici (principalmente in oncologia, con studi clinici di fase I e II in corso). Ad oggi, tuttavia, i dati relativi alle implicazioni e al comportamento dell'UTC durante la fibrosi cistica sono estremamente limitati e preliminari.

L'ipotesi è che, date le proprietà dell'UTC, le loro funzioni e il loro comportamento siano alterati nella FC e, quindi, queste cellule potrebbero essere implicate nell'infiammazione persistente e nella scarsa risposta alle infezioni.

- Obiettivo dello studio: l'obiettivo è studiare le proprietà e le funzioni dell'UTC nella fibrosi cistica utilizzando campioni di sangue ed espettorato di pazienti con FC, in correlazione con dati clinici e microbiologici completi.

- Progetto:

Si tratta di uno studio prospettico esplorativo monocentrico che include pazienti adulti con FC il cui follow-up viene effettuato presso l'ospedale universitario di Tours, in Francia.

Numero di partecipanti: 80

- Interventi e analisi:

Per ogni paziente incluso, la durata dello studio sarà di 18 mesi, durante i quali verranno analizzati campioni di sangue ed espettorato 1/ dai test di routine ottenuti allo stato stazionario durante il controllo annuale e l'esame di follow-up e 2/ dai test eseguiti durante le riacutizzazioni trattate in ospedale o in ambulatorio. L'arruolamento in questo studio non aggiunge alcun esame medico o biologico rispetto al consueto follow-up. Ogni esame del sangue o dell'espettorato eseguito durante l'esame di follow-up o il trattamento porterà a campioni supplementari per la ricerca.

Verranno raccolti parametri clinici tra cui lo stato clinico (riacutizzazione o meno), lo stato microbico, il test di funzionalità polmonare, i farmaci utilizzati come le terapie modulatrici CFTR (lumacaftor ivacaftor) o gli antibiotici.

L'UTC sarà esplorato nel sangue e nell'espettorato utilizzando un approccio di citometria a flusso, per valutarne l'abbondanza relativa, il profilo di attivazione/inibizione e le funzioni (produzione di citochine e capacità citotossica). In alcuni casi, verrà eseguita la colorazione intracellulare per valutare la produzione di citochine e/o l'espressione del fattore di trascrizione. Le funzioni delle cellule T non convenzionali saranno anche eseguite dopo stimolazione ex vivo su popolazione purificata (cell sorting). Verranno eseguite anche analisi trascrittomiche a livello di citochine su campioni di sangue. Verrà effettuata la correlazione con lo stato clinico, con confronto longitudinale durante il periodo di studio per ciascun paziente e confronto con gli altri pazienti e volontari sani.