Implikacja niekonwencjonalnych limfocytów T w mukowiscydozie (UNLOCk) (UNLOCk)

- Podstawa kliniczna i naukowa

Mukowiscydoza charakteryzuje się nieprawidłowościami czynnościowymi kanału błonowego regulatora przezbłonowego przewodnictwa mukowiscydozy (CFTR), co prowadzi do zmniejszenia klirensu śluzowo-rzęskowego, nawracających infekcji i zapalenia dróg oddechowych. Ten proces zapalny w błonie śluzowej dróg oddechowych jest trwały, niekontrolowany, ale, nieco paradoksalnie, nieskuteczny w usuwaniu patogenów. Neutrofile są przewlekle rekrutowane w błonie śluzowej dróg oddechowych przez mediatory prozapalne, takie jak IL-17, i prawdopodobnie w dużym stopniu przyczyniają się do uszkodzenia tkanek. Jednak górne mechanizmy zaangażowane w tę rozregulowaną i uporczywą odpowiedź immunologiczną nie są dobrze poznane.

W tym kontekście poszukiwanie nowych kandydatów, którzy mogą być zaangażowani w to przewlekłe zapalenie, ma kluczowe znaczenie, ponieważ do tej pory nie ma skutecznego leczenia modulującego odpowiedź immunologiczną w mukowiscydozie. Aby temu zaradzić, na większą uwagę zasługuje heterogenna subpopulacja limfocytów T zwana „niekonwencjonalnymi komórkami T” (UTC). Komórki te obejmują komórki Natural Killer T (NKT), niezmienne komórki T związane z błoną śluzową (komórki MAIT) i komórki T γδ. Badacze uważają, że komórki te mogą odegrać kluczową rolę w przyszłej interwencji immunologicznej w immunopatologii mukowiscydozy. Po pierwsze, UTC odgrywa kluczową rolę w organizowaniu wrodzonych i adaptacyjnych odpowiedzi immunologicznych. Ich kluczowa rola w budowaniu obrony gospodarza podczas infekcji została wykazana przez badaczy i innych w różnych modelach eksperymentalnych. Warto zauważyć, że ich kluczowa rola w rekrutacji neutrofili kierowanej przez IL-17 podczas ostrej infekcji płuc jest dobrze udokumentowana. Po drugie, posiadają liczne właściwości regulacyjne i efektorowe. Po trzecie, UTC lokuje się głównie w błonach śluzowych, w tym w płucach. Wreszcie, komórki te są już badane pod kątem interwencji terapeutycznych (głównie w onkologii, z trwającymi badaniami klinicznymi fazy I i II). Do tej pory jednak dane dotyczące implikacji i zachowania UTC podczas mukowiscydozy są bardzo ograniczone i wstępne.

Hipoteza jest taka, że ​​biorąc pod uwagę właściwości UTC, ich funkcje i zachowanie są zmienione w mukowiscydozie, a zatem komórki te mogą być zaangażowane w utrzymujący się stan zapalny i słabą odpowiedź na infekcje.

- Cel pracy: Celem jest zbadanie właściwości i funkcji UTC w mukowiscydozie na próbkach krwi i plwociny pacjentów z mukowiscydozą, w korelacji z obszernymi danymi klinicznymi i mikrobiologicznymi.

- Projekt:

Jest to prospektywne jednoośrodkowe badanie rozpoznawcze obejmujące dorosłych pacjentów z mukowiscydozą, których obserwacja jest prowadzona w Szpitalu Uniwersyteckim w Tours we Francji.

Liczba uczestników: 80

- Interwencje i analizy:

Dla każdego pacjenta objętego badaniem czas trwania badania wyniesie 18 miesięcy, podczas których będą analizowane próbki krwi i plwociny 1/ z rutynowych badań uzyskanych w stanie stacjonarnym podczas corocznych badań kontrolnych i kontrolnych oraz 2/ z badań przeprowadzonych podczas ostrych zaostrzeń leczonych w szpitalu lub ambulatorium. Włączenie do tego badania nie wiąże się z żadnymi dodatkowymi badaniami lekarskimi ani biologicznymi w porównaniu ze zwykłą obserwacją. Każde badanie krwi lub plwociny wykonane podczas badania kontrolnego lub opieki leczniczej będzie prowadzić do pobrania dodatkowych próbek do badań.

Zostaną zebrane parametry kliniczne, w tym stan kliniczny (zaostrzenie lub nie), status mikrobiologiczny, test czynnościowy płuc, stosowane leki, takie jak terapie modulujące CFTR (lumakaftor iwakaftor) lub antybiotyki.

UTC zostanie zbadane we krwi i plwocinie przy użyciu metody cytometrii przepływowej, aby ocenić ich względną obfitość, profil aktywacji/hamowania i funkcje (wytwarzanie cytokin i zdolność cytotoksyczna). W niektórych przypadkach przeprowadzone zostanie barwienie wewnątrzkomórkowe w celu oceny produkcji cytokin i/lub ekspresji czynnika transkrypcyjnego. Funkcje niekonwencjonalnych limfocytów T będą również wykonywane po stymulacji ex vivo na oczyszczonej populacji (sortowanie komórek). Na próbkach krwi zostaną również przeprowadzone analizy transkryptomiczne na poziomie cytokin. Dokonana zostanie korelacja ze stanem klinicznym, z porównaniem podłużnym w całym okresie badania dla każdego pacjenta oraz porównaniem z innymi pacjentami i zdrowymi ochotnikami.