Longitudinální studie střevní, kožní a slinné mikroflóry u dětí se syndromem enterokolitidy vyvolané jídlem (SEIPA) (SEIBIOTE)

1.1 Současný stav znalostí Food Protein-Induced Enterokolitis Syndrom (FPIES) je potravinová alergie s prevalencí 0,34 % a incidencí 15,4 dětí na 100 000 za rok. Jde o alergii nezprostředkovanou IgE, která se projevuje zvracením 1 až 4 hodiny po požití podezřelé potraviny (hlavní kritéria), bez jakýchkoli kožních či respiračních projevů. Podle poslední definice (JACI 2017) by měla být vyžadována alespoň 3 méně významná kritéria spojená se zvracením z následujících: druhá podobná epizoda zvracení po požití stejného jídla, výskyt opakovaného zvracení 1 až 4 hodiny po požití jiné jídlo, letargie, výrazná bledost, nutnost urgentní léčby nebo nitrožilní rehydratace po požití podezřelé potraviny, nástup průjmu do 24 hodin, hypotenze nebo hypotermie v době reakce. Nejčastěji odpovědnými potravinami za PFIES jsou kravské mléko, obiloviny, sója a ryby. Spouštěče závisí na zemi, pravděpodobně ve vztahu ke stravovacím návykům. Medián tolerantního věku je pozdější než u ostatních forem ne-IgE zprostředkované alergie, a to mezi 3. až 5. rokem věku a u pevné stravy je pozdější než u tekuté stravy. Průměrný věk získání tolerance ke kravskému mléku se v literatuře liší, v Koreji kolem 8–10 měsíců, v Izraeli kolem 1 roku, ve Spojených státech kolem 5 let, ale mnohem později (14 let), pokud se během sledování objeví specifické IgE. nahoru. Ve Francii nejsou k dispozici žádné údaje o době zrání SEIPA v kravském mléce.

První znovuzavedení odpovědné potraviny se navrhuje ve věku 12–18 měsíců, pokud byla diagnóza stanovena během prvních měsíců života a pokud jsou specifické IgE negativní podle nejnovějších doporučení. V případě selhání orální potravinové výzvy (OFC) je navržena nová OFC každých 6 měsíců až do vyléčení.

Když jsou specifické IgE pozitivní, jedná se pak o atypický FPIES a způsoby opětovného zavedení potravy budou záviset na vývoji IgE.

Souvislost mezi mikrobiotou a rozvojem alergických onemocnění je dnes dobře známá. Střevní mikrobiota se u pacientů s potravinovou alergií liší, pokud jde o rozmanitost a distribuci bakterií, ve srovnání s nealergickými pacienty. Mikrobiota hraje ranou roli ve vývoji imunitního systému, a tedy ve vývoji nebo prevenci potravinových alergií zahrnujících prozánětlivou a proalergickou dráhu Th17.

Střevní mikroflóra je hodnocena bakteriální diverzitou pomocí sekvenování RNA16, zejména alfa-diverzitou (specifická pro vzorek) a beta-diverzitou (srovnání mezi několika vzorky), bakteriální bohatostí a stanovením bakteriálních metabolitů, jako je krátký řetězec mastných kyselin, jako jsou butyráty, měření fekálního kalprotektinu, IgA a cytokinů vylučovaných stolicí (např. β-defensin, TNF-α, kationtový protein eozinofilů: ECP).

Některé bakteriální druhy by měly tendenci převládat v případě alergie nebo alergické senzibilizace, protože například určité druhy Clostridium a další by hrály ochrannou roli podporou syntézy určitých mastných kyselin s krátkým řetězcem a snížením produkce IL12, IFNγ a IL10.

Patofyziologie FPIES je v současné době špatně pochopena, protože neexistuje žádný biologický marker, který by potvrdil diagnózu nebo předpověděl vyléčení. Došlo by k reverzibilní parciální atrofii jejunálních klků spojenou s nespecifickým zánětem v ileu a tlustém střevě, ale digestivní endoskopie se v běžné praxi pro diagnostiku neprovádí. Na rozdíl od alergií zprostředkovaných IgE nejsou Th2 cytokiny u pacientů s FPIES zvýšené. Několik hodin po expozici odpovědné potravě je ve stolici pozorováno zvýšení neurotoxinu odvozeného od eosinofilů (EDN). Gastrointestinální zánět spojený s potravinovými alergiemi lze také studovat pomocí fekálního kalprotektinu nebo fekálního laktátu. Tento trávicí zánět může být spojen se zvýšením střevní propustnosti a může být zodpovědný za zvracení, průjem a hypovolemický šok imunologickou reakcí. Pokud je fekální kalprotektin nižší než 138 μg/g stolice, lze diagnózu FPIES vyloučit. Tyto předběžné výsledky naznačují změnu střevní mikroflóry, jak je pozorováno u jiných forem potravinových alergií, ale mikroflóra pacientů s FPIES nebyla dosud nikdy studována, pokud je nám známo.

Naše práce pak bude představovat první prospektivní studii u dětí s FPIES spojující prezentaci a klinický vývoj s fekální, slinnou a kožní mikroflórou.

Popisná klinická část určí věk v době diagnózy a věk vyléčení na základě potravin v našem souboru. Zkoušející popíše různá vedlejší kritéria pro diagnózu a související příznaky, které mohou být diagnostickými prvky, které se neobjevují v mezinárodním konsensu z roku 2017. Zkoušející posoudí riziko sérokonverze IgE během sledování. Zkoušející vyšetří biologické prvky během alergické reakce, aby posoudil závažnost reakcí (polymorfonukleární neutrofilní leukocytóza, methemoglobinémie).

Hlavní hypotéza:

Pokud je mikroflóra alergických pacientů s FPIES prozánětlivá, jako u jiných potravinových alergií, mělo by být pozorováno bakteriální složení a distribuce v závislosti na průběhu onemocnění s návratem do méně zánětlivého stavu po získání tolerance. Změna těchto výsledků by tak umožnila navrhnout prognostické markery vývoje této patologie a předpovědět vyléčení pacienta, aniž by bylo nutné provádět reintrodukční test odpovědné potraviny, která může být potenciálně nebezpečná s rizikem hypovolemie. šokovat.

1.2 Popis studované populace a zdůvodnění jejich výběru Studovaná populace je pediatrická, mladší 18 let, převážně kojenci, s klinickými argumenty ve prospěch FPIES.

FPIES je většinou popsán v dětské literatuře a zůstává málo známý dospělým lékařům s nedostatečně diagnostikovaným alergickým stavem.

U alergií zprostředkovaných IgE je terapeutickým cílem dosažení tolerance k odpovědné potravině již od dětského věku.

1.3 Popis prvků zahrnutých ve studii Patofyziologie FPIES je špatně pochopena, ale symptomy jsou primárně zažívací. Cílem je studovat střevní mikrobiotu pacientů, hledat rozdíl v diverzitě nebo distribuci bakteriálních populací a jejich metabolitů u pacientů s FPIES v průběhu času, pokud možno ve 3násobku evoluce SEIPA, konkrétně před vyléčením, do 24 hodin po expozici odpovědnému alergenu a po vyléčení.

Různá společenství mikroorganismů, která obývají naše tělo, interagují a tvoří biologickou entitu zvanou holobionte. Kožní a trávicí mikroflóra je spojena s imunitním systémem odpovědným za atopické onemocnění. To je důvod, proč vyšetřovatelé chtějí také studovat slinnou mikrobiotu, stejně jako kožní mikrobiotu, pomocí neinvazivních vzorků.

1.4 Odůvodnění doby trvání studie Střevní mikroflóra bude v laboratoři INRA v Jouy-en-Josas. Různé vzorky budou zmrazeny pro analýzu v laboratoři INRA v Jouy-en-Josas.

Mikrobiota bude sbírána v různých časech během přirozené evoluce FPIES, aby bylo možné odpovědět na hypotézu modifikace střevní mikrobioty během přirozené evoluce FPIES.

Celková doba trvání výzkumu bude 4 roky, za účelem odběru vzorků stolice, slin a kožních výtěrů alespoň u poloviny naší sledované kohorty, protože pacienti pravděpodobně dosáhnou středního věku hojení, který je kolem 3-5 let věku na mléko, které v naší kohortě nejvíce přispívá k alergiím (52 ​​%).