Longitudinale studie van de darm-, huid- en speekselmicrobiota bij kinderen met door voedsel geïnduceerd enterocolitissyndroom (SEIPA) (SEIBIOTE)

1.1 Huidige stand van kennis Food Protein-Induced Enterocolitis Syndrome (FPIES) is een voedselallergie met een prevalentie van 0,34% en een incidentie van 15,4 kinderen per 100.000 per jaar. Het is een niet-IgE-gemedieerde allergie, die zich manifesteert door braken 1 tot 4 uur na inname van het verdachte voedsel (belangrijkste criteria), zonder huid- of respiratoire manifestaties. Volgens de laatste definitie (JACI 2017) moeten ten minste 3 minder belangrijke criteria in verband worden gebracht met braken, waaronder de volgende: een tweede vergelijkbare episode van braken na inname van hetzelfde voedsel, het optreden van herhaald braken 1 tot 4 uur na inname van ander voedsel, lethargie, uitgesproken bleekheid, de noodzaak van een spoedbehandeling of intraveneuze rehydratie na inname van een verdacht voedsel, het begin van diarree binnen 24 uur, hypotensie of onderkoeling op het moment van reactie. De meest verantwoorde voedingsmiddelen voor PFIES zijn koemelk, granen, soja en vis. De triggers zijn afhankelijk van het land, waarschijnlijk in verband met eetgewoonten. De mediane tolerante leeftijd ligt later dan bij de andere vormen van niet-IgE-gemedieerde allergie, namelijk tussen de 3 en 5 jaar en is later voor vast voedsel dan voor vloeibaar voedsel. De gemiddelde leeftijd waarop koemelktolerantie wordt verkregen, varieert in de literatuur, ongeveer 8-10 maanden in Korea, ongeveer 1 jaar in Israël, ongeveer 5 jaar in de Verenigde Staten, maar veel later (14 jaar) als specifiek IgE optreedt tijdens de follow-up. omhoog. Er zijn in Frankrijk geen gegevens over de uithardingsleeftijd van SEIPA in koemelk.

Een eerste herintroductie van de verantwoorde voeding wordt voorgesteld op de leeftijd van 12-18 maanden als de diagnose werd gesteld tijdens de eerste levensmaanden en als specifiek IgE volgens de laatste aanbevelingen negatief is. Falen van de orale voedselprovocatie (OFC), wordt elke 6 maanden een nieuwe OFC voorgesteld tot genezing.

Wanneer de specifieke IgE positief zijn, is er sprake van een atypische FPIES en de methoden voor herintroductie van het voedsel zullen afhangen van de evolutie van IgE.

Het verband tussen de microbiota en de ontwikkeling van allergische ziekten is nu algemeen bekend. De darmmicrobiota varieert in diversiteit en bacteriële verspreiding bij patiënten met voedselallergieën in vergelijking met niet-allergische patiënten. De microbiota speelt een vroege rol bij de ontwikkeling van het immuunsysteem en dus bij de ontwikkeling of preventie van voedselallergieën waarbij de pro-inflammatoire en pro-allergische Th17-route betrokken is.

De intestinale microbiota wordt geëvalueerd door bacteriële diversiteit met behulp van RNA16-sequencing, in het bijzonder alfa-diversiteit (specifiek voor een monster) en bèta-diversiteit (vergelijking tussen verschillende monsters), bacteriële rijkdom, en door de bepaling van bacteriële metabolieten zoals korte-keten vetzuren, zoals butyraten, de meting van fecale calprotectine, IgA en cytokines uitgescheiden in ontlasting (bijv. β-defensine, TNF-α, kationisch eiwit van eosinofielen: ECP).

Bepaalde bacteriesoorten zouden de neiging hebben om te overheersen in geval van allergie of allergische sensibilisatie, aangezien bepaalde soorten van Clostridium en andere bijvoorbeeld een beschermende rol zouden spelen door de synthese van bepaalde vetzuren met een korte keten te bevorderen en door de productie van IL12, IFNγ te verminderen. , en IL10.

De pathofysiologie van FPIES wordt momenteel slecht begrepen omdat er geen biologische marker is om de diagnose te bevestigen of genezing te voorspellen. Er zou reversibele jejunale gedeeltelijke villeuze atrofie zijn geassocieerd met niet-specifieke ontsteking in het ileum en de dikke darm, maar digestieve endoscopie wordt in de routinepraktijk niet uitgevoerd voor de diagnose. In tegenstelling tot IgE-gemedieerde allergieën zijn Th2-cytokines niet verhoogd bij patiënten met FPIES. Enkele uren na blootstelling aan het verantwoorde voedsel wordt een toename van van eosinofiel afgeleid neurotoxine (EDN) in de ontlasting waargenomen. Gastro-intestinale ontsteking geassocieerd met voedselallergieën kan ook worden bestudeerd met behulp van fecaal calprotectine of fecaal lactaat. Deze spijsverteringsontsteking kan gepaard gaan met een toename van de darmpermeabiliteit en verantwoordelijk zijn voor braken, diarree en hypovolemische shock door een immunologische reactie. Als fecale calprotectine minder dan 138 μg/g ontlasting is, kan de diagnose van FPIES worden uitgesloten. Deze voorlopige resultaten suggereren een wijziging van de darmmicrobiota, zoals waargenomen bij andere vormen van voedselallergieën, maar de microbiota van patiënten met FPIES is tot nu toe nooit bestudeerd, voor zover wij weten.

Ons werk zal dan de eerste prospectieve studie vormen bij kinderen met FPIES die de presentatie en de klinische evolutie koppelt aan de fecale, speeksel- en cutane microbiota.

Het beschrijvende klinische deel zal de leeftijd bij diagnose en de leeftijd van genezing bepalen op basis van het voedsel in ons cohort. De onderzoeker zal de verschillende kleine criteria voor diagnose beschrijven, en de bijbehorende symptomen die mogelijk diagnostische elementen zijn die niet voorkomen in de internationale consensus van 2017. De onderzoeker beoordeelt het risico op IgE-seroconversie tijdens de follow-up. De onderzoeker zal tijdens een allergische reactie de biologische elementen onderzoeken om de ernst van de reacties te beoordelen (polymorfonucleaire neutrofiele leukocytose, methemoglobinemie).

Hoofdhypothese:

Als de microbiota van allergische patiënten met FPIES pro-inflammatoir is, zoals bij andere voedselallergieën, moet de samenstelling en verspreiding van de bacteriën afhankelijk van het verloop van de ziekte in acht worden genomen, met een terugkeer naar een minder inflammatoire toestand zodra tolerantie is verworven. Een verandering in deze resultaten zou het dus mogelijk maken om prognostische markers van de evolutie van deze pathologie voor te stellen en de genezing van de patiënt te voorspellen, zonder een herintroductietest van het verantwoorde voedsel uit te voeren, wat potentieel gevaarlijk kan zijn met risico op hypovolemie schok.

1.2 Beschrijving van de te bestuderen populatie en motivering van hun keuze De onderzoekspopulatie is pediatrisch, jonger dan 18 jaar, voornamelijk zuigelingen, met klinische argumenten ten gunste van FPIES.

FPIES wordt meestal beschreven in kinderliteratuur en blijft weinig bekend bij volwassen artsen met een ondergediagnosticeerde allergische aandoening.

Wat IgE-gemedieerde allergieën betreft, is het therapeutische doel tolerantie te bereiken voor verantwoorde voeding vanaf de kinderleeftijd.

1.3 Beschrijving van de elementen die door de studie worden bestreken De pathofysiologie van FPIES wordt slecht begrepen, maar de symptomen zijn voornamelijk spijsverteringssymptomen. Het doel is om de intestinale microbiota van patiënten te bestuderen, om te zoeken naar een verschil in diversiteit of verdeling van bacteriepopulaties en hun metabolieten bij patiënten met een FPIES in de loop van de tijd, indien mogelijk driemaal de evolutie van SEIPA, namelijk vóór genezing, binnen 24 uur. uur na blootstelling aan het verantwoordelijke allergeen en na genezing.

De verschillende gemeenschappen van micro-organismen die ons lichaam bevolken, werken op elkaar in en vormen een biologische entiteit die holobionte wordt genoemd. De microbiota van de huid en het spijsverteringsstelsel zijn gekoppeld aan het immuunsysteem dat verantwoordelijk is voor atopische aandoeningen. Daarom willen de onderzoekers ook de speekselmicrobiota bestuderen, evenals de huidmicrobiota, met behulp van niet-invasieve monsters.

1.4 Rationale voor de duur van het onderzoek De darmmicrobiota zal in het INRA-laboratorium in Jouy-en-Josas zijn. De verschillende stalen worden ingevroren voor analyse in het INRA-laboratorium in Jouy-en-Josas.

De microbiota zal op verschillende tijdstippen tijdens de natuurlijke evolutie van FPIES worden verzameld om de hypothese van een wijziging van de darmmicrobiota tijdens de natuurlijke evolutie van FPIES te beantwoorden.

De totale duur van het onderzoek zal 4 jaar zijn, om ontlastingsmonsters, speeksel en huiduitstrijkjes te verzamelen, in ten minste de helft van ons gevolgde cohort, omdat patiënten waarschijnlijk de mediane leeftijd van genezing hebben bereikt, die ongeveer 3-5 jaar oud is. jaar voor melk, wat de belangrijkste oorzaak is van allergieën in ons cohort (52%).