Estudio longitudinal de la microbiota intestinal, cutánea y salival en niños con síndrome de enterocolitis inducida por alimentos (SEIPA) (SEIBIOTE)

1.1 Estado actual del conocimiento El Síndrome de Enterocolitis Inducido por Proteínas Alimentarias (FPIES) es una alergia alimentaria con una prevalencia del 0,34% y una incidencia de 15,4 niños por 100.000 por año. Es una alergia no mediada por IgE, que se manifiesta por vómitos de 1 a 4 horas después de la ingestión del alimento sospechoso (criterio mayor), sin manifestaciones cutáneas ni respiratorias. Según la última definición (JACI 2017), se deben exigir al menos 3 criterios menores asociados a los vómitos entre los siguientes: un segundo episodio similar de vómitos tras la ingesta del mismo alimento, la aparición de vómitos repetidos de 1 a 4 horas tras la ingesta de otro alimento, letargo, palidez pronunciada, necesidad de tratamiento de emergencia o rehidratación intravenosa después de la ingestión de un alimento sospechoso, aparición de diarrea dentro de las 24 horas, hipotensión o hipotermia en el momento de la reacción. Los alimentos responsables del PFIES con mayor frecuencia son la leche de vaca, los cereales, la soja y el pescado. Los factores desencadenantes dependen del país, probablemente en relación con los hábitos alimentarios. La mediana de la edad de tolerancia es más tardía que en las otras formas de alergia no mediada por IgE, es decir, entre los 3 y los 5 años, y es más tardía para los alimentos sólidos que para los líquidos. La edad promedio de adquisición de tolerancia a la leche de vaca varía en la literatura, alrededor de 8-10 meses en Corea, alrededor de 1 año en Israel, alrededor de 5 años en los Estados Unidos, pero mucho más tarde (14 años) si se produce IgE específica durante el seguimiento. hasta. No hay datos en Francia sobre la edad de curación de SEIPA en la leche de vaca.

Se propone una primera reintroducción del alimento responsable a los 12-18 meses de edad si el diagnóstico se realizó durante los primeros meses de vida, y si las IgE específicas son negativas según las últimas recomendaciones. Fracaso de la provocación alimentaria oral (OFC), se propone una nueva OFC cada 6 meses hasta la curación.

Cuando las IgE específicas son positivas, entonces se trata de un FPIES atípico, y las formas de reintroducción del alimento dependerán de la evolución de las IgE.

El vínculo entre la microbiota y el desarrollo de enfermedades alérgicas es ahora bien conocido. La microbiota intestinal varía en términos de diversidad y distribución bacteriana en pacientes con alergias alimentarias en comparación con pacientes no alérgicos. La microbiota juega un papel temprano en el desarrollo del sistema inmunológico, y por lo tanto en el desarrollo o prevención de alergias alimentarias involucrando la vía Th17 proinflamatoria y proalérgica.

La microbiota intestinal se evalúa por la diversidad bacteriana mediante secuenciación RNA16, en particular la diversidad alfa (específica de una muestra) y la diversidad beta (comparación entre varias muestras), la riqueza bacteriana y la determinación de metabolitos bacterianos como los de cadena corta. ácidos grasos, como los butiratos, la medición de la calprotectina fecal, IgA y citocinas excretadas en las heces (p. ej., β-defensina, TNF-α, proteína catiónica de los eosinófilos: ECP).

Ciertas especies bacterianas tenderían a ser predominantes en caso de alergia o sensibilización alérgica, como por ejemplo ciertas especies de Clostridium y otras desempeñarían un papel protector al promover la síntesis de ciertos ácidos grasos de cadena corta, y al disminuir la producción de IL12, IFNγ , e IL10.

Actualmente, la fisiopatología del FPIES es poco conocida porque no existe un marcador biológico para confirmar el diagnóstico o predecir la curación. Habría una atrofia parcial de las vellosidades yeyunales reversible asociada con una inflamación inespecífica en el íleon y el colon, pero la endoscopia digestiva no se realiza en la práctica habitual para el diagnóstico. A diferencia de las alergias mediadas por IgE, las citocinas Th2 no aumentan en pacientes con FPIES. Varias horas después de la exposición al alimento responsable, se observa un aumento de la neurotoxina derivada de eosinófilos (EDN) en las heces. La inflamación gastrointestinal asociada con las alergias alimentarias también se puede estudiar utilizando la calprotectina fecal o el lactato fecal. Esta inflamación digestiva podría estar asociada a un aumento de la permeabilidad intestinal, y ser responsable de vómitos, diarreas y shock hipovolémico por reacción inmunológica. Si la calprotectina fecal es inferior a 138 μg/g de heces, se podría descartar el diagnóstico de FPIES. Estos resultados preliminares sugieren una alteración de la microbiota intestinal, como se observa en otras formas de alergias alimentarias, pero la microbiota de los pacientes con FPIES nunca se ha estudiado hasta la fecha, que sepamos.

Nuestro trabajo constituirá entonces el primer estudio prospectivo en niños con FPIES vinculando la presentación y la evolución clínica con la microbiota fecal, salival y cutánea.

La parte clínica descriptiva determinará la edad al diagnóstico y la edad de curación en función de los alimentos de nuestra cohorte. El investigador describirá los diferentes criterios menores para el diagnóstico y los síntomas asociados que pueden ser elementos diagnósticos que no aparecen en el consenso internacional de 2017. El investigador evaluará el riesgo de seroconversión de IgE durante el seguimiento. El investigador examinará los elementos biológicos durante una reacción alérgica para evaluar la gravedad de las reacciones (leucocitosis de neutrófilos polimorfonucleares, metahemoglobinemia).

Hipótesis principal:

Si la microbiota de los pacientes alérgicos con FPIES es proinflamatoria, como en otras alergias alimentarias, se debe observar la composición y distribución bacteriana en función del curso de la enfermedad, con un retorno a un estado menos inflamatorio una vez adquirida la tolerancia. Un cambio en estos resultados permitiría así proponer marcadores pronósticos de evolución de esta patología y predecir la curación del paciente, sin tener que realizar una prueba de reintroducción del alimento responsable, que puede ser potencialmente peligroso con riesgo de hipovolemia conmoción.

1.2 Descripción de la población a estudiar y justificación de su elección La población de estudio es pediátrica, menor de 18 años, principalmente lactantes, con argumentos clínicos a favor del FPIES.

El FPIES se describe principalmente en la literatura infantil y sigue siendo poco conocido por los médicos adultos con una afección alérgica infradiagnosticada.

En cuanto a las alergias mediadas por IgE, el objetivo terapéutico es lograr la tolerancia al alimento responsable desde la edad pediátrica.

1.3 Descripción de los elementos cubiertos por el estudio La fisiopatología del FPIES es poco conocida, pero los síntomas son principalmente digestivos. El objetivo es estudiar la microbiota intestinal de los pacientes, para buscar una diferencia en la diversidad o distribución de las poblaciones bacterianas y sus metabolitos en pacientes con un FPIES a lo largo del tiempo, si es posible a los 3 tiempos de evolución de la SEIPA, es decir antes de la cicatrización, dentro de los 24 horas después de la exposición al alérgeno responsable y después de la curación.

Las diferentes comunidades de microorganismos que pueblan nuestro cuerpo interactúan y forman una entidad biológica llamada holobionte. La microbiota cutánea y digestiva está ligada al sistema inmunitario responsable de la enfermedad atópica. Por eso, los investigadores también quieren estudiar la microbiota salival, así como la microbiota cutánea, utilizando muestras no invasivas.

1.4 Justificación de la duración del estudio La microbiota intestinal estará en el laboratorio INRA, en Jouy-en-Josas. Las distintas muestras se congelarán para su análisis en el laboratorio del INRA en Jouy-en-Josas.

Se recogerá la microbiota en diferentes momentos de la evolución natural del FPIES, con el fin de dar respuesta a la hipótesis de una modificación de la microbiota intestinal durante la evolución natural del FPIES.

La duración total de la investigación será de 4 años, para recolectar muestras de heces, saliva e hisopos de piel, en al menos la mitad de nuestra cohorte seguida, porque es probable que los pacientes hayan alcanzado la mediana de edad de curación, que es alrededor de 3-5 años de edad para la leche, que es el principal contribuyente a las alergias en nuestra cohorte (52%).