Längsschnittstudie der Darm-, Haut- und Speichelmikrobiota bei Kindern mit nahrungsmittelinduziertem Enterokolitis-Syndrom (SEIPA) (SEIBIOTE)

1.1 Aktueller Wissensstand Das Food Protein-Induced Enterocolitis Syndrome (FPIES) ist eine Nahrungsmittelallergie mit einer Prävalenz von 0,34 % und einer Inzidenz von 15,4 Kindern pro 100.000 pro Jahr. Es handelt sich um eine nicht-IgE-vermittelte Allergie, die sich durch Erbrechen 1 bis 4 Stunden nach der Einnahme des verdächtigen Lebensmittels (Hauptkriterium) ohne Haut- oder Atemwegssymptome manifestiert. Gemäß der letzten Definition (JACI 2017) sollten mindestens 3 Nebenkriterien im Zusammenhang mit Erbrechen erforderlich sein, darunter: eine zweite ähnliche Erbrechensepisode nach der Einnahme derselben Nahrung, das Auftreten von wiederholtem Erbrechen 1 bis 4 Stunden nach der Einnahme von ein anderes Nahrungsmittel, Lethargie, ausgeprägte Blässe, die Notwendigkeit einer Notfallbehandlung oder intravenösen Rehydrierung nach Einnahme eines verdächtigen Nahrungsmittels, Auftreten von Durchfall innerhalb von 24 Stunden, Hypotonie oder Hypothermie zum Zeitpunkt der Reaktion. Die am häufigsten für PFIES verantwortlichen Lebensmittel sind Kuhmilch, Getreide, Soja und Fisch. Die Auslöser hängen vom Land ab, wahrscheinlich in Bezug auf die Essgewohnheiten. Das mediane Toleranzalter liegt später als bei den anderen Formen der nicht-IgE-vermittelten Allergie, nämlich zwischen dem 3. und 5. Lebensjahr und bei fester Nahrung später als bei flüssiger Nahrung. Das durchschnittliche Alter der Toleranz gegenüber Kuhmilch variiert in der Literatur, etwa 8-10 Monate in Korea, etwa 1 Jahr in Israel, etwa 5 Jahre in den Vereinigten Staaten, aber viel später (14 Jahre), wenn spezifisches IgE während der Nachsorge auftritt. hoch. In Frankreich liegen keine Daten zum Reifealter von SEIPA in Kuhmilch vor.

Eine erste Wiedereinführung der verantwortlichen Nahrung wird im Alter von 12-18 Monaten vorgeschlagen, wenn die Diagnose in den ersten Lebensmonaten gestellt wurde und das spezifische IgE gemäß den neuesten Empfehlungen negativ ist. Versagen der oralen Nahrungsmittelprovokation (OFC), eine neue OFC wird alle 6 Monate bis zur Heilung vorgeschlagen.

Wenn das spezifische IgE positiv ist, handelt es sich um ein atypisches FPIES, und die Methoden zur Wiedereinführung des Futters hängen von der IgE-Entwicklung ab.

Der Zusammenhang zwischen Mikrobiota und der Entwicklung allergischer Erkrankungen ist mittlerweile bekannt. Die Darmmikrobiota unterscheidet sich hinsichtlich Diversität und bakterieller Verteilung bei Patienten mit Nahrungsmittelallergien im Vergleich zu nicht allergischen Patienten. Die Mikrobiota spielt eine frühe Rolle bei der Entwicklung des Immunsystems und damit bei der Entwicklung oder Prävention von Nahrungsmittelallergien, die den entzündungsfördernden und proallergischen Th17-Weg betreffen.

Die Darmmikrobiota wird anhand der bakteriellen Diversität mittels RNA16-Sequenzierung, insbesondere der Alpha-Diversität (probenspezifisch) und der Beta-Diversität (Vergleich zwischen mehreren Proben), des Bakterienreichtums und durch die Bestimmung bakterieller Metaboliten wie kurzkettiger bewertet Fettsäuren, wie Butyrate, die Messung von fäkalem Calprotectin, IgA und im Stuhl ausgeschiedenen Zytokinen (z. B. β-Defensin, TNF-α, kationisches Protein von Eosinophilen: ECP).

Bestimmte Bakterienarten würden im Falle einer Allergie oder allergischen Sensibilisierung tendenziell vorherrschend sein, da beispielsweise bestimmte Arten von Clostridium und andere eine schützende Rolle spielen würden, indem sie die Synthese bestimmter kurzkettiger Fettsäuren fördern und die Produktion von IL12, IFNγ, verringern und IL10.

Die Pathophysiologie von FPIES ist derzeit kaum verstanden, da es keinen biologischen Marker gibt, der die Diagnose bestätigt oder eine Heilung vorhersagt. Es würde eine reversible jejunale partielle Zottenatrophie in Verbindung mit einer unspezifischen Entzündung im Ileum und Dickdarm vorliegen, aber eine Verdauungsendoskopie wird in der Routinepraxis zur Diagnose nicht durchgeführt. Im Gegensatz zu IgE-vermittelten Allergien sind Th2-Zytokine bei Patienten mit FPIES nicht erhöht. Mehrere Stunden nach dem Kontakt mit dem verantwortlichen Nahrungsmittel wird im Stuhl ein Anstieg des von Eosinophilen stammenden Neurotoxins (EDN) beobachtet. Gastrointestinale Entzündungen im Zusammenhang mit Nahrungsmittelallergien können auch unter Verwendung von fäkalem Calprotectin oder fäkalem Laktat untersucht werden. Diese Verdauungsentzündung könnte mit einer Erhöhung der Darmpermeabilität einhergehen und durch immunologische Reaktion für Erbrechen, Durchfall und hypovolämischen Schock verantwortlich sein. Wenn das fäkale Calprotectin weniger als 138 μg/g Stuhl beträgt, kann die Diagnose eines FPIES ausgeschlossen werden. Diese vorläufigen Ergebnisse deuten auf eine Veränderung der Darmmikrobiota hin, wie sie bei anderen Formen von Nahrungsmittelallergien beobachtet wird, aber die Mikrobiota von Patienten mit FPIES wurde unseres Wissens bisher noch nie untersucht.

Unsere Arbeit wird dann die erste prospektive Studie bei Kindern mit FPIES darstellen, die die Präsentation und die klinische Entwicklung mit der fäkalen, speicheligen und kutanen Mikrobiota verknüpft.

Der beschreibende klinische Teil bestimmt das Alter bei der Diagnose und das Heilungsalter auf der Grundlage der Lebensmittel in unserer Kohorte. Der Prüfarzt wird die verschiedenen Nebenkriterien für die Diagnose und die damit verbundenen Symptome beschreiben, die möglicherweise diagnostische Elemente sind, die nicht im internationalen Konsens von 2017 enthalten sind. Der Prüfarzt wird das Risiko einer IgE-Serokonversion während der Nachsorge beurteilen. Der Prüfarzt untersucht die biologischen Elemente während einer allergischen Reaktion, um die Schwere der Reaktionen zu beurteilen (polymorphonukleäre neutrophile Leukozytose, Methämoglobinämie).

Haupthypothese:

Ist die Mikrobiota von Allergikern mit FPIES wie bei anderen Nahrungsmittelallergien proinflammatorisch, sollte die bakterielle Zusammensetzung und Verteilung in Abhängigkeit vom Krankheitsverlauf mit einer Rückkehr zu einem weniger entzündlichen Zustand nach Erreichen einer Toleranz beobachtet werden. Eine Änderung dieser Ergebnisse würde es somit ermöglichen, prognostische Marker für die Entwicklung dieser Pathologie vorzuschlagen und die Heilung des Patienten vorherzusagen, ohne einen Wiedereinführungstest mit dem verantwortlichen Lebensmittel durchführen zu müssen, was potenziell gefährlich sein kann mit dem Risiko einer Hypovolämie Schock.

1.2 Beschreibung der zu untersuchenden Population und Begründung ihrer Wahl Die Studienpopulation ist pädiatrisch, unter 18 Jahre alt, hauptsächlich Säuglinge, mit klinischen Argumenten zugunsten von FPIES.

FPIES wird hauptsächlich in der Kinderliteratur beschrieben und ist erwachsenen Ärzten mit einer unterdiagnostizierten allergischen Erkrankung wenig bekannt.

Wie bei den IgE-vermittelten Allergien ist das Therapieziel die Toleranz gegenüber dem verantwortlichen Lebensmittel ab dem pädiatrischen Alter.

1.3 Beschreibung der von der Studie abgedeckten Elemente Die Pathophysiologie von FPIES ist kaum bekannt, aber die Symptome sind hauptsächlich verdauungsbedingt. Ziel ist es, die Darmmikrobiota von Patienten zu untersuchen, um einen Unterschied in der Diversität oder Verteilung von Bakterienpopulationen und ihren Metaboliten bei Patienten mit einem FPIES im Laufe der Zeit zu suchen, wenn möglich zum 3-Zeitpunkt der Entwicklung von SEIPA, nämlich vor der Heilung, innerhalb von 24 Stunden nach Kontakt mit dem verantwortlichen Allergen und nach Heilung.

Die verschiedenen Gemeinschaften von Mikroorganismen, die unseren Körper bevölkern, interagieren und bilden eine biologische Einheit namens Holobionte. Haut- und Verdauungsmikrobiota sind mit dem Immunsystem verbunden, das für atopische Erkrankungen verantwortlich ist. Deshalb wollen die Forscher neben der Hautmikrobiota auch die Speichelmikrobiota mit nicht-invasiven Proben untersuchen.

1.4 Begründung für die Dauer der Studie Die Darmmikrobiota wird im INRA-Labor in Jouy-en-Josas untersucht. Die verschiedenen Proben werden zur Analyse im INRA-Labor in Jouy-en-Josas eingefroren.

Die Mikrobiota wird zu verschiedenen Zeitpunkten während der natürlichen Evolution von FPIES gesammelt, um die Hypothese einer Modifikation der intestinalen Mikrobiota während der natürlichen Evolution von FPIES zu beantworten.

Die Gesamtdauer der Forschung wird 4 Jahre betragen, um Stuhlproben, Speichel und Hautabstriche in mindestens der Hälfte unserer beobachteten Kohorte zu sammeln, da die Patienten wahrscheinlich das mittlere Heilungsalter erreicht haben, das bei etwa 3-5 liegt Lebensjahr für Milch, die in unserer Kohorte den größten Beitrag zu Allergien leistet (52 %).