Pitkittäinen tutkimus suoliston, ihon ja syljen mikrobiotosta lapsilla, joilla on ruoan aiheuttama enterokoliittisyndrooma (SEIPA) (SEIBIOTE)

1.1 Nykyinen tietämys Food Protein Induced Enterocolitis Syndrome (FPIES) on ruoka-aineallergia, jonka esiintyvyys on 0,34 % ja ilmaantuvuus 15,4 lasta 100 000:ta kohden vuodessa. Se on ei-IgE-välitteinen allergia, joka ilmenee oksentamisella 1–4 tuntia epäillyn ruoan nauttimisen jälkeen (pääkriteerit), ilman iho- tai hengitysoireita. Viimeisimmän määritelmän (JACI 2017) mukaan oksentamiseen tulee vaatia vähintään 3 vähäistä kriteeriä seuraavista: toinen samanlainen oksentelu saman ruoan nauttimisen jälkeen, toistuva oksentelu 1–4 tunnin kuluttua oksentamisesta. muu ruoka, letargia, selvä kalpeus, hätähoidon tai suonensisäisen nesteytyshoidon tarve epäilyttävän ruoan nauttimisen jälkeen, ripulin alkaminen 24 tunnin sisällä, hypotensio tai hypotermia reaktiohetkellä. PFIES:n yleisimpiä vastuullisia ruokia ovat lehmänmaito, viljat, soija ja kala. Laukaisimet riippuvat maasta, luultavasti suhteessa ruokailutottumuksiin. Keskimääräinen sietoikä on myöhempi kuin muissa ei-IgE-välitteisen allergian muodoissa, nimittäin 3–5 vuoden iässä, ja se on myöhempi kiinteiden elintarvikkeiden kuin nestemäisten elintarvikkeiden kohdalla. Lehmänmaidon sietokyvyn saavuttamisen keskimääräinen ikä vaihtelee kirjallisuudessa, noin 8-10 kuukautta Koreassa, noin 1 vuosi Israelissa, noin 5 vuotta Yhdysvalloissa, mutta paljon myöhemmin (14 vuotta), jos spesifistä IgE:tä esiintyy seurannan aikana. ylös. Ranskassa ei ole tietoa SEIPAn kuivatusiästä lehmänmaidossa.

Ensimmäistä kertaa vastuullisen ruoan uudelleenkäyttöä ehdotetaan 12-18 kuukauden iässä, jos diagnoosi on tehty ensimmäisten elinkuukausien aikana ja spesifinen IgE on viimeisimpien suositusten mukaan negatiivinen. Oral food -haasteen (OFC) epäonnistuessa ehdotetaan uutta OFC:tä kuuden kuukauden välein paranemiseen saakka.

Kun spesifinen IgE on positiivinen, se on silloin epätyypillinen FPIES, ja menetelmät ruuan palauttamiseksi riippuvat IgE:n kehityksestä.

Mikrobiootan ja allergisten sairauksien kehittymisen välinen yhteys tunnetaan nyt hyvin. Suoliston mikrobiot vaihtelevat monimuotoisuuden ja bakteerien jakautumisen suhteen ruoka-allergisilla potilailla verrattuna ei-allergisiin potilaisiin. Mikrobiootalla on varhainen rooli immuunijärjestelmän kehityksessä ja siten ruoka-allergioiden kehittymisessä tai ehkäisyssä, joihin liittyy pro-inflammatorinen ja proallerginen Th17-reitti.

Suoliston mikrobiota arvioidaan bakteerien monimuotoisuuden avulla käyttämällä RNA16-sekvensointia, erityisesti alfa-diversiteettiä (spesifistä näytteelle) ja beeta-diversiteettiä (vertailu useiden näytteiden välillä), bakteeririkkautta ja määrittämällä bakteerien aineenvaihduntatuotteita, kuten lyhytketjuisia. rasvahapot, kuten butyraatit, ulosteen kalprotektiinin, IgA:n ja ulosteeseen erittyneiden sytokiinien (esim. β-defensiini, TNF-α, eosinofiilien kationinen proteiini: ECP) ​​mittaaminen.

Tietyt bakteerilajit ovat yleensä vallitsevia allergian tai allergisen herkistymisen yhteydessä, koska esimerkiksi tietyt Clostridium-lajit ja muut toimisivat suojaavana roolina edistämällä tiettyjen lyhytketjuisten rasvahappojen synteesiä ja vähentämällä IL12:n, IFNy:n tuotantoa. ja IL10.

FPIES:n patofysiologia on tällä hetkellä huonosti ymmärretty, koska ei ole olemassa biologista merkkiainetta diagnoosin vahvistamiseksi tai paranemisen ennustamiseksi. Ei-spesifiseen sykkyräsuolen ja paksusuolen tulehdukseen liittyy palautuvaa jejunaalin osittaista villousatrofiaa, mutta ruoansulatuskanavan endoskopiaa ei tehdä rutiinikäytännössä diagnoosia varten. Toisin kuin IgE-välitteisissä allergioissa, Th2-sytokiinit eivät ole lisääntyneet potilailla, joilla on FPIES. Useita tunteja vastuulliselle ruoalle altistumisen jälkeen ulosteessa havaitaan eosinofiilistä peräisin olevan neurotoksiinin (EDN) lisääntymistä. Ruoka-aineallergioihin liittyvää maha-suolikanavan tulehdusta voidaan myös tutkia käyttämällä ulosteen kalprotektiinia tai ulosteen laktaattia. Tämä ruoansulatuskanavan tulehdus voi liittyä suolen läpäisevyyden lisääntymiseen, ja se voi olla vastuussa oksentelusta, ripulista ja hypovoleemisesta sokista immunologisen reaktion vuoksi. Jos ulosteen kalprotektiini on alle 138 μg/g uloste, FPIES-diagnoosi voidaan sulkea pois. Nämä alustavat tulokset viittaavat suoliston mikrobiotan muutokseen, kuten on havaittu muissa ruoka-allergioiden muodoissa, mutta FPIES-potilaiden mikrobiotaa ei ole tähän mennessä tutkittu tietojemme mukaan.

Työmme muodostaa sitten ensimmäisen prospektiivisen tutkimuksen lapsilla, joilla on FPIES, joka yhdistää esityksen ja kliinisen kehityksen ulosteen, syljen ja ihon mikrobiotaan.

Kuvaava kliininen osa määrittää kohorttimme ruokien perusteella iän diagnoosin yhteydessä ja parantumisajan. Tutkija kuvaa erilaisia ​​​​diagnoosin pieniä kriteerejä ja niihin liittyviä oireita, jotka saattavat olla diagnostisia elementtejä, joita ei esiinny vuoden 2017 kansainvälisessä konsensuksessa. Tutkija arvioi IgE-serokonversion riskin seurannan aikana. Tutkija tutkii biologisia elementtejä allergisen reaktion aikana arvioidakseen reaktioiden vakavuutta (polymorfonukleaarinen neutrofiilileukosytoosi, methemoglobinemia).

Päähypoteesi:

Jos FPIES-allergisten potilaiden mikrobiota on tulehdusta edistävä, kuten muissakin ruoka-aineallergioissa, bakteerikoostumusta ja -jakaumaa on seurattava taudin kulusta riippuen, ja tulehdusta lievempään tilaan palaamista toleranssin saavuttua. Muutos näissä tuloksissa antaisi siten mahdollisuuden ehdottaa tämän patologian evoluution ennustemarkkereita ja ennustaa potilaan paranemista ilman, että joutuisi suorittamaan vastuullisen ruoan uudelleenkäyttötestiä, mikä voi olla mahdollisesti vaarallista ja hypovoleemian riskiä. shokki.

1.2 Kuvaus tutkittavasta populaatiosta ja valinnan perustelut Tutkimuspopulaatio on alle 18-vuotiaita lapsia, pääasiassa pikkulapsia, kliinisin perustein FPIES:n puolesta.

FPIES on enimmäkseen kuvattu lastenkirjallisuudessa, ja se on edelleen vähän tiedossa aikuisille lääkäreille, joilla on alidiagnosoitu allerginen sairaus.

Mitä tulee IgE-välitteisiin allergioihin, terapeuttisena tavoitteena on saavuttaa toleranssi vastuullisen ruoan suhteen lasten iästä alkaen.

1.3 Tutkimuksen kattamien tekijöiden kuvaus FPIES:n patofysiologia on huonosti ymmärretty, mutta oireet liittyvät pääasiassa ruoansulatuskanavaan. Tavoitteena on tutkia potilaiden suoliston mikrobiotaa, etsiä eroa bakteeripopulaatioiden ja niiden metaboliittien monimuotoisuudessa tai jakautumisessa potilailla, joilla on FPIES, mahdollisuuksien mukaan 3 kertaa SEIPA:n kehityksestä, eli ennen paranemista, 24 vuoden sisällä. tunnin kuluttua altistumisesta vastuussa olevalle allergeenille ja parantumisen jälkeen.

Kehoamme kantavat eri mikro-organismiyhteisöt ovat vuorovaikutuksessa ja muodostavat biologisen kokonaisuuden nimeltä holobionte. Ihon ja ruoansulatuskanavan mikrobiota on yhteydessä atooppisesta sairaudesta vastaavaan immuunijärjestelmään. Tästä syystä tutkijat haluavat tutkia myös syljen mikrobistoa sekä ihon mikrobistoa non-invasiivisten näytteiden avulla.

1.4 Tutkimuksen keston perustelut Suoliston mikrobiota on INRA-laboratoriossa, Jouy-en-Josasissa. Eri näytteet pakastetaan analysoitavaksi INRA-laboratoriossa Jouy-en-Josasissa.

Mikrobioota kerätään eri aikoina FPIES:n luonnollisen evoluution aikana, jotta voidaan vastata hypoteesiin suoliston mikrobiotan modifikaatiosta FPIES:n luonnollisen evoluution aikana.

Tutkimuksen kokonaiskesto on 4 vuotta ulostenäytteiden, syljen ja ihonäytteiden keräämiseksi vähintään puolessa seuratusta kohortistamme, koska potilaat ovat todennäköisesti saavuttaneet parantumisen mediaaniiän, joka on noin 3-5 vuotta. vuoden iässä maidolle, joka on suurin allergioiden aiheuttaja kohortissamme (52 %).