Studium metabolismu v lymfatickém výklenku CLL

Chronická lymfoidní leukémie (CLL) je nejčastější leukémie dospělých, která je charakterizována maligní monoklonální akumulací nádorových a klidových B buněk v periferní krvi. V pokročilých stádiích onemocnění (Binetovo stádium C) tato populace proniká do kostní dřeně (BM) a proliferuje do lymfoidních orgánů, což vede k rozsáhlé adenopatii. Richterova transformace je nejagresivnější závažnou komplikací CLL (přeměna nemoci na agresivní lymfom) detekovanou na základě TEP/CT (pozitronová emisní tomografie/počítačová tomografie), která ukazuje vysoce odvozenou spotřebu glukózy rakovinnými buňkami. Klinické údaje od pacientů s CLL s akutizací onemocnění ukázaly hypermetabolickou lymfadenopatii s vysokou standardizovanou hodnotou vychytávání (SUV), zatímco vychytávání traceru do BM je nízké. Předpokládali jsme, že nádorové mikroprostředí lymfatické niky podporuje proliferaci a glykolytickou aktivitu buněk CLL, které se stávají zvláště odolnými vůči léčbě. Vývoj ex-vivo modelu nádoru, který reprodukuje mikroprostředí niky lymfatických uzlin, se zdá být nezbytný pro identifikaci a validaci nových terapeutických cílů, protože navzdory terapeutickému arzenálu, který je k dispozici, někteří pacienti stále recidivují nebo jsou refrakterní na léčbu. Naším cílem je i/ charakterizovat tento výklenek rezistence vývojem ex-vivo modelu nádoru a ii/ zhodnotit in-vitro účinnost spojení současných léčeb (RFC, Ibrutinib nebo Venetoclax) s antimetabolickými terapiemi (inhibitory glykolýzy) Naše laboratoř vyvíjí ex-vivo modely lymfatické niky u CLL založené na kokulturách leukemických buněk od pacientů stimulovaných CpG ODN a IL2 s primárními lidskými lymfatickými fibroblasty (HLF) (EC 12PP15). Tato kokultura nebyla nikdy v literatuře popsána a umožňuje nám studovat lymfatickou niku pacientů s CLL. Průzkum lymfatických uzlin (LN) u CLL vyžaduje invazivní přístup a nepřináší žádné další informace v prvotní diagnostice. Poté jsme ověřili náš model společné kultury pomocí komplementárních přístupů: zvýšená životaschopnost, proliferace a rezistence vůči ibrutinibu, spojené se zvýšenou produkcí antiapoptotických proteinů, jako jsou MCL1 a BCL2, po 48 hodinách společné kultivace. Zadruhé jsme studovali metabolismus v tomto rezistenčním výklenku. Zjišťujeme zvýšenou produkci laktátu a akutní spotřebu glukózy spojenou se silnou metabolickou aktivací detekovanou SEAHORSE a produkcí glykolýzových enzymů, jako je hexokináza 2. Naše studie představuje originální projekt, protože charakterizovala energetický metabolismus CLL lymfatická nika vyvinutím originálního ex-vivo modelu a zlepšila naše chápání příspěvku specifického mikroprostředí k disociaci metabolické aktivity pomocí SUV max v BM a lymfatické nikě. Antimetabolické terapie jsou účinné na kokultivaci CLL buněk a mohly by být alternativou pro refrakterní nebo relabující pacienty při současné léčbě.