Studio del Metabolismo nella Nicchia Linfatica della CLL

La leucemia linfoide cronica (LLC) è la leucemia adulta più comune caratterizzata da un accumulo monoclonale maligno di cellule B tumorali e quiescenti nel sangue periferico. Negli stadi avanzati della malattia (stadio C di Binet), questa popolazione invade il midollo osseo (BM) e prolifera negli organi linfoidi provocando un'adenopatia diffusa. La trasformazione di Richter è una grave complicanza molto aggressiva della CLL (trasformazione della malattia in un linfoma aggressivo) rilevata sulla base della TEP/TC (tomografia a emissione di positroni/tomografia computerizzata) che mostra un consumo di glucosio altamente derivato da parte delle cellule tumorali. I dati clinici di pazienti affetti da CLL con acutizzazione della malattia hanno mostrato una linfoadenopatia ipermetabolica con un valore di assorbimento standardizzato elevato (SUV) mentre vi è un assorbimento del tracciante di basso grado nel BM. Abbiamo supposto che il microambiente tumorale della nicchia linfatica promuova la proliferazione e l'attività glicolitica delle cellule CLL che diventano particolarmente resistenti al trattamento. Lo sviluppo di un modello tumorale ex-vivo che riproduca il microambiente della nicchia linfonodale appare essenziale per identificare e validare nuovi bersagli terapeutici perché nonostante l'arsenale terapeutico disponibile alcuni pazienti hanno ancora ricadute o sono refrattari al trattamento. I nostri obiettivi sono i / Caratterizzare questa nicchia di resistenza mediante lo sviluppo di un modello tumorale ex-vivo e ii / Valutare in-vitro l'efficacia dell'associazione degli attuali trattamenti (RFC, Ibrutinib o Venetoclax) con terapie anti-metaboliche (inibitori di glicolisi) Il nostro laboratorio sta sviluppando un modello ex-vivo della nicchia linfatica nella CLL basato su co-colture di cellule leucemiche di pazienti stimolati con CpG ODN e IL2 con fibroblasti linfatici umani primari (HLF) (EC 12PP15). Questa co-coltura non è mai stata descritta in letteratura e permette di studiare la nicchia linfatica dei pazienti affetti da CLL. L'esplorazione dei linfonodi (LN) nella CLL richiede un accesso invasivo e non porta alcuna informazione aggiuntiva nella diagnosi iniziale. Quindi, abbiamo convalidato il nostro modello di co-coltura utilizzando approcci complementari: maggiore vitalità, proliferazione e resistenza a Ibrutinib, associata a una maggiore produzione di proteine ​​​​anti-apoptotiche come MCL1 e BCL2 dopo 48 ore di co-coltura. In secondo luogo, abbiamo studiato il metabolismo in questa nicchia di resistenza. Troviamo un'aumentata produzione di lattato e un consumo acuto di glucosio, associati ad una forte attivazione metabolica rilevata da SEAHORSE e dalla produzione di enzimi della glicolisi come l'esochinasi 2. Il nostro studio costituisce un progetto originale perché ha caratterizzato il metabolismo energetico della LLC nicchia linfatica sviluppando un originale modello ex-vivo e migliorato la nostra comprensione del contributo del microambiente specifico nella dissociazione dell'attività metabolica utilizzando SUV max in BM e nicchia linfatica. Le terapie anti-metaboliche sono efficaci sulle cellule CLL in co-coltura e potrebbero essere un'alternativa per i pazienti refrattari o recidivi in ​​corso di trattamento.