Untersuchung des Stoffwechsels in der lymphatischen Nische der CLL

Chronische lymphatische Leukämie (CLL) ist die häufigste Leukämie bei Erwachsenen, die durch eine bösartige monoklonale Ansammlung von tumoralen und ruhenden B-Zellen im peripheren Blut gekennzeichnet ist. In fortgeschrittenen Stadien der Krankheit (Binet-Stadium C) dringt diese Population in das Knochenmark (BM) ein und proliferiert in die lymphatischen Organe, was zu einer weit verbreiteten Adenopathie führt. Die Richter-Transformation ist eine aggressivste schwerwiegende Komplikation der CLL (Transformation der Krankheit in ein aggressives Lymphom), die anhand von TEP/CT (Positronenemissionstomographie/Computertomographie) nachgewiesen wird und einen hochgradig abgeleiteten Glukoseverbrauch durch Krebszellen zeigt. Klinische Daten von CLL-Patienten mit Akutisierung der Krankheit zeigten eine hypermetabolische Lymphadenopathie mit einem hohen standardisierten Aufnahmewert (SUV), während es eine geringe Tracer-Aufnahme in das KM gibt. Wir nahmen an, dass die Tumormikroumgebung der lymphatischen Nische die Proliferation und glykolytische Aktivität von CLL-Zellen fördert, die besonders resistent gegen die Behandlung werden. Die Entwicklung eines Ex-vivo-Tumormodells, das die Mikroumgebung der Lymphknotennische reproduziert, scheint unerlässlich, um neue therapeutische Ziele zu identifizieren und zu validieren, da trotz des verfügbaren therapeutischen Arsenals einige Patienten immer noch einen Rückfall erleiden oder auf eine Behandlung nicht ansprechen. Unsere Ziele sind i / Charakterisierung dieser Resistenznische durch die Entwicklung eines Ex-vivo-Tumormodells und ii / Bewertung der Wirksamkeit der Kombination aktueller Behandlungen (RFC, Ibrutinib oder Venetoclax) mit antimetabolischen Therapien (Inhibitoren) in-vitro der Glykolyse) Unser Labor entwickelt ein Ex-vivo-Modell der lymphatischen Nische bei CLL basierend auf Co-Kulturen von Leukämiezellen von Patienten, die mit CpG ODN und IL2 mit primären humanen lymphatischen Fibroblasten (HLF) (EC 12PP15) stimuliert wurden. Diese Co-Kultur wurde noch nie in der Literatur beschrieben und ermöglicht es uns, die lymphatische Nische von CLL-Patienten zu untersuchen. Die Exploration von Lymphknoten (LN) bei CLL erfordert einen invasiven Zugang und bringt keine zusätzlichen Informationen für die Erstdiagnose. Dann validierten wir unser Co-Kulturmodell mit komplementären Ansätzen: erhöhte Lebensfähigkeit, Proliferation und Resistenz gegen Ibrutinib, verbunden mit einer erhöhten Produktion von anti-apoptotischen Proteinen wie MCL1 und BCL2 nach 48 Stunden Co-Kultur. Zweitens haben wir den Stoffwechsel in dieser Resistenznische untersucht. Wir finden eine erhöhte Produktion von Laktat und einen akuten Verbrauch von Glukose, verbunden mit einer starken metabolischen Aktivierung, die durch SEAHORSE nachgewiesen wurde, und durch die Produktion von Glykolyseenzymen wie Hexokinase 2. Unsere Studie stellt ein originelles Projekt dar, da sie den Energiestoffwechsel der CLL charakterisiert lymphatische Nische durch die Entwicklung eines originalen Ex-vivo-Modells und verbesserte unser Verständnis des Beitrags der spezifischen Mikroumgebung bei der Dissoziation der Stoffwechselaktivität unter Verwendung von SUV max in BM und lymphatischer Nische. Antimetabolische Therapien sind bei Co-Kultur von CLL-Zellen wirksam und könnten eine Alternative für refraktäre oder rezidivierte Patienten unter der derzeitigen Behandlung darstellen.