Undersøgelse af metabolismen i den lymfatiske niche af CLL

Kronisk lymfoid leukæmi (CLL) er den mest almindelige voksne leukæmi, der er karakteriseret ved en ondartet monoklonal ophobning af tumorale og hvilende B-celler i det perifere blod. I fremskredne stadier af sygdommen (Binet stadium C) invaderer denne population knoglemarven (BM) og prolifererer ind i lymfoide organer, hvilket resulterer i udbredt adenopati. Richters transformation er en yderst aggressiv alvorlig komplikation af CLL (transformation af sygdommen til et aggressivt lymfom), der er påvist baseret på TEP/CT (Positron Emission Tomography/computerized tomography), der viser højt afledt glukoseforbrug af kræftceller. Kliniske data fra CLL-patienter med sygdomsakutisering viste hypermetabolisk lymfadenopati med høj standardiseret optagelsesværdi (SUV), mens der er lavgradig sporstofoptagelse i BM. Vi antog, at tumormikromiljøet i den lymfatiske niche fremmer spredningen og den glykolytiske aktivitet af CLL-celler, som bliver særligt resistente over for behandling. Udviklingen af ​​en ex-vivo-tumormodel, der reproducerer mikromiljøet i lymfeknude-nichen, forekommer afgørende for at identificere og validere nye terapeutiske mål, fordi på trods af det tilgængelige terapeutiske arsenal, får nogle patienter stadig tilbagefald eller er refraktære over for behandling. Vores mål er at i / Karakterisere denne niche af resistens ved at udvikle en ex-vivo tumormodel og ii / Evaluere in vitro effektiviteten af ​​associeringen af ​​nuværende behandlinger (RFC, Ibrutinib eller Venetoclax) med anti-metaboliske terapier (hæmmere) af glykolyse) Vores laboratorium er ved at udvikle en ex-vivo-modeller af lymfatiske niche i CLL baseret på co-kulturer af leukæmiceller fra patienter stimuleret med CpG ODN og IL2 med primære humane lymfatiske fibroblaster (HLF) (EC 12PP15). Denne samkultur er aldrig blevet beskrevet i litteraturen og giver os mulighed for at studere den lymfatiske niche hos CLL-patienter. Lymfeknudeudforskning (LN) i CLL kræver invasiv adgang og giver ingen yderligere information i den indledende diagnose. Derefter validerede vi vores co-kultur model ved hjælp af komplementære tilgange: øget levedygtighed, proliferation og resistens over for Ibrutinib, forbundet med øget produktion af anti-apoptotiske proteiner såsom MCL1 og BCL2 efter 48 timers co-kultur. For det andet studerede vi stofskiftet i denne resistensniche. Vi finder en øget produktion af laktat og et akut forbrug af glukose, forbundet med en stærk metabolisk aktivering detekteret af SEAHORSE og ved produktion af glykolyseenzymer såsom hexokinase 2. Vores undersøgelse udgør et originalt projekt, fordi det karakteriserede energimetabolismen af ​​CLL. lymfatisk niche ved at udvikle en original ex-vivo-model og forbedret vores forståelse af bidraget fra det specifikke mikromiljø i dissociationen af ​​metabolisk aktivitet ved hjælp af SUV max i BM og lymfatisk niche. Antimetaboliske terapier er effektive på co-kultur CLL-celler og kan være et alternativ til refraktære eller recidiverende patienter under nuværende behandling.