Изучение метаболизма в лимфатической нише ХЛЛ

Хронический лимфолейкоз (ХЛЛ) является наиболее распространенным лейкозом у взрослых, который характеризуется злокачественным моноклональным накоплением опухолевых и покоящихся В-клеток в периферической крови. На поздних стадиях заболевания (стадия С по Бине) эта популяция проникает в костный мозг (КМ) и пролиферирует в лимфоидные органы, что приводит к распространенной лимфаденопатии. Трансформация Рихтера является наиболее агрессивным серьезным осложнением ХЛЛ (трансформация заболевания в агрессивную лимфому), выявляемым на основе ТЕР/КТ (позитронно-эмиссионной томографии/компьютерной томографии), которая показывает высокопроизводное потребление глюкозы раковыми клетками. Клинические данные пациентов с ХЛЛ с обострением заболевания показали гиперметаболическую лимфаденопатию с высоким стандартизированным значением поглощения (SUV), тогда как поглощение метки в костном мозге было низким. Мы предположили, что опухолевое микроокружение лимфатической ниши способствует пролиферации и гликолитической активности клеток ХЛЛ, которые становятся особенно резистентными к лечению. Разработка модели опухоли ex-vivo, которая воспроизводит микроокружение ниши лимфатического узла, представляется важной для выявления и проверки новых терапевтических целей, поскольку, несмотря на доступный терапевтический арсенал, у некоторых пациентов все еще возникают рецидивы или они не поддаются лечению. Наши цели состоят в том, чтобы i / охарактеризовать эту нишу резистентности путем разработки модели опухоли ex-vivo и ii / оценить in vitro эффективность сочетания современных методов лечения (RFC, ибрутиниб или венетоклакс) с антиметаболическими препаратами (ингибиторы гликолиза) Наша лаборатория разрабатывает ex-vivo модели лимфатической ниши при ХЛЛ на основе кокультур лейкозных клеток пациентов, стимулированных CpG ODN и IL2, с первичными лимфатическими фибробластами человека (HLF) (EC 12PP15). Эта кокультура никогда не была описана в литературе и позволяет нам изучать лимфатическую нишу пациентов с ХЛЛ. Исследование лимфатических узлов (ЛУ) при ХЛЛ требует инвазивного доступа и не дает дополнительной информации при первоначальной диагностике. Затем мы проверили нашу модель совместного культивирования, используя дополнительные подходы: повышенная жизнеспособность, пролиферация и устойчивость к ибрутинибу, связанные с повышенной продукцией антиапоптотических белков, таких как MCL1 и BCL2, после 48 часов совместного культивирования. Во-вторых, мы изучали метаболизм в этой нише резистентности. Мы обнаруживаем повышенное производство лактата и резкое потребление глюкозы, связанные с сильной метаболической активацией, обнаруженной с помощью SEAHORSE, и с производством ферментов гликолиза, таких как гексокиназа 2. Наше исследование представляет собой оригинальный проект, поскольку оно характеризовало энергетический метаболизм ХЛЛ. лимфатической нише, разработав оригинальную модель ex-vivo и расширив наше понимание вклада специфического микроокружения в диссоциацию метаболической активности с использованием SUV max в BM и лимфатической нише. Антиметаболическая терапия эффективна при совместном культивировании клеток ХЛЛ и может быть альтернативой для рефрактерных или рецидивирующих пациентов при текущем лечении.