Estudio del Metabolismo en el Nicho Linfático de la LLC

La leucemia linfoide crónica (LLC) es la leucemia más común en adultos que se caracteriza por una acumulación monoclonal maligna de células B tumorales e inactivas en la sangre periférica. En estadios avanzados de la enfermedad (estadio C de Binet), esta población invade la médula ósea (MO) y prolifera en los órganos linfoides, lo que da como resultado una adenopatía generalizada. La transformación de Richter es una complicación grave muy agresiva de la LLC (transformación de la enfermedad en un linfoma agresivo) detectada en base a TEP/CT (Tomografía por Emisión de Positrones/tomografía computarizada) que muestra un consumo de glucosa altamente derivado por parte de las células cancerosas. Los datos clínicos de pacientes con LLC con agudización de la enfermedad mostraron linfadenopatía hipermetabólica con un alto valor de captación estandarizado (SUV), mientras que existe una captación de marcador de bajo grado en la MO. Suponemos que el microambiente tumoral del nicho linfático promueve la proliferación y actividad glucolítica de las células de LLC que se vuelven particularmente resistentes al tratamiento. El desarrollo de un modelo tumoral ex-vivo que reproduzca el microambiente del nicho del ganglio linfático parece fundamental para identificar y validar nuevas dianas terapéuticas porque, a pesar del arsenal terapéutico disponible, algunos pacientes todavía recaen o son refractarios al tratamiento. Nuestros objetivos son i/ Caracterizar este nicho de resistencia mediante el desarrollo de un modelo tumoral ex vivo y ii/ Evaluar in vitro la eficacia de la asociación de los tratamientos actuales (RFC, Ibrutinib o Venetoclax) con terapias antimetabólicas (inhibidores de glucólisis) Nuestro laboratorio está desarrollando modelos ex-vivo del nicho linfático en CLL basados ​​en cocultivos de células leucémicas de pacientes estimulados con CpG ODN e IL2 con fibroblastos linfáticos humanos primarios (HLF) (EC 12PP15). Este cocultivo nunca ha sido descrito en la literatura y nos permite estudiar el nicho linfático de los pacientes con LLC. La exploración de los ganglios linfáticos (NL) en la LLC requiere un acceso invasivo y no aporta ninguna información adicional en el diagnóstico inicial. Luego, validamos nuestro modelo de cocultivo utilizando enfoques complementarios: mayor viabilidad, proliferación y resistencia a Ibrutinib, asociado con una mayor producción de proteínas antiapoptóticas como MCL1 y BCL2 después de 48 horas de cocultivo. En segundo lugar, estudiamos el metabolismo en este nicho de resistencia. Encontramos un aumento de la producción de lactato y un consumo agudo de glucosa, asociado a una fuerte activación metabólica detectada por SEAHORSE y por la producción de enzimas de la glucólisis como la hexoquinasa 2. Nuestro estudio constituye un proyecto original porque caracterizó el metabolismo energético de la LLC nicho linfático mediante el desarrollo de un modelo ex vivo original y mejoró nuestra comprensión de la contribución del microambiente específico en la disociación de la actividad metabólica utilizando SUV max en BM y nicho linfático. Las terapias antimetabólicas son eficaces en el cocultivo de células de CLL y podrían ser una alternativa para los pacientes refractarios o en recaída bajo el tratamiento actual.