Badanie metabolizmu w niszy limfatycznej CLL

Przewlekła białaczka limfatyczna (PBL) jest najczęstszą białaczką dorosłych, która charakteryzuje się złośliwą monoklonalną akumulacją nowotworowych i spoczynkowych komórek B we krwi obwodowej. W zaawansowanych stadiach choroby (stadium Bineta C) populacja ta atakuje szpik kostny (BM) i namnaża się do narządów limfatycznych, co powoduje rozległą adenopatię. Transformacja Richtera jest najbardziej agresywnym poważnym powikłaniem CLL (transformacja choroby w agresywnego chłoniaka) wykrytym na podstawie TEP/CT (Pozytonowa Tomografia Emisyjna/ tomografia komputerowa), które pokazuje wysoce pochodne zużycie glukozy przez komórki nowotworowe. Dane kliniczne uzyskane od pacjentów z PBL z ostrym stanem chorobowym wykazały limfadenopatię hipermetaboliczną z wysoką standaryzowaną wartością wychwytu (SUV), podczas gdy wychwyt znacznika do BM jest niskiego stopnia. Przypuszczaliśmy, że mikrośrodowisko guza niszy limfatycznej sprzyja proliferacji i aktywności glikolitycznej komórek CLL, które stają się szczególnie oporne na leczenie. Opracowanie modelu nowotworu ex vivo, który odtwarza mikrośrodowisko niszy węzła chłonnego, wydaje się niezbędne do identyfikacji i walidacji nowych celów terapeutycznych, ponieważ pomimo dostępnego arsenału terapeutycznego niektórzy pacjenci nadal mają nawroty lub są oporni na leczenie. Naszym celem jest i/ scharakteryzowanie tej niszy oporności poprzez opracowanie modelu nowotworu ex-vivo oraz ii/ ocena in-vitro skuteczności skojarzenia obecnych metod leczenia (RFC, Ibrutinib lub Venetoklaks) z terapiami antymetabolicznymi (inhibitory glikolizy) Nasze laboratorium opracowuje modele ex-vivo niszy limfatycznej w CLL w oparciu o wspólne hodowle komórek białaczkowych od pacjentów stymulowanych CpG ODN i IL2 z pierwotnymi ludzkimi fibroblastami limfatycznymi (HLF) (EC 12PP15). Ta kokultura nigdy nie została opisana w literaturze i pozwala nam badać niszę limfatyczną pacjentów z PBL. Eksploracja węzłów chłonnych (LN) w PBL wymaga dostępu inwazyjnego i nie wnosi dodatkowych informacji we wstępnej diagnostyce. Następnie zweryfikowaliśmy nasz model wspólnej hodowli, stosując uzupełniające się podejścia: zwiększoną żywotność, proliferację i oporność na ibrutynib, związaną ze zwiększoną produkcją białek antyapoptotycznych, takich jak MCL1 i BCL2, po 48 godzinach wspólnej hodowli. Po drugie, badaliśmy metabolizm w tej niszy odpornościowej. Odkryliśmy zwiększoną produkcję mleczanu i nagłe spożycie glukozy, związane z silną aktywacją metaboliczną wykrytą przez SEAHORSE oraz przez produkcję enzymów glikolizy, takich jak heksokinaza 2. Nasze badanie stanowi oryginalny projekt, ponieważ scharakteryzowało metabolizm energetyczny PBL niszy limfatycznej, opracowując oryginalny model ex-vivo i pogłębiając nasze zrozumienie wkładu określonego mikrośrodowiska w dysocjację aktywności metabolicznej przy użyciu SUV max w BM i niszy limfatycznej. Terapie antymetaboliczne są skuteczne w przypadku współhodowli komórek CLL i mogą stanowić alternatywę dla pacjentów opornych na leczenie lub z nawrotem w ramach obecnego leczenia.