Gymnema Sylvestre vs Berberine v genové expresi adipokinů pro obezitu (GS VS BBR A)

Dohled nad studií V rámci komplexního programu péče o obezitu a nadváhu na Vyšší lékařské fakultě byla provedena srovnávací, deskriptivní, observační, longitudinální a prospektivní analytická studie. Tato studie byla provedena plně v souladu s pokyny správné klinické praxe a Helsinskou deklarací. Studie byla registrována u Výboru pro výzkum a etiku Vyšší lékařské fakulty (ESM.CE-01/7-12-2015). Všichni pacienti podepsali informovaný souhlas a informace byly chráněny prostřednictvím dopisu o důvěrnosti.

Pacienti Zahrnuli jsme 50 mexických pacientů obou pohlaví, starších 18 let, s indexem tělesné hmotnosti (BMI) vyšším než 30 kg(kilogram)/M2 (obezita I, II a III stupeň), bez předchozí diagnózy diabetes mellitus, ale s minimálně dvěma rizikovými faktory onemocnění (anamnéza rodičů nebo sourozenců, starší 40 let, sedavý způsob života, kontrolovaná arteriální hypertenze, glykémie nalačno < 126 mg/dl nebo glykovaný hemoglobin < 6,5 %). Klíčová vylučovací kritéria zahrnovala (i) těhotné pacientky, (ii) diabetiky a (iii) pacienty s alergickou reakcí na kteroukoli složku doplňků. První studijní skupina, skupina A (25 pacientů), byla léčena GS v dávce dvou 200mg tobolek před snídaní, zatímco ve druhé skupině byla skupina B (25 pacientů) léčena BBR v dávce jedné 500mg tablety tři krát denně před každým jídlem. V obou skupinách trvala léčba 3 měsíce.

Postupy a výsledky studie Antropometrické, fyziologické a biochemické parametry byly měřeny ve dvou sezeních, před a po léčbě. Antropometrická měření zahrnovala tělesnou hmotnost, výšku, obvod pasu a boků, navíc k analýze těla pomocí přístroje Inbody 770. Jako fyziologické měřítko byl uvažován pouze krevní tlak s použitím anomometrů značky WelchAllyn s manžetou pro obézní pacienty. Z biochemických parametrů byla měřena glykémie nalačno, lipidový profil (celkový cholesterol, triglyceridy, HDL, LDL), bazální inzulín a HbA1c. Dodržování léčby a přítomnost nežádoucích účinků byla zaznamenávána pomocí logaritmu, který udával čas, kdy byly tablety požity a zda měly v daný den nějaké nežádoucí účinky.

Dále byly odebrány vzorky plné krve 50 pacientům, 25 bylo léčeno GS (skupina A) a 25 dostávalo léčbu BBR (skupina B). Extrakce tRNA (transfer ribonukleové kyseliny) byla provedena pomocí techniky TRIzol®Reagent, která se skládá ze směsi guanidinisokyanátu a fenol-chloroformu. Jakmile byla izolována celková RNA, byla suspendována ve vodě bez RNázy, aby se zabránilo možné degradaci vzorku před pokračováním v reverzní transkripci. Extrakce a integrita tRNA byla ověřena pomocí elektroforézy na agarózovém gelu. Konečná čistota vzorků byla vypočtena na základě absorbance získané měřením při 260-280. Amplifikace cDNA (komplementární DNA) byla provedena pomocí syntézního kitu "First Strand cDNA transscription" pro rtPCR od Roche. Pro stanovení relativní exprese mRNA (messenger ribonukleové kyseliny) studovaných genů byl proveden postup polymerázové řetězové reakce v reálném čase (RT-PCR) pomocí sond z knihovny lidských transkriptomů (Human Universal Probe Library), nano LightCycler. termocykler a reakční směs typu TaqMan, vše od značky Roche Diagnostics (Roche Diagnostics GmbH (Gesellschaft mit beschränkter Haftung), Mannheim, Německo). Oligo sekvence primerů (sense a antisense) byly navrženy pomocí softwaru ProbeFinder (Apelin, NM_017413.4, F, 5´ gaa agt ggg gga tgg cta ag 3´, R, 5´ ccc acc cac tac cct ctt ct 3´, Omentin, NM_017625.2, F, 5´ tga ggg tca ccg gat gta ac 3´, R, 5´ gga ctg gcc tct gga aag ta 3´, Resistin, NM_001193374.1, F, 5´ cca ccg aga ggg atg aaa g 3´, R, 5´ ttc ttc cat gga gca cag g 3´ a Visfatin, NM_005746.2, F, 5´ aag gga tgg aac tac att ctt gag 3´, R, 5´ ctg tgt ttt cca ccg tga ag 3'. Reakční směs byla připravena podle protokolu výrobce. Každý vzorek byl analyzován v duplikátech a získaná data byla analyzována pomocí nano softwaru LightCycler.

Statistická analýza Distribuci kvantitativních dat provedl Shapiro Wilk. Porovnání frekvencí bylo provedeno pomocí X2, zatímco srovnání bazálních průměrů mezi skupinami bylo provedeno Studentovým t-testem. Konečné průměry byly porovnány se Studentovým t-testem, kdy nebyly zjištěny žádné statistické rozdíly v bazálním srovnání, zatímco u parametrů s významnými rozdíly v bazálním měření byla pro srovnání konečných průměrů aplikována kovariační úprava (opakovaná měření ANOVA) a Bonferroniho test. mezi skupinami. Samokontrolovaná analýza byla provedena pomocí párového t testu. Analýzy byly provedeny pomocí softwaru GraphPad Prism, verze 8.0.0 pro Windows (GraphPad Software, San Diego, CA, USA), a softwaru SPSS, verze 19 (IBM Corp. Released 2015. IBM SPSS Statistics pro Windows, verze 19.0. Armonk, NY (New York), USA: IBM Corp). Hodnota p<0,05 byla považována za statistickou významnost.