Gymnema Sylvestre vs Berberina na expressão gênica de adipocinas na obesidade (GS VS BBR A)

Supervisão do ensaio Foi realizado um estudo comparativo, descritivo, observacional, longitudinal e de análise prospectiva no Programa de Atenção Integral à Obesidade e ao Excesso de Peso da Faculdade Superior de Medicina. Este estudo foi realizado em total conformidade com as diretrizes de boas práticas clínicas e com a Declaração de Helsinque. O estudo foi registrado no Comitê de Ética e Pesquisa da Escola Superior de Medicina (ESM.CE-01/7-12-2015). Todos os pacientes assinaram o termo de consentimento livre e esclarecido e as informações foram protegidas por meio de carta de confidencialidade.

Pacientes Foram incluídos 50 pacientes mexicanos de ambos os sexos, maiores de 18 anos, com índice de massa corporal (IMC) superior a 30 kg(quilogramas)/m2 (obesidade grau I, II e III), sem diagnóstico prévio de diabetes mellitus, mas com pelo menos dois fatores de risco para a doença (história dos pais ou irmãos, idade superior a 40 anos, sedentarismo, hipertensão arterial controlada, glicemia de jejum < 126 mg/dL ou hemoglobina glicada < 6,5%). Os principais critérios de exclusão incluíram (i) pacientes grávidas, (ii) diabéticos e (iii) pacientes com reação alérgica a qualquer componente dos suplementos. O primeiro grupo de estudo, grupo A (25 pacientes) foi tratado com GS na dose de duas cápsulas de 200 mg antes do café da manhã, enquanto no segundo grupo, grupo B (25 pacientes) foi tratado com BBR na dose de um comprimido de 500 mg três vezes ao dia antes de cada refeição. Em ambos os grupos, o tratamento durou 3 meses.

Procedimentos e resultados do ensaio Parâmetros antropométricos, fisiológicos e bioquímicos foram medidos em duas sessões, antes e depois do tratamento. As medidas antropométricas foram peso corporal, altura, circunferência da cintura e quadril, além da análise corporal por meio do Inbody 770. Como medida fisiológica, foi considerada apenas a pressão arterial utilizando anomanômetros da marca WelchAllyn com manguito para pacientes obesos. Em relação aos parâmetros bioquímicos, foram mensurados glicemia de jejum, perfil lipídico (colesterol total, triglicerídeos, HDL, LDL), insulina basal e HbA1c. A adesão ao tratamento e a presença de efeitos adversos foram registradas por meio de um registro que indicava o horário em que os comprimidos foram ingeridos e se apresentavam algum efeito adverso naquele dia.

Além disso, foram coletadas amostras de sangue total de 50 pacientes, 25 receberam tratamento com GS (grupo A) e 25 receberam tratamento com BBR (grupo B). A extração do tRNA (ácido ribonucleico de transferência) foi realizada pela técnica TRIzol®Reagent, que consiste em uma mistura de isocianato de guanidina e fenol-clorofórmio. Uma vez isolado o RNA total, ele foi suspenso em água livre de RNase para evitar possível degradação da amostra antes de prosseguir com a transcrição reversa. A extração e integridade do tRNA foram verificadas por meio de eletroforese em gel de agarose. A pureza final das amostras foi calculada com base na absorvância obtida com uma medição a 260-280. A amplificação de cDNA (DNA complementar) foi realizada utilizando o kit de síntese "First Strand cDNA transcrição" para rtPCR da Roche. Um procedimento de reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR) foi realizado para determinar a expressão relativa do mRNA(ácido ribonucleico mensageiro) dos genes estudados, utilizando sondas da biblioteca de transcriptoma humano (Human Universal Probe Library), um LightCycler nano termociclador e uma mistura reacional tipo TaqMan, todos da marca Roche Diagnostics (Roche Diagnostics GmbH(Gesellschaft mit beschränkter Haftung), Mannheim, Alemanha). As sequências oligo dos primers (sense e antisense) foram projetadas com o software ProbeFinder (Apelin, NM_017413.4, F, 5´ gaa agt ggg gga tgg cta ag 3´, R, 5´ ccc acc cac tac cct ctt ct 3´, Omentin, NM_017625.2, F, 5´ tga ggg tca ccg gat gta ac 3´, R, 5´ gga ctg gcc tct gga aag ta 3´, Resistin, NM_001193374.1, F, 5´ cca ccg aga ggg atg aaa g 3´, R, 5´ ttc ttc cat gga gca cag g 3´ e Visfatin, NM_005746.2, F, 5´ aag gga tgg aac tac att ctt gag 3´, R, 5´ ctg tgt ttt cca ccg tga ag 3'. A mistura reacional foi preparada de acordo com o protocolo do fabricante. Cada amostra foi analisada em duplicata e os dados obtidos foram analisados ​​com o software LightCycler nano.

Análise estatística A distribuição dos dados quantitativos foi realizada por Shapiro Wilk. A comparação das frequências foi realizada com X2, enquanto a comparação das médias basais entre os grupos foi realizada com o teste t de Student. As médias finais foram comparadas com o teste t de Student quando não foram encontradas diferenças estatísticas na comparação basal, enquanto nos parâmetros com diferenças significativas na medida basal foi aplicado um ajuste de covariáveis ​​(ANOVA de medidas repetidas) e o teste de Bonferroni para comparar as médias finais. entre grupos. A análise autocontrolada foi realizada com teste t pareado. As análises foram realizadas com software GraphPad Prism, versão 8.0.0 para Windows (GraphPad Software, San Diego, CA, EUA) e software SPSS, versão 19 (IBM Corp. Lançado em 2015. IBM SPSS Statistics para Windows, Versão 19.0. Armonk, NY (Nova York), EUA: IBM Corp). Um valor de p<0,05 foi considerado como significância estatística.