Patogeneze chronického onemocnění ledvin spojeného s metabolickou dysfunkcí- asociovaným nealkoholickým ztukovatěním jater (MAFLD) a odpověď na léčbu perorálním semaglutidem.

NAFLD a metabolický syndrom se staly významnými zdravotními problémy celosvětově s podstatnými důsledky pro zdraví ledvin. Interakce mezi NAFLD, metabolickým syndromem a CKD vyžaduje komplexní pochopení základních mechanismů a sdílených patogenních drah.
Jejich sdílené rizikové faktory, molekulární mechanismy a genetická predispozice představují základ tohoto vztahu.

V souladu s tím se očekává, že léčebné přístupy s kombinovanou účinností u NAFLD a chronického poškození ledvin pozitivně ovlivní přirozený průběh této škodlivé interakce.

GLP1-R agonisté GLP1-R agonisté (GLP1-RAs) jsou nové účinné antidiabetické látky s prokázanou účinností při snižování závažných nežádoucích kardiovaskulárních příhod.
Kromě svého účinku na snížení hladiny glukózy mohou být jejich příznivé účinky na játra spojeny s vlivem na AMPK/mTOR dráhu.
Semaglutid byl spojován s významným poklesem tělesné hmotnosti, alaninaminotransferázy, jaterní steatózy a ztuhlostí. GLP1-RAs mohou také zlepšit histologické znaky NAFLD, jako je ukládání tuku v játrech, steatohepatitida a fibróza.
GLP1-RAs prokázaly přínosy v prevenci rozvoje nebo zastavení progrese CKD.
Podporuje také antioxidační a protizánětlivé účinky, které mohou být mezi rozhodujícími faktory tohoto renoprotektivního účinku, spolu s úbytkem hmotnosti, krevním tlakem a snižováním hladiny glukózy.

Primární cíl - Změřit progresi CKD a NAFLD ve skupině léčené semaglutidem ve srovnání s neléčenou skupinou.

Sekundární cíle - 1. Provést studie na zvířecích modelech k potvrzení primárního cíle provedením jaterní a renální histologie.

Studijní populace - Do studie budou zařazeni všichni pacienti s diagnózou NAFLD s nebo bez DM typu 2 s CKD (GFR<60 ml/min a albuminurie (>330 mg/mmol)).

STUDIJNÍ PLÁN Typ studie - Randomizovaná kontrolovaná studie (RCT) Doba trvání studie - 3 roky Intervence - přidání perorálního semaglutidu jednou denně (od 3 mg do 14 mg). Začneme s 3 mg jednou denně a zvýšíme až na 14 mg jednou denně.
Kontrolní rameno - pacienti dostávající standardní péči.

Statistická analýza: Kategorické hodnoty byly uváděny jako čísla, frekvence a procenta.
Kontinuální data byla uváděna jako medián a interkvartilové rozpětí (IQR) nebo průměr se směrodatnou odchylkou.
Pro srovnání kategorických hodnot byl v závislosti na velikosti vzorku použit Chi-kvadrát/Chi-kvadrát s Yatesovou korekcí/Fisherův test.
Pro srovnání kontinuálních dat byl podle potřeby použit nepárový t-test nebo Mann-Whitneyův test. Hodnota p nižší než 0,05 byla použita jako hodnota statistické významnosti pro účely této studie. Bude provedena analýza podle záměru k léčbě a podle protokolu a budou hlášeny jakékoli nežádoucí události.

ZVÍŘECÍ MODEL Pro studii jsou vybráni samci myší C57BL/6J (6 týdnů starých). Myším bude vyvoláno jaterní onemocnění krmením hlodavčí dietou s 58 Kcal% tuku a sacharózou (D12331 - Research diets) po dobu 20-32 týdnů a myši na standardní dietě budou zařazeny jako kontroly.
Šestitýdenním myším bude po dobu dvou týdnů podávána 50% suplementace vysokotučné diety se standardní dietou pro aklimatizaci.
Poté bude podávána kompletní vysokotučná dieta.

Pro odraz stavu onemocnění na začátku léčby budou z obou skupin usmrcena zvířata.
Histologie jater a ledvin bude provedena na začátku podávání dávky (základní skupina), v tomto okamžiku budou také analyzovány další koncové body a biochemické parametry.

Ekvivalentní dávka pro perorální podání zvířatům bude vypočtena pomocí známé lidské dávky semaglutidu.
Perorální tablety semaglutidu budou rozdrceny na prášek a znovu suspendovány v destilované vodě pro perorální podání sondou.
Semaglutid nebo vozidlo (destilovaná voda/normální fyziologický roztok) bude podáván perorálně denně po dobu 8-12 týdnů, přičemž tělesná hmotnost, spotřeba potravy a vody budou denně sledovány.
Od začátku 20. týdne bude prováděn týdenní test tolerance inzulínu a test tolerance glukózy k analýze inzulinové rezistence a hyperglykémie u myšího modelu.

Na konci studie bude odebrána krev retroorbitální punkcí pro analýzu jaterních enzymů, plazmatických lipidů (ALT, AST, TG a TC), sérové močoviny, kreatininu a močoviny v krvi.
Moč bude sbírána pro měření albuminu a kreatininu pomocí komerčně dostupných ELISA souprav.
Odebrané plazmatické vzorky budou použity k měření hladin adiponektinu, leptinu, rezistinu a ghrelinu pomocí komerčně dostupných ELISA souprav.
Zvířata budou usmrcena pomocí koktejlu ketaminu a xylazinu a jaterní a renální tkáně budou odebrány, zváženy a podrobeny histologii, expresi genů a dalším biochemickým parametrům pro další studium a závěry.

Tato očekávaná výstupní data mají za cíl prokázat účinnost semaglutidu při zpomalování progrese CKD a NAFLD, ověřenou jak klinickými, tak preklinickými studiemi, čímž podpoří jeho potenciální použití jako terapeutické možnosti pro tyto stavy.