Patogeneza przewlekłej choroby nerek związanej z metaboliczną stłuszczeniową chorobą wątroby (MAFLD) i odpowiedź na leczenie doustną semaglutydą.

Niewątkowo stłuszczeniowa choroba wątroby niezwiązana z alkoholem (NAFLD) i zespół metaboliczny stały się istotnymi problemami zdrowotnymi na całym świecie, z poważnymi implikacjami dla zdrowia nerek. Wzajemne oddziaływanie między NAFLD, zespołem metabolicznym i przewlekłą chorobą nerek (CKD) wymaga kompleksowego zrozumienia leżących u ich podstaw mechanizmów i wspólnych szlaków patogenetycznych. Ich wspólne czynniki ryzyka, mechanizmy molekularne i predyspozycje genetyczne stanowią podstawę tej zależności.

W związku z tym oczekuje się, że podejścia terapeutyczne o łącznej skuteczności w NAFLD i przewlekłym uszkodzeniu nerek będą pozytywnie wpływać na naturalny przebieg tej szkodliwej interakcji.

Agoniści receptora GLP-1 (GLP1-RAs) to nowe, silne leki przeciwcukrzycowe o udowodnionej skuteczności w redukcji poważnych niepożądanych zdarzeń sercowo-naczyniowych. Poza działaniem obniżającym poziom glukozy, ich korzystne efekty wątrobowe mogą być związane z wpływem na szlak AMPK/mTOR. Semaglutyd wiązał się ze znacznym zmniejszeniem masy ciała, aktywności aminotransferazy alaninowej, stłuszczenia i sztywności wątroby. GLP1-RAs mogą również poprawiać cechy histologiczne w NAFLD, takie jak odkładanie się tłuszczu w wątrobie, stłuszczeniowe zapalenie wątroby i włóknienie. GLP1-RAs wykazały korzyści w zapobieganiu rozwojowi lub zahamowaniu progresji CKD. Promowanie działań antyoksydacyjnych i przeciwzapalnych może być jednym z decydujących czynników w tym efektie nefroprotekcyjnym, wraz z utratą masy ciała, obniżeniem ciśnienia krwi i poziomu glukozy.

Główny cel - Zmierzenie progresji CKD i NAFLD w grupie leczonej Semaglutydem w porównaniu z grupą nieleczoną.

Cele drugorzędne - 1. Przeprowadzenie badań na modelu zwierzęcym w celu potwierdzenia celu głównego poprzez wykonanie histologii wątroby i nerek.

Populacja badana - Do badania zostaną włączeni wszyscy pacjenci z rozpoznanym NAFLD, z cukrzycą typu 2 lub bez niej, z CKD (GFR <60 ml/min i albuminuria (>330 mg/mmol)).

PLAN BADANIA Typ badania - Randomizowane badanie kontrolowane (RCT) Okres badania - 3 lata Interwencja - dodanie doustnego semaglutydu raz dziennie (od 3 mg do 14 mg). Zaczniemy od 3 mg raz dziennie i zwiększymy do 14 mg raz dziennie. Grupa kontrolna - pacjenci otrzymujący standardową opiekę.

Analiza statystyczna: Wartości kategoryczne przedstawiono jako liczby, częstości i procenty. Dane ciągłe przedstawiono jako medianę i zakres międzykwartylowy (IQR) lub średnią z odchyleniem standardowym. Do porównania wartości kategorycznych, w zależności od wielkości próby, użyto testu chi-kwadrat / chi-kwadrat z poprawką Yatesa / testu Fishera. Do porównania danych ciągłych, odpowiednio, użyto testu t-Studenta dla prób niezależnych lub testu Manna-Whitneya. Do analizy statystycznej użyto oprogramowania 16. Wartość p poniżej 0,05 przyjęto jako wartość istotności statystycznej dla celów tego badania. Przeprowadzona zostanie analiza wg zamiaru leczenia (ITT) i wg protokołu (PP), a wszelkie zdarzenia niepożądane zostaną zgłoszone.

MODEL ZWIERZĘCY Do badania wybrano samce myszy C57BL/6J (6-tygodniowe). U myszy wywołano chorobę wątroby poprzez karmienie dietą dla gryzoni z 58% kalorii z tłuszczu i sacharozy (D12331 - Research Diets) przez 20-32 tygodnie. Myszy na standardowej diecie będą włączone jako kontrola. 6-tygodniowe myszy będą karmione dietą uzupełnianą w 50% dietą wysokotłuszczową ze standardową karmą przez okres dwóch tygodni w celu aklimatyzacji. Następnie podawana będzie pełna dieta wysokotłuszczowa.

Aby odzwierciedlić stan choroby na początku leczenia, zwierzęta z obu grup zostaną poddane eutanazji. Histologia wątroby i nerek zostanie wykonana na początku podawania dawki (grupa wyjściowa), w tym punkcie przeanalizowane zostaną również inne punkty końcowe i parametry biochemiczne.

Równoważną dawkę doustną dla zwierząt obliczy się przy użyciu znanej dawki ludzkiej Semaglutydu. Tabletki z doustnym semaglutydem zostaną rozkruszone na proszek i zawieszone w wodzie destylowanej do podania doustnego przez zgłębnik. Semaglutyd lub środek nośny (woda destylowana / sól fizjologiczna) będą podawane doustnie codziennie przez 8-12 tygodni, przy codziennym monitorowaniu masy ciała oraz spożycia pokarmu i wody. Test tolerancji insuliny i test tolerancji glukozy będą przeprowadzane co tydzień od początku 20. tygodnia w celu analizy insulinooporności i hiperglikemii w modelu mysim.

Po zakończeniu badania, krew pobrana drogą zaoczodołową zostanie zebrana do analizy enzymów wątrobowych, lipidów osocza (ALT, AST, TG i TC), mocznika w surowicy, kreatyniny i azotu mocznikowego we krwi. Mocz zostanie zebrany do pomiaru albuminy i kreatyniny przy użyciu dostępnych komercyjnie zestawów ELISA. Zebrane próbki osocza zostaną wykorzystane do pomiaru poziomów adiponektyny, leptyny, rezystyny i greliny przy użyciu dostępnych komercyjnie zestawów ELISA. Zwierzęta zostaną poddane eutanazji przy użyciu koktajlu ketaminy i ksylazyny, a tkanki wątroby i nerek zostaną pobrane, zważone i poddane histologii, analizie ekspresji genów i innym parametrom biochemicznym do dalszych badań i wnioskowania.

Oczekiwane rezultaty mają na celu wykazanie skuteczności Semaglutydu w spowalnianiu progresji CKD i NAFLD, zweryfikowanej zarówno w badaniach klinicznych, jak i przedklinicznych, wspierając tym samym jego potencjalne zastosowanie jako opcji terapeutycznej w tych schorzeniach.