Kardiometabolisk sundhed hos børn udsat for antiretroviral terapi (ART) i utero (ARTMOMSBABES)

I. Beregning af prøvestørrelse Antallet af deltagere, der kræves for at vise statistisk signifikans, er baseret på tidligere publicerede undersøgelser, hvor vaskulær funktion blev vurderet hos HIV-patienter (Agu et al., 2019). En fejlsandsynlighed (α) på 0,05 og power (1-β) på 0,80 og en gennemsnitlig effektstørrelse (d) på 0,5 blev brugt til at beregne stikprøvestørrelsen (n= 64 personer). Hvis vi antager en frafaldsrate på 25 %, vil vi bruge N = (64 + (64*25)/100) = 80 mødre/gruppe for at sikre, at vi har nok stikprøvestørrelse/gruppe til at vise statistisk signifikans. Det samlede antal deltagende mødre vil derfor være 160 (80 tilfælde og 80 kontroller) og deres afkom - 160.

II. Etisk godkendelse Etisk samtykke og tilladelse til at udføre forskningsprojektet vil blive indhentet fra Det Sundhedsvidenskabelige Forsknings- og Etikudvalg (HRSEC) ved Walter Sisulu University (WSU). Formålet med undersøgelsen vil blive forklaret til kvinder, der går på svangreklinikken på Umtata General og Nelson Mandela Academic Hospital, Mthatha, Eastern Cape Province. Gravide kvinder, der vil være villige til at deltage, skal underskrive informerede samtykkeformularer for at deltage i undersøgelsen og for at tillade deres børn at deltage i undersøgelsen fra fødslen.

III. Undersøgelsesdesign Et prospektivt case-kontrolstudiedesign vil blive brugt i denne undersøgelse.

IV. Udvælgelseskriterier Kvinder syd for Sahara med singleton ukomplicerede 11-14 uger gamle graviditeter skal være HIV-positive for casegruppen og HIV-negative for kontrolgruppen. Gravide kvinder med type 2-diabetes, svangerskabsdiabetes, nyre- og kardiovaskulære sygdomme eller enhver kritisk helbredstilstand vil blive udelukket fra undersøgelsen

V. Forsøgsplan

Arbejdspakke 1 (Gravide kvinder):

Tre svangerskabsbesøg vil blive registreret til denne undersøgelse - Disse besøg vil blive foretaget i løbet af det første, andet og tredje trimester af graviditeten.

Følgende oplysninger og parametre vil blive vurderet under hvert svangerskabsbesøg:

1. Baseline information: Maternal demografisk, obstetrisk og familiehistorie af hjerte-kar-sygdomme under det første besøg ved hjælp af et spørgeskema - en gang fri ved starten af ​​undersøgelsen.
2. Antropometriske mål: Højde og vægt vil blive bestemt i henhold til anbefalingerne fra NHANES, 2009 anbefalingerne. BMI vil blive beregnet ved hjælp af formlen vægt/(højde (m) x højde (m)).
3. Blodtryksmålinger: Kontorblodtryk vil blive målt som beskrevet af Muntner et al., (2019) i tre eksemplarer med tre minutters intervaller efter 10 minutters hvile i siddende stilling. Dette vil blive efterfulgt af 24 timers ambulatorisk blodtryksmåling til bestemmelse af dagtid/natblodtryk og dyppefænotype.
4. Placental morfometri, arkitektur og vaskularisering: Livmoderarterier, navlearterie og mellemhjernearterie og livmoderarterie gennemsnitligt pulserende indeks vil blive bestemt ved ultralyd. Føtal cerebroplacental ratio vil blive beregnet, når det er muligt.
5. Endotelfunktionstests: Carotis intima medias tykkelse, pulsbølgehastighed og flowmedieret opbremsning og retinal arterievurdering vil blive målt ved hjælp af ultralyd og Vicorder (Ellins, 2017). Nethindens mikrovaskulatur vil blive undersøgt for at bestemme endotelfunktionen.
6. Markører for endotelfunktion: Endocan, asymmetrisk dimethylarginin (ADMA) og nitrogenoxid (NO) vil blive analyseret ved hjælp af ELISA-sæt i henhold til producentens instruktioner.
7. Markører for oxidativ stress: Lipidperoxidation, total antioxidantkapacitet og 8-hydoxyl-2-deoxyguanin (8-OHdG) vil blive bestemt ved hjælp af ELISA-sæt i henhold til producentens protokoller.
8. Lipidprofilindekser: Totalkolesterol, triglycerid, LDL-kolesterol og HDL-kolesterol og oxideret LDL-kolesterol vil blive målt i henhold til producentens protokol.
9. Insulinresistens: Fastende glukose, glykeret hæmoglobin og insulinkoncentrationer vil blive bestemt ved hjælp af kits i henhold til producentens metoder. HOMA-IR-formlen vil blive brugt til at beregne insulinresistens fra hurtig glucose og insulin.
10. Nyrefunktionsindekser: glomerulær filtrationshastighed (GFR), kreatinin og albumin vil blive bestemt, og albumin til kreatinin-forholdet beregnes.

Arbejdspakke 2 (nyfødte):

Under fødslen vil der blive indsamlet navlestrengsblod til vurdering af markører for oxidativt stress og endotelfunktion og epigenetiske markører i fosteret. Følgende data vil blive indsamlet:

1. Antropometriske mål: Barnets vægt, længde, kranieomkreds vil blive målt.
2. Blodtryksmålinger: Tilfældigt blodtryk vil blive målt ved oscillometri ved hjælp af passende engangsmanchetter i armstørrelse. Blodtrykket måles i tre eksemplarer med fem minutters intervaller mindst en time efter barnets måltid, og når barnet sover (Samantha et al, 2015).
3. Markører for endotelfunktion: Endocan, asymmetrisk dimethylarginin (ADMA) og nitrogenoxid (NO) vil blive analyseret ved hjælp af ELISA-sæt i henhold til producentens instruktioner.
4. Markører for oxidativ stress: Lipidperoxidation, total antioxidantkapacitet og 8-hydoxyl-2-deoxyguanin (8-OHdG) vil blive bestemt ved hjælp af ELISA-sæt i henhold til producentens protokoller.
5. Lipidprofilindekser: Totalkolesterol, triglycerid, LDL-kolesterol og HDL-kolesterol og oxideret LDL-kolesterol vil blive målt i henhold til producentens protokol.
6. Insulinresistens: glukose og insulinkoncentrationer i navlestrengsblod vil blive bestemt i henhold til producentens metoder. HOMA-IR-formlen vil blive brugt til at beregne insulinresistens.
7. Nyrefunktionsindekser: glomerulær filtrationshastighed (GFR), kreatinin og albumin vil blive bestemt. Albumin til kreatinin-forholdet vil også blive bestemt.
8. Epigenetiske markører: Urinkoncentrationer af 5-methyl-2-deoxycytidin og trimethylhiston H3K9 ved brug af Elisa-sættet i henhold til producentens metoder.

Arbejdspakke 3 (mødre efter 3 måneders opfølgning efter fødslen)

Mødre vil følges op tre måneder efter fødslen. Under dette besøg vil der ikke blive indsamlet blod eller urinprøver fra mødrene. Urinprøver vil blive indsamlet fra babyer til måling af CVD-risikoskabere. Følgende data vil blive indsamlet:

1. Antropometriske mål: Højde og vægt vil blive bestemt i henhold til anbefalingerne fra NHANES, 2009 anbefalingerne. BMI vil blive beregnet ved hjælp af formlen vægt/(højde (m) x højde (m)) for både mor og baby.
2. Blodtryksmålinger: Kontorblodtryk vil blive målt som beskrevet af Puntner et al., (2019) i tre eksemplarer med tre minutters intervaller efter 10 minutters hvile i siddende stilling. Dette vil blive efterfulgt af 24 timers ambulatorisk blodtryksmåling til bestemmelse af dagtid/natblodtryk og dyppefænotype - mor
3. Blodtrykket vil blive målt i barnet i liggende stilling.
4. Endotelfunktionstests: Carotis intima medias tykkelse, pulsbølgehastighed og flowmedieret opbremsning og retinal arterievurdering vil blive målt ved hjælp af ultralyd og Vicorder (Ellins, 2017). Nethindens mikrovaskulatur vil blive undersøgt for at bestemme endotelfunktionen hos moderen.
5. Endotelfunktionstest: pulsbølgehastighed og flowmedieret afmatning ved hjælp af Vicorder i babyen (Ng et al, 2018).

Arbejdspakke 4 (barn):

Data vil blive indsamlet fra børn tre, tolv og fireogtyve måneder efter fødslen som følger:

1. Antropometriske mål: Barnets vægt, længde, kranieomkreds vil blive målt.
2. Blodtryksmålinger: Tilfældigt blodtryk vil blive målt ved oscillometri ved hjælp af passende engangsmanchetter i armstørrelse. Blodtrykket måles i tre eksemplarer med fem minutters intervaller mindst en time efter barnets måltid, og når barnet sover (Samantha et al, 2015).
3. Endotelfunktionstest: pulsbølgehastighed og flowmedieret afmatning ved hjælp af Vicorder (Ng et al, 2018).
4. Markører for endotelfunktion: Urinprøver vil blive indsamlet til Endocan, asymmetrisk dimethylarginin (ADMA) og nitrogenoxid (NO) assays ved hjælp af ELISA kits i henhold til producentens instruktioner.
5. Markører for oxidativ stress: Lipidperoxidation, total antioxidantkapacitet og 8-hydoxyl-2-deoxyguanin (8-OHdG) vil blive bestemt i urinprøver ved hjælp af ELISA-sæt i henhold til producentens protokoller.
6. Nyrefunktionsindeks: Urin kreatinin og albumin vil blive bestemt. Albumin til kreatinin-forholdet vil også blive bestemt.
7. Epigenetiske markører: Urinkoncentrationer af 5-methyl-2-deoxycytidin og trimethyl Histone H3K9 ved hjælp af elisa kit i henhold til producentens metoder.
8. Endotelfunktionstest: pulsbølgehastighed og flowmedieret afmatning ved hjælp af Vicorder (Ng et al, 2018).