Sammenslutning af spytaminosyreniveau med OSCC identificeret ved væskekromatografi massespektroskopi (OSCC)

1. Introduktion:

   Oral cancer er en unormal vækst af væv, der stammer fra vævet i og omkring munden, som er ukoordineret med det omgivende normale væv. Blandt alle orale cancerformer er oral pladecellecarcinom (OSCC) den mest almindelige (90%) maligne epiteliale neoplasma i mundhulen. Det er et alarmerende folkesundhedsproblem i verden på grund af dets udbredelse, høje forekomst og dødelighed. Ifølge de seneste data fra GLOBOCAN 2020 er 377713 nydiagnosticerede læbe- og mundhulesplanocellulært carcinompatienter diagnosticeret på verdensplan, hvilket er omkring 2 % af al kræftsygdom. Oral pladecellecarcinom (OSCC) er den 6. mest almindelige kræftsygdom på verdensplan. Nylige globale rapporter tyder på, at den største del af de rapporterede tilfælde er fra Asien (65,8 %), men i regionen Sydasien er mundhulekræft den 3. mest almindelige kræftsygdom. En af de kritiske faktorer for den høje dødelighed af OSCC er, at mange af læsionen i starten er asymptomatiske. Som et resultat kommer de på det sene stadium af sygdommen til lægen og har i sidste ende en dårlig prognose. Forskning viste, at når en OSCC er i stadium I, er 5-års overlevelsesraten 80%, men den falder til 20-40%, når sygdommen er i stadium IV. Til diagnosticering af OSCC, efter den indledende kliniske undersøgelse, anses incisionsbiopsi efterfulgt af histopatologisk undersøgelse stadig som en guldstandard, men metoden har mange begrænsninger. Invasiv procedure kræver særlig ekspertise til at tage biopsiprøver fra de repræsentative områder og har brug for en ekspert histopatolog til bekræftelse. Desuden er det meget vanskeligt eller nogle gange umuligt at tage en vævsprøve bagved det synlige område, såsom bunden af ​​tungen, bageste søjle og i tilfælde af begrænset kæbeåbning.

   Menneskespyt er sekretet fra tre store spytkirtler parotis, submandibulære, sublinguale og talrige mindre kirtler, der ligger lige under slimhinden i mundhulen. Den består af vand (99,5%), uorganiske salte og enzymer (0,2%) og proteiner (0,3%). Det er nyttigt til diagnosticering af paradentose, diabetes mellitus, HIV, dengue, fåresyge selv brystkræft, bugspytkirtelkræft, mavekræft, lungekræft og oral cancer. Derudover har det mange fordele at tage spytprøver. Det er lettere at tage spyt og kræver ingen invasiv procedure eller ekspertise. Desuden har den en tilstrækkelig mængde produktion og kan tages af patienten selv, hvilket gør prøvetagningsproceduren billigere. Spytaminosyrer er de vigtige metabolitter til diagnosticering af en kræftpatient. Aminosyre er råproduktet af proteinsyntese. Til dette, når en cancerpatient passerer gennem en hypermetabolisk og hyperkatabolisk tilstand, er der en chance for proteinubalance. Da efterforskerne ved, at aminosyrer er biprodukter af protein, kan det give os et hint om tilstanden af ​​ubalance på grund af enhver kræftsygdom, inklusive oral planocellulært karcinom. Derudover er ændringer i aminosyrekoncentrationen i kropsvæsken hos en cancerpatient signifikant ifølge flere undersøgelser. Massespektrometri er en i øjeblikket brugt platform for proteomics eller metabolomics i biomedicinsk forskning. Ligesom andre spektrometrimetoder såsom gaskromatografi-massespektrometri (GC-MS), kapillær elektroforese-massespektrometri (CE-MS), todimensionel elektroforese massespektrometri (2DE-MS), matrix-assisteret laser desorption ionisering-tid for flyvning massespektrometri (MALDI-TOF) og overfladeforstærket laserdesorption ionisering time-of-flight massespektrometri (SELDI-TOF), væskekromatografi-massespektrometri (LC-MS) er meget brugt i dag. Det muliggør en hurtig og effektiv separation og karakterisering af analytter i en given prøve. Således kan det hjælpe med hurtig diagnosticering af enhver sygdom ved automatiseret analyse af aminosyreprofiler med minimal indsats og udgifter. Mange undersøgelser blev udført ved hjælp af LC-MS-maskine til spytanalyse til diagnosticering af flere sygdomme og fandt signifikante resultater. Så vidt jeg ved, blev der lavet meget få undersøgelser for at finde ud af spytaminosyreniveauet fra patienten, der havde mistanke om oral læsion ved LC-MS. Desuden blev der ikke udført nogen undersøgelse for oral læsionsdiagnose ved analyse af aminosyreprofil ved hjælp af LC-MS i Bangladesh. Formålet med denne undersøgelse er at finde ud af sammenhængen mellem specifikke spytaminosyreniveauer med patienten med OSCC ved væskekromatografi-massespektrometri (LC-MS).

2. Begrundelse:

   OSCC er den 6. mest almindelige kræftsygdom på verdensplan, men i Asien blev den største del rapporteret for nylig, og i Sydøstasien er det den 3. mest almindelige kræftsygdom. Dårlig socioøkonomisk tilstand, mangel på bevidsthed og udbredt brug af tobak, betel-quid-tygning og alkoholindtag er hovedfaktorerne bag dette. Forskning viste, at tidlig diagnosticering af kræft reducerer dødeligheden og dermed kan forbedre behandlingsresultatet. Som et resultat forsøger forskere at finde ud af en nem, hurtig og pålidelig metode til diagnose af OSCC.

   Selvom skalpel (incision) biopsi efterfulgt af histopatologisk undersøgelse stadig er guldstandarden for diagnosticering af den orale læsion, men i tilfælde af bag det synlige område og i begrænset mundåbning er det meget vanskeligt at indsamle det repræsentative præparat. Desuden er proceduren invasiv og kræver særligt udstyr og ekspertise. I dette aspekt, for at undgå risikoen for invasive procedurer og smerter, er kropsvæskeanalyse et interesseområde for forskeren i dag.

   Blandt de andre kropsvæsker er spyt meget let at opsamle, ikke-invasivt og kan have egenskaben til at diagnosticere OSCC, fordi det forbliver i kontakten med læsionen. Den har masser af flow og er billigere end de andre.

   LC-MS maskine er nu meget brugt til metabolomics analyse over hele verden. Den har kapacitet til at analysere en prøve mere effektivt og inden for meget kort tid. Måling af aminosyren og andre komponenter fra spyttet kan nemt gøres ved denne metode. På grund af nogle sygdomme adskiller aminosyrekoncentrationen af ​​kropsvæske sig ifølge flere undersøgelser. Efterforskerne mener, at der for den bangladeshiske befolkning er signifikante sammenhænge mellem adskillige spytaminosyreniveauer og OSCC, som kan identificeres ved LC-MS.

3. Generelt mål:

   For at finde ud af sammenhængen mellem spytaminosyreniveauer med oralt pladecellekarcinom (OSCC) identificeret ved væskekromatografi-massespektrometri.

4. Studiested:

   Oral og Maxillofacial Surgery Department, Bangabandhu Sheikh Mujib Medical University (BSMMU) og Bangladesh Reference Institute for Chemical Measurements (BRICM), Science lab, Dhanmondi, Dhaka.

5. Undersøgelsespopulation:

   Patienter og deres ledsagere, der deltager i udendørs og indendørs klinik på Oral- og Kæbekirurgisk afdeling, BSMMU i henhold til inklusions- og eksklusionskriterier. Samlet stikprøvestørrelse vil være 110 og 55 i hver gruppe. Tilfælde er orale pladecellecarcinompatienter bekræftet ved incisionsbiopsi, og kontrollerne er af relativt samme aldersgruppe og raske individer.

6. Undersøgelseseksempel:

   Patienter, der behandler afdelingen for mund- og kæbekirurgi, histopatologisk diagnosticeret som oralt pladecellekarcinom, og som opfylder udvælgelseskriterierne, vil blive udvalgt som cases. Kontrolpersoner vil blive taget fra raske individer blandt behandlere af patienter næsten fra samme aldersgruppe af tilfælde, der opretholder inklusionskriterierne. Deltagerne er klassificeret i to grupper Gruppe A (tilfælde): Undersøgelsesgruppen består af 55 patienter, som har histopatologisk bekræftet oralt planocellulært karcinom (OSCC) Gruppe B (kontrol): Denne gruppe består af 55 raske personer uden nogen historie med cancer og uden alvorlige paradentoseproblemer og karies.

7. Undersøgelsesvariable:

   • Histopatologisk rapport
   • Niveau af spyt Aminosyrer påvist ved væskekromatografi-massespektrometri (LC-MS)

8. Etiske overvejelser:

   Etisk godkendelse for undersøgelsen vil blive taget fra Institutional Review Board (IRB) i BSMMU før påbegyndelsen af ​​denne undersøgelse. Efter at forskningsprotokollen er godkendt af udvalget, vil tilladelsen til undersøgelsen blive taget fra afdelingen for oral og kæbekirurgi, Bangabandhu Sheikh Mujib Medical University.

   Undersøgelsens mål og mål sammen med dens procedure, risici, stadier og fordele ved denne undersøgelse vil blive forklaret for undersøgelsespersonerne på et let forståeligt lokalt sprog. De vil være sikre på, at risikoen ved denne forskning er minimal. Men denne risiko vil blive behandlet korrekt af speciallæge. Hvis der opstår problemer i forbindelse med biopsiproceduren eller på grund af et hvilket som helst trin i denne forskningsaktivitet, vil de få hele behandlingen gratis. Under og efter forskningsprogrammet vil fortroligheden blive opretholdt strengt. Et ID-nummer vil blive givet til dem, og det vil være nyttigt for forskningsprogrammet. Alle papirer, der tilhører dette ID-nummer, vil blive låst på kontoret. Personlige sager vil ikke blive brugt til analyse, produktion af artikel og udgivelse. Kun den involverede efterforsker vil vide alt dette, og ingen vil få deres oplysninger.

   Deres deltagelse i dette forskningsprogram er absolut frivillig. De kan til enhver tid enten nægte deltagelse eller forlade forskningsprogrammet. Det vil ikke påvirke deres behandlingsproces. Deres juridiske ret vil ikke blive skadet ved at underskrive samtykkeerklæringen. Et skriftligt informeret samtykke vil blive taget fra alle forsøgspersonerne uden at udnytte nogen af ​​deres svagheder. Alle forsøgspersoner vil være sikret deres fortrolighed og frihed til at trække sig selv fra undersøgelsen til enhver tid.

9. Implementering af resultater:

   Resultatet kan være nyttigt til at finde ud af sammenhængen mellem spytaminosyreniveauer og orale pladecellekræftpatienter (OSCC). Det kan derfor være nyttigt til tidlig påvisning af OSCC.

   Dataene vil være nyttige til fremtidig forskning, og det vil blive betragtet som basisinformation for folkesundhedsafdelingen.

10. Mål og fremgangsmåde:

Formålet med undersøgelsen er at finde ud af sammenhængen mellem spytaminosyreniveauer og oralt planocellulært karcinom (OSCC). Undersøgelsen vil blive udført på Oral and Maxillofacial Surgery Department of Bangabandhu Sheikh Mujib Medical University Patient med histologisk bekræftet OSCC vil blive tilmeldt som tilfælde i undersøgelsen ved formålsbestemt bekvem prøvetagningsteknik for at opnå det ønskede antal. Omtrent samme antal af de raske individer vil blive taget som kontrolgruppe til sammenligning. Derefter vil spyttet blive taget fra OSCC-patienten og fra kontrolgruppen. Efter at have taget i den sterile beholder og sikret det rette miljø vil spytprøven blive båret til Designated Reference Institute for Chemical Measurements (DRICM), Science lab, Dhanmondi til analyse med væskekromatografi-massespektrometri (LC-MS) maskine. Med denne maskine vil niveauerne af 6 specifikke aminosyrer (Alanin, Valin, Glycin, Phenylalanin, Isoleucin, Lysin) blive målt. De data, der opnås fra hver enkelt person, vil blive registreret i et foruddesignet dataindsamlingsark separat. Hvis deltagerne accepterer at deltage i dette forskningsprogram, vil den ansvarlige læge informere deltagerne detaljeret.