Akut inflammatorisk og metabolisk effekt af højt fructoseindtag

Dette vil være en tre-arm crossover, randomiseret, dobbelt-blind klinisk undersøgelse udført på Alpha Institute of Gastroenterology på Hospital das Clínicas (Belo Horizonte, MG, Brasilien). Alle eksperimentelle procedurer vil blive udført i overensstemmelse med retningslinjerne i Helsinki-erklæringen. Forskningsprotokollen blev godkendt af Institutional Review Board for Universidade Federal de Minas Gerais (CAAE: 21852314.7.0000.5149). Alle frivillige vil underskrive det informerede samtykke inden studiets start.

Prøve Prøvestørrelsen på 17 forsøgspersoner blev beregnet under hensyntagen til minimumsantallet af deltagere til at påvise en forskel på mindst 11 mg/dL i niveauerne af triglycerider, 1,2 ng/ml i adiponectin og 1,9 pg/ml i TNF (pilotundersøgelse) før og efter indtagelse af et enkelt måltid indeholdende en fruktoseoverbelastning, 95% konfidensinterval og statistisk styrke på 80%.

Studiedesign Hver deltager vil i tre besøg med udvaskningsperiode mellem 7 og 21 dage. Ved hvert besøg vil deltageren gå forbi en anden intervention. Tre indgreb vil finde sted i tilfældig rækkefølge: (i) standardiseret måltid plus saccharoseoverbelastning; (ii) standardiseret måltid plus glukoseoverbelastning; (iii) standardiseret måltid plus fructose overbelastning. I udvaskningsperioden vil forsøgspersonerne blive instrueret i at opretholde deres sædvanlige spiseadfærd og fysisk aktivitet. Deltagerne vil blive instrueret i at undgå at indtage koffein og alkoholholdige drikkevarer og udføre intens fysisk aktivitet inden for 24 timer før hvert besøg.

På dagen for hver intervention vil deltagerne gå i ambulatoriet om morgenen efter en natfaste. Antropometriske data (vægt, højde og taljeomkreds) vil blive indsamlet. Kropssammensætning vil blive evalueret ved hjælp af bioimpedans (Quantum®-apparat, RJM Systems, Michigan) og blodtryk og hjertefrekvens (digital monitor, model HEM705CP®, Omron) vil blive målt efter 30 minutters hvile.

Et kateter med en tre-vejs stophane vil blive indsat i armen på de frivillige. Blodprøver (5 ml) tages efter faste natten over (baseline) og 30, 60, 120 og 240 minutter efter det standardiserede måltid indeholdende saccharose eller glucose eller fructose overbelastning. Deltagerne blev siddende i hele evalueringsperioden.

Intervention Deltagerne vil modtage et standardiseret måltid med brød, skinke og margarine plus en sødet drik (200 ml) med lignende mængder af forskellige kulhydrater (saccharose, glucose eller fruktose) i hver intervention. Måltiderne vil give 25% af energibehovet, beregnet ud fra hvileenergiforbruget målt ved indirekte kalorimetri (KORR®, MetaCheck) ganget med aktivitetsfaktoren plus 10%, der refererer til madens termiske effekt. Måltidet vil bestå af 15 % protein, 30 % fedt og 55 % kulhydrat (30 % komplekse kulhydrater og 25 % saccharose eller glucose eller fructose). De sødede drikke vil have kunstig frugtsmag for at undgå identifikation af indholdet af forskerne og de frivillige.

Mængden af ​​raffinerede tilbudte kulhydrater til deltagerne (18 - 25 g i et enkelt måltid) vil betragtes som en overbelastning, da Verdenssundhedsorganisationen og National Center for Chronic Disease Prevention and Health Promotion anbefaler, at forbruget af tilsat sukker ikke bør overstige 10 % af de samlede daglige kalorier. For eksempel, i en diæt med 2.000 kalorier, bør ikke mere end 200 kalorier komme fra tilsat sukker (ca. 12 teskefulde). Derudover tilbød flere forfattere, der undersøgte kort- og langsigtet (≥ 3 uger) fructoseforbrug i metaboliske og inflammatoriske biomarkører 25 % af det samlede energiforbrug (GET) i form af saccharose, glukose, fruktose eller majssirup med højt fructoseindhold pr. dag. På den anden side er mængden af ​​disse kulhydrater, der tilbydes i denne undersøgelse, en del af mange individers spiserutine (f.eks. indeholder 200 ml almindelig sodavand 21 gram saccharose).

Blodanalyse Serumniveauer af glucose, triglycerider, total kolesterol, alaninaminotransferase (ALT) og aspartataminotransferase (AST) måles ved kolorimetrisk enzymatisk test (Bioclin®, Belo Horizonte, MG, Brasilien). Serumniveauer af adiponectin, leptin, resistin og TNF vil blive målt ved Enzyme Linked ImmuneSorbent Assay (ELISA) efter producentens instruktioner (R&D Systems®). Serumniveauer af IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-17, IFN-y og eotaxin opnås ved hjælp af Cytometric Bead Array (CBA)-metoden (BD Bioscience, San Diego, CA, USA) i flowcytometri. Opsamlet blod fortyndes i Turks opløsning. Antallet af samlede hvide blodlegemer opnås ved brug af et Neubauer-kammer (×40 objektiv).

Statistiske analyser Alle kvantitative variable vil præsenteres som middel ± standardfejl (SEM). Normaliteten af ​​de kvantitative variable testes gennem Shapiro-Wilk-testen. Student's t Simple og Mann-Whitney tests vil tillade sammenligninger mellem de oprindelige karakteristika for dem, der fuldførte undersøgelsen og dem, der ikke gjorde det, og mellem frivillige, der vil deltage i delprøven, og dem, der ikke gjorde det. For at sammenligne de antropometriske og kliniske karakteristika mellem baseline og de efterfølgende vurderinger, vil vi bruge ANOVA-testen til gentagne mål 1-faktor eller Kruskal-Wallis i henhold til normaliteten efterfulgt af Bonferroni post-test. Postprandiale metaboliske og inflammatoriske markører vil sammenlignes med Generalized Equation of Estimates (GEE)-modellen for at evaluere effekten af ​​gruppetildeling (kulhydrattype), tid og justering for tidsgruppeeffekt (interaktion). Variablerne vil behandles med forbindelsesområdets funktion og korrelationsmatricen vil kovariansen af ​​en ustruktureret og robust estimator. Bonferroni post-testen vil identificere tilstedeværelsen af ​​signifikante effekter. Signifikansen sættes til P < 0,05. Dataene analyseres ved hjælp af Statistical Package for the Social Sciences (SPSS) software version 20 og GraphPad Prism version 5.0.