EBV-specifikke CTL'er efter CD45-antistof til patienter med Epstein-Barr-virus (EBV) + nasopharyngealt karcinom (NPC) (CLANC)

Tre forskellige doser af CTL vil blive evalueret: dosisniveau I: 2 x 10e7/m2; dosisniveau II: 5 x 10e7/m2; dosisniveau III: 1 x 10e8/m2

Dag 1 YTH 24/54 800 ug/kg over 8 timer; Dag 2 YTH 24/54 800 ug/kg over 8 timer; Dag 3 Hvile; Dag 4-6 CTL-infusion (forudsat at CD45 Mab-niveau <100 ug/ml).

Generering af EBV-specifik CTL

Efter samtykke til den separate indkøbsprotokol for CTL-præparation vil patienten donere op til 60-70cc perifert blod. 10-20cc af dette vil blive brugt til etablering af en EBV transformeret lymfoblastoid cellelinje (EBV-LCL) ved infektion med virus produceret fra B95-8 master cellelinjen. EBV-LCL'erne vil tage cirka fire til seks uger at etablere. 30-40cc perifert blod vil blive brugt til at generere EBV-specifikke CTL'er. CTL-linjen vil blive forberedt ved co-dyrkning af den bestrålede EBV-LCL med patient PBMC. Efter etablering vil CTL-linjerne blive kontrolleret for identitet, fænotype og mikrobiologisk kultur og kryokonserveret før administration i henhold til SOP'er. Antigenspecificiteten af ​​hver CTL-linje vil blive bestemt i cytotoksicitetsassay og når det er muligt med tetramerreagenser.

CD45 monoklonale antistoffer

Anti-CD45 er en kombination i lige store mængder (vægt for volumen) af to monoklonale antistoffer, der er rettet mod ikke-overlappende epitoper på human CD45. Det er et oprenset, koncentreret og sterilt gammaglobulin, primært monomert IgG, produceret fra supernatanten af ​​de to rotte IgG2b hybridoma kloner, YTH 24 og YTH 54. Hybridomaerne blev fremstillet som fusioner mellem splenocytter fra DA-rotter immuniseret med humane leukocytter og rottemyelomlinjen Y3. Kombinationen af ​​de to MAb'er udøver en synergistisk effekt in vitro på komplement-medieret cytotoksicitet af hvide blodlegemer, og det er blevet påvist at fjerne næsten alle passagerleukocytter fra donor nyrer før transplantation. Anti-CD45 Mabs er blevet fremstillet under cGMP-betingelser på Therapeutic Antibody Center i Oxford og ved Baylor College of Medicine og vil bestå de sikkerhedstest, som FDA kræver.

Celleadministration

Patienterne vil blive præmedicineret med Diphenhydramin 1 mg/kg IV (maks. 50 mg) og Acetaminophen 10 mg/kg po (maks. 650 mg). EBV-specifikke T-celler vil blive givet ved intravenøs injektion over 1-10 minutter gennem enten en perifer eller en central linje. Ambulante patienter kan behandles i klinikken. Overvågning vil blive foretaget i henhold til institutionelle standarder for administration af blodprodukter med den undtagelse, at injektionen vil blive givet af en læge. Antiemetika i passende dosering til hver patient vil blive ordineret efter behov. Patienter vil modtage støttende behandling for akut eller kronisk toksicitet, herunder blodkomponenter eller antibiotika, og anden intervention efter behov.

Antistofadministration

Patienterne vil blive præmedicineret med Diphenhydramin 1 mg/kg IV (maks. 50 mg) og Acetaminophen 10 mg/kg po (maks. 650 mg). 800 ug/kg CD45 Mabs vil blive givet som 2 daglige intravenøse infusioner over 8 timer. Antistofaliquoten, der skal infunderes, ankommer til behandlingsområdet håndbåret af den behandlende læge eller udpeget udpeget. Antistof-aliquoten vil blive fortyndet i minimale mængder normalt saltvand. Den resulterende opløsning er stabil i 24 timer. Antistofopløsningen administreres med en sprøjtepumpe i trinvise doser, 0,2-0,8 mg i den første time og op til 10 mg/time derefter, for en samlet infusionstid på maksimalt 6 timer. En sygeplejerske og en læge skal være let tilgængelige.