EBV-spesifiset CTL:t CD45-vasta-aineen jälkeen potilaille, joilla on Epstein-Barr-virus (EBV) + nenänielun karsinooma (NPC) (CLANC)

Kolme erilaista CTL-annosta arvioidaan: annostaso I: 2 x 10e7/m2; annostaso II: 5 x 10e7/m2; annostaso III: 1 x 10e8/m2

Päivä 1 YTH 24/54 800 ug/kg 8 tunnin aikana; Päivä 2 YTH 24/54 800 ug/kg 8 tunnin aikana; Päivä 3 lepo; Päivä 4-6 CTL-infuusio (edellyttäen, että CD45 Mab-taso <100 ug/ml).

EBV-spesifisten CTL:ien luominen

Saatuaan suostumuksen CTL-valmisteen erillisestä hankintaprotokollasta potilas luovuttaa jopa 60-70 cm3 perifeeristä verta. 10-20 cm3 tästä käytetään EBV-transformoidun lymfoblastoidisolulinjan (EBV-LCL) perustamiseen infektoimalla B95-8-pääsolulinjasta tuotetulla viruksella. EBV-LCL:ien perustaminen kestää noin neljästä kuuteen viikkoa. 30–40 cm3 ääreisverta käytetään EBV-spesifisten CTL:ien tuottamiseen. CTL-linja valmistetaan viljelemällä yhdessä säteilytettyä EBV-LCL:ää potilaan PBMC:n kanssa. Perustamisen jälkeen CTL-linjat tarkastetaan identiteetin, fenotyypin ja mikrobiologisen viljelmän varalta ja kylmäsäilytetään ennen antamista SOP-ohjeiden mukaisesti. Kunkin CTL-linjan antigeenispesifisyys määritetään sytotoksisuusmäärityksessä ja mahdollisuuksien mukaan tetrameerireagensseilla.

CD45 monoklonaaliset vasta-aineet

Anti-CD45 on kahden monoklonaalisen vasta-aineen yhdistelmä yhtä suuria määriä (paino/tilavuus), jotka on suunnattu ei-päällekkäisiin epitooppeihin ihmisen CD45:ssä. Se on puhdistettu, konsentroitu ja steriili gammaglobuliini, ensisijaisesti monomeerinen IgG, joka on tuotettu kahden rotan IgG2b-hybridoomakloonin, YTH 24:n ja YTH 54:n, supernatantista. Hybridoomat tuotettiin ihmisen leukosyyteillä immunisoitujen DA-rottien splenosyyttien ja rotan myeloomalinjan Y3 fuusioiden välillä. Kahden MAb:n yhdistelmällä on synergistinen vaikutus in vitro valkosolujen komplementtivälitteiseen sytotoksisuuteen, ja sen on osoitettu puhdistavan lähes kaikki matkustajan leukosyytit luovuttajan munuaisista ennen siirtoa. Anti-CD45 Mabs on valmistettu cGMP-olosuhteissa Therapeutic Antibody Centerissä Oxfordissa ja Baylor College of Medicinessa, ja ne läpäisevät FDA:n vaatimat turvallisuustestit.

Solujen anto

Potilaille annetaan esilääkitys difenhydramiinilla 1 mg/kg IV (enintään 50 mg) ja asetaminofeenilla 10 mg/kg po (enintään 650 mg). EBV-spesifisiä T-soluja annetaan suonensisäisellä injektiolla 1-10 minuutin aikana joko perifeeristä tai keskusjohtoa pitkin. Avopotilaita voidaan hoitaa klinikalla. Seuranta toteutetaan laitosten verivalmisteiden antamista koskevien standardien mukaisesti, paitsi että ruiskeen antaa lääkäri. Kullekin potilaalle määrätään sopiva annos antiemeettejä tarpeen mukaan. Potilaat saavat tukihoitoa akuutin tai kroonisen toksisuuden varalta, mukaan lukien veren komponentit tai antibiootit, ja muita tarvittaessa toimenpiteitä.

Vasta-aineiden antaminen

Potilaille annetaan esilääkitys difenhydramiinilla 1 mg/kg IV (enintään 50 mg) ja asetaminofeenilla 10 mg/kg po (enintään 650 mg). 800 ug/kg CD45 Mabs annetaan 2 päivittäisenä suonensisäisenä infuusiona 8 tunnin aikana. Infusoitava vasta-ainenäyte saapuu hoitoalueelle hoitavan lääkärin tai nimetyn henkilön kantamana. Vasta-ainenäyte laimennetaan minimaalisiin määriin normaalia suolaliuosta. Saatu liuos on stabiili 24 tuntia. Vasta-aineliuos annetaan ruiskupumpulla 0,2-0,8 asteittain. mg ensimmäisen tunnin aikana ja enintään 10 mg/tunti sen jälkeen, jolloin kokonaisinfuusioaika on enintään 6 tuntia. Rekisteröity sairaanhoitaja ja lääkäri on oltava helposti saatavilla.