CTLs específicos de EBV após anticorpo CD45 para pacientes com vírus Epstein-Barr (EBV) + carcinoma nasofaríngeo (NPC) (CLANC)

Serão avaliadas três diferentes doses de CTL: nível de dose I: 2 x 10e7/m2; nível de dose II: 5 x 10e7/m2; nível de dose III: 1 x 10e8/m2

Dia 1 YTH 24/54 800ug/kg durante 8 horas; Dia 2 YTH 24/54 800ug/kg durante 8 horas; Dia 3 Descanso; Dia 4-6 Infusão de CTL (desde que o nível de CD45 Mab <100 ug/ml).

Geração de CTL específico de EBV

Após o consentimento no protocolo de aquisição separado para preparação de CTL, o paciente doará até 60-70 cc de sangue periférico. 10-20cc deste serão utilizados para o estabelecimento de uma linha celular linfoblastóide transformada por EBV (EBV-LCL) por infecção com vírus produzido a partir da linhagem celular mestre B95-8. Os EBV-LCLs levarão aproximadamente de quatro a seis semanas para serem estabelecidos. 30-40cc de sangue periférico serão usados ​​para gerar CTLs específicos de EBV. A linhagem CTL será preparada por co-cultivo do EBV-LCL irradiado com o paciente PBMC. Após o estabelecimento, as linhagens CTL serão verificadas quanto à identidade, fenótipo e cultura microbiológica e criopreservadas antes da administração de acordo com os POPs. A especificidade antigênica de cada linhagem CTL será determinada em ensaio de citotoxicidade e quando possível com reagentes tetrâmeros.

Anticorpos monoclonais CD45

O anti-CD45 é uma combinação em quantidades iguais (peso por volume) de dois anticorpos monoclonais direcionados a epítopos não sobrepostos no CD45 humano. É uma gamaglobulina purificada, concentrada e estéril, principalmente IgG monomérica, produzida a partir do sobrenadante dos dois clones de hibridoma IgG2b de rato, YTH 24 e YTH 54. Os hibridomas foram produzidos como fusões entre esplenócitos de ratos DA imunizados com leucócitos humanos e a linhagem de mieloma de rato Y3. A combinação dos dois MAbs exerce um efeito sinérgico in vitro na citotoxicidade dos glóbulos brancos mediada pelo complemento e demonstrou eliminar quase todos os leucócitos passageiros dos rins do doador antes do transplante. Os Mabs anti-CD45 foram produzidos sob condições cGMP no Therapeutic Antibody Center em Oxford e no Baylor College of Medicine e passarão nos testes de segurança exigidos pelo FDA.

Administração celular

Os pacientes serão pré-medicados com Difenidramina 1mg/kg IV (max 50 mg) e Acetaminofeno 10mg/kg VO (max 650 mg). As células T específicas do EBV serão administradas por injeção intravenosa durante 1-10 minutos através de uma linha periférica ou central. Pacientes ambulatoriais podem ser tratados na clínica. O monitoramento será realizado de acordo com os padrões institucionais para administração de hemoderivados, exceto que a injeção será administrada por um médico. Antieméticos em dosagem apropriada para cada paciente serão prescritos conforme necessário. Os pacientes receberão cuidados de suporte para toxicidade aguda ou crônica, incluindo hemocomponentes ou antibióticos, e outras intervenções conforme apropriado.

Administração de anticorpos

Os pacientes serão pré-medicados com Difenidramina 1mg/kg IV (max 50 mg) e Acetaminofeno 10mg/kg VO (max 650 mg). 800ug/kg de CD45 Mabs serão administrados em 2 infusões intravenosas diárias durante 8 horas. A alíquota de anticorpo a ser infundida chegará à área de tratamento em mãos do médico assistente ou designado por ele. A alíquota de anticorpo será diluída em quantidades mínimas de solução salina normal. A solução resultante é estável por 24 horas. A solução de anticorpo é administrada por uma bomba de seringa em doses incrementais, 0,2-0,8 mg na primeira hora e até 10 mg/h depois disso, por um tempo total de infusão de no máximo 6 horas. Uma enfermeira registrada e um médico devem estar prontamente disponíveis.