CTL específicos de EBV después del anticuerpo CD45 en pacientes con el virus de Epstein-Barr (EBV) + carcinoma nasofaríngeo (NPC) (CLANC)

Se evaluarán tres dosis diferentes de CTL: nivel de dosis I: 2 x 10e7/m2; nivel de dosis II: 5 x 10e7/m2; nivel de dosis III: 1 x 10e8/m2

Día 1 YTH 24/54 800 ug/kg durante 8 horas; Día 2 YTH 24/54 800 ug/kg durante 8 h; Día 3 Descanso; Día 4-6 Infusión de CTL (siempre que el nivel de CD45 Mab sea <100 ug/ml).

Generación de CTL específicos de EBV

Después del consentimiento en el protocolo de obtención por separado para la preparación de CTL, el paciente donará hasta 60-70 cc de sangre periférica. 10-20 cc de esto se usarán para el establecimiento de una línea celular linfoblastoide transformada por EBV (EBV-LCL) mediante infección con virus producido a partir de la línea celular maestra B95-8. Los EBV-LCL tardarán aproximadamente de cuatro a seis semanas en establecerse. Se utilizarán 30-40 cc de sangre periférica para generar CTL específicos de EBV. La línea CTL se preparará mediante el cocultivo del EBV-LCL irradiado con PBMC del paciente. Después del establecimiento, se comprobará la identidad, el fenotipo y el cultivo microbiológico de las líneas CTL y se crioconservarán antes de la administración de acuerdo con los SOP. La especificidad de antígeno de cada línea de CTL se determinará en un ensayo de citotoxicidad y, cuando sea posible, con reactivos tetrámeros.

Anticuerpos monoclonales CD45

Anti-CD45 es una combinación en cantidades iguales (peso por volumen) de dos anticuerpos monoclonales que se dirigen a epítopos no superpuestos en CD45 humano. Es una gammaglobulina purificada, concentrada y estéril, principalmente IgG monomérica, producida a partir del sobrenadante de los dos clones de hibridoma IgG2b de rata, YTH 24 e YTH 54. Los hibridomas se produjeron como fusiones entre esplenocitos de ratas DA inmunizadas con leucocitos humanos y la línea de mieloma de rata Y3. La combinación de los dos MAb ejerce un efecto sinérgico in vitro sobre la citotoxicidad de los glóbulos blancos mediada por el complemento y se ha demostrado que elimina casi todos los leucocitos pasajeros de los riñones de donantes antes del trasplante. Los Mab anti-CD45 se han fabricado en condiciones cGMP en el Therapeutic Antibody Center de Oxford y en el Baylor College of Medicine y pasarán las pruebas de seguridad exigidas por la FDA.

administración celular

Los pacientes serán premedicados con difenhidramina 1 mg/kg IV (máx. 50 mg) y acetaminofeno 10 mg/kg po (máx. 650 mg). Las células T específicas de EBV se administrarán mediante inyección intravenosa durante 1 a 10 minutos a través de una vía periférica o central. Los pacientes ambulatorios pueden ser tratados en la clínica. El seguimiento se realizará de acuerdo con los estándares institucionales para la administración de hemoderivados, con la excepción de que la inyección la administrará un médico. Se prescribirán antieméticos en dosis adecuadas para cada paciente según sea necesario. Los pacientes recibirán atención de apoyo para la toxicidad aguda o crónica, incluidos componentes sanguíneos o antibióticos, y otras intervenciones según corresponda.

administración de anticuerpos

Los pacientes serán premedicados con difenhidramina 1 mg/kg IV (máx. 50 mg) y acetaminofeno 10 mg/kg po (máx. 650 mg). Se administrarán 800 ug/kg de CD45 Mab en 2 infusiones intravenosas diarias durante 8 horas. La alícuota de anticuerpo que se va a infundir llegará al área de tratamiento en mano por el médico tratante o la persona designada. La alícuota del anticuerpo se diluirá en cantidades mínimas de solución salina normal. La solución resultante es estable durante 24 horas. La solución de anticuerpos se administra mediante una bomba de jeringa en dosis incrementales, 0,2-0,8 mg en la primera hora y hasta 10 mg/h a partir de entonces, durante un tiempo total de infusión de un máximo de 6 horas. Una enfermera registrada y un médico deben estar fácilmente disponibles.