Udviklingen af ​​humane immunologiske assays, der er specifikke for folatreceptorantigen

Forekomst af ovariecancer

Ovariecancer er den første dødelighed af gynækologiske maligniteter med en samlet 5-års overlevelsesrate på kun 20-30%. Det blev en mere og mere vigtig sygdom i de senere år, og forekomsten af ​​kræft i æggestokkene steg også i de senere år i Taiwan. Manglen på symptomer, vanskeligheder med tidlig diagnosticering, utilstrækkelige præcise tumormarkører og mangel på information om ovarietumorbiologi bidrager til den dårlige prognose hos ovariecancerpatienter. De prognostiske parametre for ovariecarcinomer er tumorstadium, histologisk undertype, malignitetsgrad og resterende tumor efter kirurgisk behandling. Disse faktorer giver imidlertid et ufuldstændigt billede af tumorbiologien af ​​ovariecancer og er ofte indbyrdes forbundne. Således ville identifikation af nye biologiske faktorer, der forudsiger individuelt sygdomsforløb og prognose, være yderst nyttig. Ud fra de ovennævnte data er kræft i æggestokkene faktisk en sygdom, der bør respekteres, men der var meget lidt forskningsarbejde med fokus på det i Taiwan.

Behandling af kræft i æggestokkene

Epitelial ovariecancer (EOC) og ekstraovarie Müllerian carcinom er lignende patologiske enheder, der deler en præference for peritonealhule involvering. Disse tumorers spredningsmønster giver en udfordring og unikke muligheder for immunterapi. Patienter med EOC, som har stadium I sygdom (lokaliseret til æggestokke) efter optimal kirurgisk stadieinddeling, har en 5-års overlevelsesrate på 90 %, uden nogen signifikant ændring efter 10 år. I modsætning hertil har patienter med spredning ud over æggestokkene median overlevelsesrater, der falder til < 10 % for patienter med omfangsrig resterende sygdom efter operation og behandling med platinbaseret kombinationskemoterapi. Et randomiseret forsøg med første-line kemoterapi hos patienter med EOC med restmasser større end 1 cm efter indledende operation, viste en median overlevelsesperiode på 38 måneder for cisplatin/paclitaxel, signifikant mere end 24 måneder for cisplatin/cytoxan behandlingsarmen. I en interimanalyse af et ækvivalensforsøg var overlevelsen efter carboplatin/paclitaxel ikke værre end cisplatin/paclitaxel. Selvom tidlig diagnose er et vigtigt mål for den igangværende kliniske forskningsindsats, er det uklart, om avanceret EOC starter som en multicentrisk proces, der involverer æggestokkene og den peritoneale overflade. Det er nu fastslået, at arvelige faktorer bidrager til udviklingen af ​​EOC. Kimlinje BRCA1 og BRCA2 mutationer tegner sig for ca. 10% af alle EOC. Hos en kvinde med en BRCA 1 eller 2 mutation varierer livstidsrisikoen for kræft i æggestokkene fra 16 %-44 %. Med den kommercielle tilgængelighed af genetisk testning for BRCA1 og BRCA2 bliver flere kvinder identificeret som værende i høj risiko for kræft i æggestokkene. Der er ingen klare retningslinjer for kræftforebyggelse for disse personer. Selvom profylaktisk ooforektomi er en rimelig mulighed for kvinder, der har afsluttet den fødedygtige føde, er disse kvinder stadig i risiko for at udvikle peritoneal cancer. Det er klart, at der er behov for andre muligheder for forebyggelse.

Immunterapi til kræft i æggestokkene

Ved udvikling af effektive immunbaserede strategier for EOC bør der skelnes mellem forebyggende og terapeutiske tilgange. Det forventes, at immunforebyggelse (immunoprofylakse) vil blive udviklet til kvinder, der har en øget risiko for udvikling af EOC. I modsætning hertil vil immunterapi blive brugt som en adjuvans til kirurgi eller i kombination med kemoterapi eller andre biologiske lægemidler som kemoimmunoterapi eller biokemoimmunterapi. Patienter med uopdagelig sygdom efter at være blevet genoptaget efter kemoterapi kunne overvejes til immunterapi med den formodning, at flertallet faktisk har mikrometastaser. Udvikling af effektive immunbaserede koncepter til forebyggelse eller behandling af EOC vil kræve en forståelse af tumor-immunologiske principper, virkningsmekanismer for den ekspanderende række af immunmodulerende molekyler, identifikation og karakterisering af tumorantigener og bestemmelse af de mikromiljøfaktorer, der kan indflydelse på de forskellige immuneffektormekanismer. Den kliniske forsker er blevet forsynet med mange immunstyrede midler, men fremskridtene med deres integration i standardterapier har været noget langsom.

Folat receptor

Folatreceptoren (FR), et 38 kDa membranglycoprotein, er repræsenteret af en homolog familie af glycoproteiner, hvoraf to (FR-a og FR-b) er bundet til celleoverfladen med et glycosyl-phosphatidylinositol-anker; den tredje isoform (FR-) og dens trunkerede version (FR-9) udskilles konstitutivt på grund af mangel på et effektivt signal til modifikation af glycosyl-phosphatidylinositol. FR-a udtrykkes i nogle normale epitelceller og er forhøjet i visse karcinomer, hvorimod FR-b er en myeloid differentieringsmarkør og er forhøjet i nogle nonepitheliale maligniteter. FR-9 udtrykkes i hæmatopoietisk væv. På nuværende tidspunkt er FR et stort fokus som et tumormål for flere eksperimentelle tilgange i cancerterapi. En ny tilgang bruger bifunktionelle antistoffer til at målrette T-celler mod FR på overfladen af ​​ovariecarcinomceller. Selektiv vækstinhibering af tumorcellerne blev opnået ved denne fremgangsmåde. De kimære antistoffer, som binder til både FR og enten CD3 eller CD28, producerede imponerende resultater i en xenogen model og hos patienter med fremskreden ovariecancer. Tilsvarende var et kimært molekyle bestående af en enkeltkædet Fv af anti-FR-antistof og interleukin 2 effektivt til at hæmme tumorvækst in vivo. Alternativt kunne folinsyrekonjugater af enkeltkædet anti-T-cellereceptorantistof mobilisere T-cellerespons mod FR-rige tumorer. Ved at drage fordel af den ikke-destruktive natur af FR-medieret internalisering af folatkoblede makromolekyler blev cytotoksiner såsom momordin, Pseudomonas exotoxin og maytansinoider vist at producere selektivt drab af FR-rige celler. Desuden var toksiciteten af ​​sådanne konjugater afhængig af receptordensitet på celleoverfladen. Folat-konjugerede radiofarmaka synes også at tilbyde et middel til tumorbilleddannelse/strålebehandling. Folatovertrukne liposomer blev vist at selektivt målrette FR-rige tumorceller, og selektiv drab af de maligne celler blev opnået ved at indkapsle doxorubicin i liposomerne. Ved en lignende strategi var det muligt at levere antisense-oligonukleotider mod den epidermale vækstfaktorreceptor til FR-rige tumorceller. Endvidere er selektiv målretning af en adenoviral vektor til FR-rige tumorceller blevet opnået i nærvær af et antistof til at fjerne den endogene virale tropisme. Endelig har adskillige undersøgelser vist, at FR, når det udtrykkes i høje niveauer, kunne tilbyde den foretrukne optagelsesvej for nye klasser af antifolatlægemidler, der er målrettet mod glycinamidribonukleotidformyltransferase og thymidylatsyntase. En opløselig form af FR er blevet påvist i serum og ascites hos patienter med ovariecancer. FR er blevet rapporteret at være selektivt overudtrykt i 90 % af ikke-mucinøse ovariecarcinomer og i nogle andre maligne væv. Receptoren er kun blevet påvist i få andre normale celletyper, men ikke i normalt ovarieoverfladeepitel. Det ser ud til, at FR kunne være et potentielt målantigen til immunterapi af ovariecancer.

Epitoper af folatreceptor for human haplotype

Forekomsten af ​​HLA-A2-haplotype er over 50% i de vestlige lande. Forekomsten af ​​HLA-A2-haplotype er omkring 30% i Taiwan. De specifikke epitoper af folatreceptoren i HLA-A2-haplotypen er blevet identificeret. De er henholdsvis E39 (FR, 191-199) EIWTHSTKV og E75 (FR, 245-253) LLSLALMLL. Det ser ud til, at folatreceptorer kunne være et målantigen til immunterapi af ovariecancer.

Vores forskerhold har fokuseret på udvikling af en kræftvaccine og immunterapi i flere år. Vores laboratoriefaciliteter er også blevet oprettet til at evaluere de humane immunologiske assays for humant papillomavirus type 16 E7-antigen med tilskuddet støttet fra National Taiwan University Hospital. Det er meget vigtigt at opsætte forskellige folatreceptorspecifikke immunologiske assays af mennesker for at evaluere effekten af ​​cancervaccine eller immunterapi mod ovariecancer i fremtidige kliniske forsøg. Så vi vil gerne give dette forslag til at adressere udviklingen af ​​folatreceptorspecifikke immunologiske assays hos mennesker. Der er flere formål med dette projekt:

1. at udvikle og bruge assays til at måle CTL'er til folatreceptorer og,
2. at evaluere de folatreceptorspecifikke immunologiske responser mellem normale kontroller og ovariecancerpatienter.