Die Entwicklung humaner immunologischer Assays, die für Folatrezeptor-Antigen spezifisch sind

Inzidenz von Eierstockkrebs

Eierstockkrebs ist die erste Sterblichkeitsrate bei gynäkologischen Malignomen mit einer 5-Jahres-Gesamtüberlebensrate von nur 20-30 %. Es wurde in den letzten Jahren zu einer immer wichtigeren Krankheit und die Inzidenz von Eierstockkrebs nahm in den letzten Jahren auch in Taiwan zu. Das Fehlen von Symptomen, Schwierigkeiten bei der Früherkennung, unzureichend genaue Tumormarker und fehlende Informationen über die Biologie von Ovarialtumoren tragen zur schlechten Prognose von Ovarialkarzinompatientinnen bei. Die prognostischen Parameter für Ovarialkarzinome sind Tumorstadium, histologischer Subtyp, Malignitätsgrad und Tumorrest nach operativer Behandlung. Diese Faktoren geben jedoch ein unvollständiges Bild der Tumorbiologie des Ovarialkarzinoms wieder und sind häufig miteinander verknüpft. Daher wäre die Identifizierung neuer biologischer Faktoren, die den individuellen Krankheitsverlauf und die Prognose vorhersagen, äußerst nützlich. Aus den oben genannten Daten geht hervor, dass Eierstockkrebs in der Tat eine Krankheit ist, die respektiert werden sollte, jedoch gab es in Taiwan nur sehr wenige Forschungsarbeiten, die sich darauf konzentrierten.

Behandlung von Eierstockkrebs

Epitheliales Ovarialkarzinom (EOC) und extraovarielles Müller-Karzinom sind ähnliche pathologische Entitäten, die eine Präferenz für eine Beteiligung der Peritonealhöhle teilen. Das Ausbreitungsmuster dieser Tumore bietet eine Herausforderung und einzigartige Möglichkeiten für die Immuntherapie. Patienten mit EOC im Stadium I (lokalisiert in den Eierstöcken) haben nach optimalem chirurgischem Staging eine 5-Jahres-Überlebensrate von 90 %, ohne signifikante Veränderung nach 10 Jahren. Im Gegensatz dazu haben Patientinnen mit Ausbreitung über die Eierstöcke hinaus mediane Überlebensraten, die bei Patientinnen mit massiver Resterkrankung nach Operation und Behandlung mit platinbasierter Kombinationschemotherapie auf < 10 % sinken. Eine randomisierte Studie zur Erstlinien-Chemotherapie bei Patienten mit EOC mit Restmassen von mehr als 1 cm nach der ersten Operation zeigte eine mediane Überlebenszeit von 38 Monaten für Cisplatin/Paclitaxel, signifikant länger als 24 Monate für den Cisplatin/Cytoxan-Behandlungsarm. In einer Zwischenanalyse einer Äquivalenzstudie war das Überleben nach Carboplatin/Paclitaxel nicht schlechter als nach Cisplatin/Paclitaxel. Obwohl die frühe Diagnose ein wichtiges Ziel laufender klinischer Forschungsbemühungen ist, ist unklar, ob die fortgeschrittene EOC als multizentrischer Prozess beginnt, an dem die Eierstöcke und die Peritonealoberfläche beteiligt sind. Es ist nun erwiesen, dass erbliche Faktoren zur Entwicklung von EOC beitragen. Keimbahn-BRCA1- und BRCA2-Mutationen machen etwa 10 % aller EOC aus. Bei einer Frau mit einer BRCA 1- oder 2-Mutation liegt das Lebenszeitrisiko für Eierstockkrebs zwischen 16 % und 44 %. Mit der kommerziellen Verfügbarkeit von Gentests für BRCA1 und BRCA2 wird festgestellt, dass mehr Frauen ein hohes Risiko für Eierstockkrebs haben. Es gibt keine klaren Richtlinien zur Krebsprävention für diese Personen. Obwohl die prophylaktische Ovarektomie eine vernünftige Option für Frauen ist, die ihre Schwangerschaft abgeschlossen haben, besteht für diese Frauen immer noch das Risiko, an Peritonealkrebs zu erkranken. Offensichtlich sind andere Optionen zur Prävention erforderlich.

Immuntherapie bei Eierstockkrebs

Bei der Entwicklung wirksamer immunbasierter Strategien für EOC sollte zwischen präventiven und therapeutischen Ansätzen unterschieden werden. Es wird erwartet, dass eine Immunprävention (Immunprophylaxe) für Frauen entwickelt wird, die ein erhöhtes Risiko für die Entwicklung von EOC haben. Im Gegensatz dazu würde die Immuntherapie als Adjuvans zu einer Operation oder in Kombination mit einer Chemotherapie oder anderen Biologika als Chemoimmuntherapie oder Biochemoimmuntherapie verwendet werden. Patienten mit nicht nachweisbarer Erkrankung nach einem Restaging nach einer Chemotherapie könnten für eine Immuntherapie in Betracht gezogen werden, wenn davon ausgegangen wird, dass die Mehrheit tatsächlich Mikrometastasen aufweist. Die Entwicklung wirksamer immunbasierter Konzepte zur Prävention oder Behandlung von EOC erfordert ein Verständnis der Prinzipien der Tumorimmunologie, der Wirkungsmechanismen der wachsenden Zahl immunmodulierender Moleküle, der Identifizierung und Charakterisierung von Tumorantigenen und der Bestimmung der Mikroumgebungsfaktoren, die dies könnten Einfluss auf die verschiedenen Immun-Effektor-Mechanismen. Dem klinischen Forscher wurden viele immungerichtete Wirkstoffe zur Verfügung gestellt, aber die Fortschritte bei ihrer Integration in Standardtherapien waren etwas langsam.

Folatrezeptor

Der Folatrezeptor (FR), ein 38-kDa-Membranglycoprotein, wird durch eine homologe Familie von Glycoproteinen repräsentiert, von denen zwei (FR-a und FR-b) durch einen Glycosyl-Phosphatidylinositol-Anker an der Zelloberfläche befestigt sind; die dritte Isoform (FR-) und ihre verkürzte Version (FR-9) werden aufgrund des Fehlens eines effizienten Signals für die Glycosyl-Phosphatidylinositol-Modifikation konstitutiv sezerniert. FR-a wird in einigen normalen Epithelzellen exprimiert und ist bei bestimmten Karzinomen erhöht, während FR-b ein myeloischer Differenzierungsmarker ist und bei einigen nicht-epithelialen Malignomen erhöht ist. FR-9 wird in hämatopoetischen Geweben exprimiert. Gegenwärtig steht FR als Tumorziel für mehrere experimentelle Ansätze in der Krebstherapie im Mittelpunkt. Ein neuer Ansatz verwendet bifunktionale Antikörper, um T-Zellen zum FR auf der Oberfläche von Ovarialkarzinomzellen zu lenken. Durch diesen Ansatz wurde eine selektive Wachstumshemmung der Tumorzellen erreicht. Die chimären Antikörper, die sowohl an FR als auch an CD3 oder CD28 binden, lieferten beeindruckende Ergebnisse in einem xenogenen Modell und bei Patientinnen mit fortgeschrittenem Eierstockkrebs. In ähnlicher Weise war ein chimäres Molekül, das aus einem einkettigen Fv von Anti-FR-Antikörper und Interleukin 2 bestand, bei der Hemmung des Tumorwachstums in vivo wirksam. Alternativ könnten Folsäure-Konjugate von einkettigen Anti-T-Zell-Rezeptor-Antikörpern eine T-Zell-Antwort gegen FR-reiche Tumore mobilisieren. Es wurde gezeigt, dass Zytotoxine wie Momordin, Pseudomonas-Exotoxin und Maytansinoide, die sich die zerstörungsfreie Natur der FR-vermittelten Internalisierung von Folat-gekoppelten Makromolekülen zunutze machen, eine selektive Abtötung von FR-reichen Zellen bewirken. Darüber hinaus war die Toxizität solcher Konjugate von der Rezeptordichte auf der Zelloberfläche abhängig. Folat-konjugierte Radiopharmaka scheinen auch ein Mittel zur Tumorbildgebung/Strahlentherapie zu bieten. Es wurde gezeigt, dass Folat-beschichtete Liposomen selektiv auf FR-reiche Tumorzellen abzielen, und eine selektive Abtötung der bösartigen Zellen wurde durch Einkapseln von Doxorubicin in die Liposomen erreicht. Durch eine ähnliche Strategie war es möglich, Antisense-Oligonukleotide gegen den epidermalen Wachstumsfaktorrezeptor an FR-reiche Tumorzellen zu liefern. Darüber hinaus wurde ein selektives Targeting eines adenoviralen Vektors auf FR-reiche Tumorzellen in Gegenwart eines Antikörpers erreicht, um den endogenen viralen Tropismus abzubauen. Schließlich haben mehrere Studien gezeigt, dass FR, wenn er in hohen Konzentrationen exprimiert wird, den bevorzugten Aufnahmeweg für neue Klassen von Antifolat-Medikamenten bieten könnte, die auf Glycinamid-Ribonukleotid-Formyltransferase und Thymidylat-Synthase abzielen. Eine lösliche Form von FR wurde im Serum und im Aszites von Patientinnen mit Eierstockkrebs nachgewiesen. Es wurde berichtet, dass der FR in 90 % der nicht muzinösen Ovarialkarzinome und in einigen anderen malignen Geweben selektiv überexprimiert wird. Der Rezeptor wurde nur in einigen anderen normalen Zelltypen nachgewiesen, jedoch nicht in normalem Oberflächenepithel der Eierstöcke. Es scheint, dass FR ein potenzielles Zielantigen für die Immuntherapie von Eierstockkrebs sein könnte.

Epitope des Folatrezeptors für den menschlichen Haplotyp

Die Inzidenz des HLA-A2-Haplotyps liegt in den westlichen Ländern bei über 50 %. Die Inzidenz des HLA-A2-Haplotyps liegt in Taiwan bei etwa 30 %. Die spezifischen Epitope des Folatrezeptors im HLA-A2-Haplotyp wurden identifiziert. Sie sind E39 (FR, 191-199) EIWTHSTKV bzw. E75 (FR, 245-253) LLSLALMLL. Es scheint, dass Folatrezeptoren ein Zielantigen für die Immuntherapie von Eierstockkrebs sein könnten.

Unser Forschungsteam konzentriert sich seit mehreren Jahren auf die Entwicklung eines Krebsimpfstoffs und einer Immuntherapie. Unsere Laboreinrichtungen wurden auch eingerichtet, um die humanen immunologischen Assays für das humane Papillomavirus Typ 16 E7-Antigen durch das vom National Taiwan University Hospital unterstützte Stipendium zu evaluieren. Es ist sehr wichtig, verschiedene Folatrezeptor-spezifische immunologische Assays an Menschen einzurichten, um die Wirkung von Krebsimpfstoffen oder Immuntherapien für Eierstockkrebs in zukünftigen klinischen Studien zu bewerten. Daher möchten wir diesen Vorschlag unterbreiten, um die Entwicklung von Folatrezeptor-spezifischen immunologischen Assays beim Menschen anzusprechen. In diesem Projekt gibt es mehrere Ziele:

1. Entwicklung und Nutzung von Assays zur Messung von CTLs für Folatrezeptoren und
2. um die Folatrezeptor-spezifischen immunologischen Antworten zwischen normalen Kontrollen und Patienten mit Eierstockkrebs zu bewerten.