Utviklingen av humane immunologiske analyser spesifikke for folatreseptorantigen

Forekomst av eggstokkreft

Eggstokkreft er den første dødeligheten av gynekologiske maligniteter med en samlet 5-års overlevelsesrate på bare 20-30 %. Det ble en viktigere og viktigere sykdom de siste årene og forekomsten av eggstokkreft økte også de siste årene i Taiwan. Mangel på symptomer, vanskeligheter med tidlig diagnose, utilstrekkelige nøyaktige tumormarkører og mangel på informasjon om eggstokksvulstbiologi bidrar til dårlig prognose hos eggstokkreftpasienter. De prognostiske parametrene for ovariekarsinomer er tumorstadium, histologisk subtype, malignitetsgrad og gjenværende tumor etter kirurgisk behandling. Disse faktorene gir imidlertid et ufullstendig bilde av tumorbiologien til eggstokkreft og er ofte relatert til hverandre. Dermed vil identifisering av nye biologiske faktorer som forutsier individuell sykdomsforløp og prognose være ekstremt nyttig. Fra de ovennevnte dataene er eggstokkreft virkelig en sykdom som bør respekteres, men det var svært lite forskningsarbeid med fokus på den i Taiwan.

Behandling av eggstokkreft

Epitelial ovariecancer (EOC) og ekstraovarian Müllerian karsinom er lignende patologiske enheter som deler en preferanse for involvering av bukhulen. Spredningsmønsteret til disse svulstene gir en utfordring og unike muligheter for immunterapi. Pasienter med EOC som har stadium I sykdom (lokalisert til eggstokkene) etter optimal kirurgisk stadie, har en 5-års overlevelsesrate på 90 %, uten signifikant endring etter 10 år. Derimot har pasienter med spredning utover eggstokkene median overlevelsesrater som synker til < 10 % for pasienter med voluminøs gjenværende sykdom etter operasjon og behandling med platinabasert kombinasjonskjemoterapi. En randomisert studie med førstelinjekjemoterapi hos pasienter med EOC med restmasser større enn 1 cm etter innledende operasjon, viste en median overlevelsesperiode på 38 måneder for cisplatin/paklitaksel, signifikant større enn 24 måneder for cisplatin/cytoxan-behandlingsarmen. I en interimanalyse av en ekvivalensstudie var overlevelsen etter karboplatin/paklitaksel ikke dårligere enn cisplatin/paklitaksel. Selv om tidlig diagnose er et viktig mål for pågående klinisk forskningsinnsats, er det uklart om avansert EOC starter som en multisentrisk prosess som involverer eggstokkene og peritonealoverflaten. Det er nå slått fast at arvelige faktorer bidrar til utviklingen av EOC. Kimlinje BRCA1 og BRCA2 mutasjoner utgjør omtrent 10 % av alle EOC. Hos en kvinne med en BRCA 1- eller 2-mutasjon varierer livstidsrisikoen for eggstokkreft fra 16 %-44 %. Med den kommersielle tilgjengeligheten av genetisk testing for BRCA1 og BRCA2, blir flere kvinner identifisert som å ha høy risiko for eggstokkreft. Det er ingen klare retningslinjer for kreftforebygging for disse personene. Selv om profylaktisk ooforektomi er et rimelig alternativ for kvinner som har fullført fødsel, er disse kvinnene fortsatt i faresonen for å utvikle peritoneal kreft. Det er klart at andre alternativer for forebygging er nødvendige.

Immunterapi for eggstokkreft

Ved utvikling av effektive immunbaserte strategier for EOC, bør det være et skille mellom forebyggende og terapeutiske tilnærminger. Det er forventet at immunforebygging (immunoprofylakse) vil bli utviklet for kvinner som har økt risiko for utvikling av EOC. I motsetning til dette vil immunterapi bli brukt som en adjuvans til kirurgi eller i kombinasjon med kjemoterapi eller andre biologiske midler som kjemoimmunoterapi eller biokjemoimmunterapi. Pasienter med uoppdagbar sykdom etter å ha blitt restasjonert etter kjemoterapi kan vurderes for immunterapi med antagelsen om at flertallet faktisk har mikrometastaser. Utvikling av effektive immunbaserte konsepter for forebygging eller behandling av EOC vil kreve en forståelse av tumor-immunologiske prinsipper, virkningsmekanismer for det ekspanderende utvalget av immunmodulerende molekyler, identifikasjon og karakterisering av tumorantigener, og bestemmelse av mikromiljøfaktorene som kan innvirkning på de forskjellige immuneffektormekanismene. Den kliniske forskeren har blitt forsynt med mange immunstyrte midler, men fremgangen med deres integrering i standardbehandlinger har vært noe langsom.

Folatreseptor

Folatreseptoren (FR), et 38 kDa membranglykoprotein, er representert av en homolog familie av glykoproteiner, hvorav to (FR-a og FR-b) er festet til celleoverflaten med et glykosyl-fosfatidylinositol-anker; den tredje isoformen (FR-) og dens avkortede versjon (FR-9) utskilles konstitutivt på grunn av mangel på et effektivt signal for modifikasjon av glykosyl-fosfatidylinositol. FR-a uttrykkes i noen normale epitelceller og er forhøyet i visse karsinomer, mens FR-b er en myeloid differensieringsmarkør og er forhøyet i noen ikke-epiteliale maligniteter. FR-9 uttrykkes i hematopoietisk vev. For tiden er FR et stort fokus som et tumormål for flere eksperimentelle tilnærminger innen kreftbehandling. En ny tilnærming bruker bifunksjonelle antistoffer for å målrette T-celler til FR på overflaten av ovariekarsinomceller. Selektiv vekstinhibering av tumorcellene ble oppnådd ved denne tilnærmingen. De kimære antistoffene, som binder seg til både FR og enten CD3 eller CD28, ga imponerende resultater i en xenogen modell og hos pasienter med avansert eggstokkreft. Tilsvarende var et kimært molekyl bestående av en enkeltkjede, Fv av anti-FR-antistoff og interleukin 2, effektivt til å hemme tumorvekst in vivo. Alternativt kan folsyrekonjugater av enkeltkjedet anti-T-celle-reseptorantistoff mobilisere T-cellerespons mot FR-rike svulster. Ved å utnytte den ikke-destruktive naturen til FR-mediert internalisering av folatkoblede makromolekyler, ble cytotoksiner som momordin, Pseudomonas exotoxin og maytansinoider vist å produsere selektivt dreping av FR-rike celler. Videre var toksisiteten til slike konjugater avhengig av reseptortetthet på celleoverflaten. Folatkonjugerte radiofarmaka ser også ut til å tilby et middel for tumoravbildning/strålebehandling. Folatbelagte liposomer ble vist å selektivt målrette mot FR-rike tumorceller, og selektivt dreping av de ondartede cellene ble oppnådd ved å innkapsle doksorubicin i liposomene. Ved en lignende strategi var det mulig å levere antisense-oligonukleotider mot den epidermale vekstfaktorreseptoren til FR-rike tumorceller. Videre har selektiv målretting av en adenoviral vektor til FR-rike tumorceller blitt oppnådd i nærvær av et antistoff for å fjerne den endogene virale tropismen. Til slutt har flere studier vist at FR, når det uttrykkes ved høye nivåer, kan tilby den foretrukne opptaksveien for nye klasser av antifolatmedisiner som retter seg mot glycinamidribonukleotidformyltransferase og tymidylatsyntase. En løselig form for FR er påvist i serum og ascites hos pasienter med eggstokkreft. FR har blitt rapportert å være selektivt overuttrykt i 90 % av ikke-mucinøse ovariekarsinomer og i noen andre ondartede vev. Reseptoren er kun påvist i noen få andre normale celletyper, men ikke i normalt ovarieoverflateepitel. Det ser ut til at FR kan være et potensielt målantigen for immunterapi av eggstokkreft.

Epitoper av folatreseptor for human haplotype

Forekomsten av HLA-A2-haplotype er over 50 % i de vestlige landene. Forekomsten av HLA-A2-haplotype er rundt 30 % i Taiwan. De spesifikke epitopene til folatreseptoren i HLA-A2-haplotypen er identifisert. De er henholdsvis E39 (FR, 191-199) EIWTHSTKV og E75 (FR, 245-253) LLSLALMLL. Det ser ut til at folatreseptorer kan være et målantigen for immunterapi av eggstokkreft.

Vårt forskerteam har fokusert på utvikling av en kreftvaksine og immunterapi i flere år. Våre laboratoriefasiliteter er også satt opp for å evaluere de humane immunologiske assayene for humant papillomavirus type 16 E7-antigen ved tilskuddet støttet fra National Taiwan University Hospital. Det er svært viktig å sette opp ulike folatreseptorspesifikke immunologiske analyser av mennesker for å evaluere effekten av kreftvaksine eller immunterapi for eggstokkreft i fremtidige kliniske studier. Så vi ønsker å gi dette forslaget for å adressere utviklingen av folatreseptorspesifikke immunologiske analyser hos mennesker. Det er flere mål med dette prosjektet:

1. å utvikle og bruke analyser for å måle CTL-er til folatreseptorer og,
2. for å evaluere de folatreseptorspesifikke immunologiske responsene mellom normale kontroller og eggstokkreftpasienter.