O Desenvolvimento de Ensaios Imunológicos Humanos Específicos para o Antígeno Receptor de Folato

Incidência de câncer de ovário

O câncer de ovário é a primeira taxa de mortalidade de malignidades ginecológicas com uma taxa de sobrevida global de 5 anos de apenas 20-30%. Tornou-se uma doença cada vez mais importante nos últimos anos e a incidência de câncer de ovário também aumentou nos últimos anos em Taiwan. A falta de sintomas, dificuldades no diagnóstico precoce, marcadores tumorais precisos insuficientes e falta de informações sobre a biologia do tumor ovariano contribuem para o mau prognóstico em pacientes com câncer de ovário. Os parâmetros prognósticos para os carcinomas ovarianos são estágio do tumor, subtipo histológico, grau de malignidade e tumor residual após o tratamento cirúrgico. No entanto, esses fatores apresentam um quadro incompleto da biologia tumoral do câncer de ovário e estão frequentemente inter-relacionados. Assim, a identificação de novos fatores biológicos preditivos do curso e prognóstico da doença individual seria extremamente útil. A partir dos dados acima mencionados, o câncer de ovário é de fato uma doença que deve ser respeitada, no entanto, houve muito pouco trabalho de pesquisa com foco em Taiwan.

Tratamento do câncer de ovário

O câncer epitelial de ovário (EOC) e o carcinoma Mülleriano extraovariano são entidades patológicas semelhantes que compartilham uma preferência pelo envolvimento da cavidade peritoneal. O padrão de disseminação desses tumores apresenta um desafio e oportunidades únicas para a imunoterapia. Pacientes com EOC que apresentam doença em estágio I (localizada nos ovários) após estadiamento cirúrgico ideal, têm taxa de sobrevida em 5 anos de 90%, sem alteração significativa em 10 anos. Por outro lado, pacientes com disseminação além dos ovários têm taxas médias de sobrevida que diminuem para < 10% para pacientes com doença residual volumosa após cirurgia e tratamento com quimioterapia combinada à base de platina. Um estudo randomizado de quimioterapia de primeira linha em pacientes com EOC com massas residuais maiores que 1 cm após a cirurgia inicial mostrou um período de sobrevida mediano de 38 meses para cisplatina/paclitaxel, significativamente maior que 24 meses para o braço de tratamento cisplatina/citoxana. Em uma análise interina de um estudo de equivalência, a sobrevida após carboplatina/paclitaxel não foi pior do que cisplatina/paclitaxel. Embora o diagnóstico precoce seja um objetivo importante dos esforços de pesquisa clínica em andamento, não está claro se o COE avançado começa como um processo multicêntrico envolvendo os ovários e a superfície peritoneal. Está agora estabelecido que fatores hereditários contribuem para o desenvolvimento de EOC. As mutações germinativas BRCA1 e BRCA2 representam aproximadamente 10% de todos os EOC. Em uma mulher com uma mutação BRCA 1 ou 2, o risco vitalício de câncer de ovário varia de 16% a 44%. Com a disponibilidade comercial de testes genéticos para BRCA1 e BRCA2, mais mulheres estão sendo identificadas como de alto risco para câncer de ovário. Não há diretrizes claras sobre a prevenção do câncer para esses indivíduos. Embora a ooforectomia profilática seja uma opção razoável para mulheres que concluíram a gravidez, essas mulheres ainda correm o risco de desenvolver câncer peritoneal. Claramente, outras opções de prevenção são necessárias.

Imunoterapia para câncer de ovário

Ao desenvolver estratégias imunológicas eficazes para EOC, deve haver uma distinção entre abordagens preventivas e terapêuticas. Prevê-se que a imunoprevenção (imunoprofilaxia) seja desenvolvida para mulheres com risco aumentado de desenvolvimento de EOC. Em contraste, a imunoterapia seria usada como adjuvante à cirurgia ou em combinação com quimioterapia ou outros produtos biológicos como quimioimunoterapia ou bioquimioimunoterapia. Pacientes com doença indetectável após serem reestadiados após a quimioterapia podem ser considerados para imunoterapia com a presunção de que a maioria de fato tem micrometástases. O desenvolvimento de conceitos imunitários eficazes para a prevenção ou tratamento de EOC exigirá uma compreensão dos princípios da imunologia tumoral, mecanismos de ação do conjunto em expansão de moléculas imunomoduladoras, identificação e caracterização de antígenos tumorais e determinação dos fatores do microambiente que poderiam impacto sobre os diferentes mecanismos imuno-efetores. O pesquisador clínico recebeu muitos agentes direcionados ao sistema imunológico, mas o progresso em sua integração em terapias padrão tem sido um tanto lento.

receptor de folato

O receptor de folato (FR), uma glicoproteína de membrana de 38 kDa, é representado por uma família homóloga de glicoproteínas, duas das quais (FR-a e FR-b) estão ligadas à superfície celular por uma âncora de glicosil-fosfatidilinositol; a terceira isoforma (FR-) e sua versão truncada (FR-9) são secretadas constitutivamente devido à falta de um sinal eficiente para a modificação do glicosil-fosfatidilinositol. O FR-a é expresso em algumas células epiteliais normais e está elevado em certos carcinomas, enquanto o FR-b é um marcador de diferenciação mielóide e está elevado em algumas malignidades não epiteliais. FR-9 é expresso em tecidos hematopoiéticos. Atualmente, FR é um foco importante como alvo tumoral para múltiplas abordagens experimentais na terapia do câncer. Uma nova abordagem usa anticorpos bifuncionais para direcionar as células T para o FR na superfície das células do carcinoma ovariano. A inibição seletiva do crescimento das células tumorais foi obtida por esta abordagem. Os anticorpos quiméricos, que se ligam tanto a FR quanto a CD3 ou CD28, produziram resultados impressionantes em um modelo xenogênico e em pacientes com câncer de ovário avançado. Da mesma forma, uma molécula quimérica consistindo em um Fv de cadeia simples de anticorpo anti-FR e interleucina 2 foi eficaz na inibição do crescimento do tumor in vivo. Alternativamente, os conjugados de ácido fólico do anticorpo anti-receptor de células T de cadeia simples podem mobilizar a resposta das células T contra tumores ricos em FR. Aproveitando a natureza não destrutiva da internalização mediada por FR de macromoléculas acopladas a folato, foi demonstrado que citotoxinas como momordina, exotoxina de Pseudomonas e maitansinóides produzem morte seletiva de células ricas em FR. Além disso, a toxicidade de tais conjugados dependia da densidade do receptor na superfície celular. Os radiofármacos conjugados com folato também parecem oferecer um meio de imagem tumoral/radioterapia. Os lipossomas revestidos com folato mostraram atingir seletivamente as células tumorais ricas em FR, e a morte seletiva das células malignas foi obtida encapsulando a doxorrubicina nos lipossomas. Por uma estratégia semelhante, foi possível entregar oligonucleotídeos antisense contra o receptor do fator de crescimento epidérmico para células tumorais ricas em FR. Além disso, o direcionamento seletivo de um vetor adenoviral para células tumorais ricas em FR foi alcançado na presença de um anticorpo para eliminar o tropismo viral endógeno. Finalmente, vários estudos mostraram que o FR, quando expresso em níveis elevados, pode oferecer a via de captação preferida de novas classes de drogas antifolato que têm como alvo a glicineamida ribonucleotídeo formiltransferase e a timidilato sintase. Uma forma solúvel de FR foi detectada no soro e na ascite de pacientes com câncer de ovário. Foi relatado que o FR é superexpresso seletivamente em 90% dos carcinomas ovarianos não mucinosos e em alguns outros tecidos malignos. O receptor só foi detectado em alguns outros tipos de células normais, mas não no epitélio normal da superfície ovariana. Parece que o FR pode ser um potencial antígeno-alvo para a imunoterapia do câncer de ovário.

Epítopos do receptor de folato para o haplótipo humano

A incidência do haplótipo HLA-A2 é superior a 50% nos países ocidentais. A incidência do haplótipo HLA-A2 é de cerca de 30% em Taiwan. Os epítopos específicos do receptor de folato no haplótipo HLA-A2 foram identificados. Eles são E39 (FR, 191-199) EIWTHSTKV e E75 (FR, 245-253) LLSLALMLL, respectivamente. Parece que os receptores de folato podem ser um antígeno alvo para a imunoterapia do câncer de ovário.

Nossa equipe de pesquisa se concentrou no desenvolvimento de uma vacina contra o câncer e imunoterapia por vários anos. Nossas instalações de laboratório também foram criadas para avaliar os ensaios imunológicos humanos para o antígeno E7 do vírus do papiloma humano tipo 16 pela doação financiada pelo National Taiwan University Hospital. É muito importante estabelecer vários ensaios imunológicos específicos do receptor de folato de seres humanos para avaliar o efeito da vacina contra o câncer ou imunoterapia para câncer de ovário em futuros ensaios clínicos. Assim, gostaríamos de fornecer esta proposta para abordar o desenvolvimento de ensaios imunológicos específicos do receptor de folato em seres humanos. Existem vários objetivos neste projeto:

1. desenvolver e utilizar ensaios para medir CTLs para receptores de folato e,
2. avaliar as respostas imunológicas específicas do receptor de folato entre controles normais e pacientes com câncer de ovário.