葉酸受容体抗原に特異的なヒト免疫学的アッセイの開発

卵巣がんの発生率

卵巣がんは、婦人科悪性腫瘍の最初の死亡率であり、全体の 5 年生存率はわずか 20 ～ 30% です。 近年、卵巣がんはますます重要な疾患となり、台湾では卵巣がんの発生率も近年増加しています。 症状の欠如、早期診断の難しさ、不十分な正確な腫瘍マーカー、および卵巣腫瘍生物学に関する情報の欠如が、卵巣がん患者の予後不良の一因となっています。 卵巣癌の予後パラメータは、腫瘍の病期、組織学的サブタイプ、悪性度、および外科的治療後の残存腫瘍です。 ただし、これらの要因は、卵巣がんの腫瘍生物学の不完全な全体像を示しており、相互に関連していることがよくあります。 したがって、個々の疾患の経過と予後を予測する新しい生物学的要因の特定は非常に有用です。 上記のデータから、卵巣がんは確かに尊重されるべき疾患ですが、台湾ではそれに焦点を当てた研究はほとんどありませんでした.

卵巣がんの治療

上皮性卵巣がん (EOC) と卵巣外ミュラー管がんは、腹腔への関与を好む類似の病理学的実体です。 これらの腫瘍の広がりパターンは、免疫療法の課題とユニークな機会を提示します。 最適な外科的病期分類後にステージ I の疾患 (卵巣に局在) を有する EOC 患者の 5 年生存率は 90% であり、10 年で有意な変化はありません。 対照的に、卵巣を越えて転移した患者の生存率の中央値は、手術およびプラチナベースの多剤併用化学療法による治療後に巨大な残存病変を有する患者では 10% 未満に減少します。 最初の手術後に残存腫瘤が 1 cm を超える EOC 患者を対象とした一次化学療法の無作為化試験では、シスプラチン/パクリタキセルの生存期間の中央値が 38 か月で、シスプラチン/シトキサン治療群では 24 か月を大幅に上回っていることが示されました。 同等性試験の中間解析では、カルボプラチン/パクリタキセル後の生存率はシスプラチン/パクリタキセルよりも悪くはありませんでした。 早期診断は進行中の臨床研究努力の重要な目標ですが、高度な EOC が卵巣と腹膜表面を含む多中心性プロセスとして始まるかどうかは不明です。 現在、遺伝的要因がEOCの発症に寄与していることが確立されています。 生殖細胞系 BRCA1 および BRCA2 変異は、全 EOC の約 10% を占めます。 BRCA 1 または 2 変異を持つ女性の卵巣がんの生涯リスクは 16% ～ 44% です。 BRCA1 と BRCA2 の遺伝子検査が商業的に利用できるようになったことで、卵巣がんのリスクが高いと特定される女性が増えています。 これらの個人のがん予防に関する明確なガイドラインはありません。 予防的卵巣摘出術は、出産を終えた女性にとって妥当な選択肢ですが、これらの女性は依然として腹膜がんを発症するリスクがあります。 明らかに、予防のための他のオプションが必要です。

卵巣がんの免疫療法

EOC に対する効果的な免疫ベースの戦略を開発する際には、予防的アプローチと治療的アプローチを区別する必要があります。 EOCの発症リスクが高い女性のために、免疫予防（免疫予防）が開発されることが予想されます。 対照的に、免疫療法は手術の補助として、または化学免疫療法または生化学免疫療法として化学療法または他の生物製剤と組み合わせて使用​​されます。 化学療法後に再病期分類された後に疾患が検出されなかった患者は、大多数が実際に微小転移を持っていると仮定して、免疫療法を考慮することができます。 EOC の予防または治療のための効果的な免疫ベースの概念の開発には、腫瘍免疫学の原理の理解、免疫調節分子の拡大配列の作用メカニズムの理解、腫瘍抗原の同定と特徴付け、および可能性のある微小環境因子の決定が必要です。さまざまな免疫エフェクターメカニズムへの影響。 臨床研究者は、多くの免疫指向性薬剤を提供されてきましたが、それらの標準治療への統合の進展はいくぶん遅いものでした.

葉酸受容体

38 kDa の膜糖タンパク質である葉酸受容体 (FR) は、糖タンパク質の相同ファミリーによって表されます。そのうちの 2 つ (FR-a および FR-b) は、グリコシルホスファチジルイノシトールアンカーによって細胞表面に結合しています。 3 番目のアイソフォーム (FR-) とその短縮バージョン (FR-9) は、グリコシルホスファチジルイノシトール修飾の効率的なシグナルが欠如しているため、構成的に分泌されます。 FR-a は一部の正常な上皮細胞で発現し、特定の癌腫で上昇しますが、FR-b は骨髄分化マーカーであり、一部の非上皮性悪性腫瘍で上昇します。 FR-9は造血組織に発現しています。 現在、FR は、がん治療における複数の実験的アプローチの腫瘍標的としての主要な焦点です。 1 つの新しいアプローチでは、二機能性抗体を使用して、T 細胞を卵巣癌細胞の表面の FR にターゲティングします。 このアプローチにより、腫瘍細胞の選択的増殖阻害が得られた。 FR と CD3 または CD28 の両方に結合するキメラ抗体は、異種モデルおよび進行卵巣癌患者で印象的な結果をもたらしました。 同様に、抗ＦＲ抗体の単鎖Ｆｖとインターロイキン２からなるキメラ分子は、インビボでの腫瘍増殖の阻害に有効であった。 あるいは、一本鎖抗T細胞受容体抗体の葉酸コンジュゲートは、FRに富む腫瘍に対するT細胞応答を動員することができます。 FR を介した葉酸共役高分子の内在化の非破壊的な性質を利用して、momordin、シュードモナス外毒素、メイタンシノイドなどの細胞毒素は、FR に富む細胞を選択的に殺すことが示されました。 さらに、そのようなコンジュゲートの毒性は、細胞表面の受容体密度に依存していました。 葉酸結合放射性医薬品は、腫瘍の画像化/放射線療法の手段も提供するようです。 葉酸でコーティングされたリポソームは、FR に富む腫瘍細胞を選択的に標的とすることが示されており、リポソームにドキソルビシンをカプセル化することにより、悪性細胞の選択的な死滅が得られました。 同様の戦略により、上皮成長因子受容体に対するアンチセンスオリゴヌクレオチドをFRリッチ腫瘍細胞に送達することが可能でした。 さらに、アデノウイルスベクターのFRリッチ腫瘍細胞への選択的ターゲティングは、内因性ウイルス親和性を除去する抗体の存在下で達成されています。 最後に、FRが高レベルで発現すると、グリシンアミドリボヌクレオチドホルミルトランスフェラーゼとチミジル酸シンターゼを標的とする新しいクラスの葉酸拮抗薬の好ましい取り込み経路を提供できることがいくつかの研究で示されています。 可溶型の FR は、卵巣癌患者の血清および腹水で検出されています。 FR は、非粘液性卵巣癌の 90% およびその他の悪性組織で選択的に過剰発現することが報告されています。 この受容体は、他のいくつかの正常な細胞タイプでのみ検出されていますが、正常な卵巣表面上皮では検出されていません。 FR は、卵巣癌の免疫療法の潜在的な標的抗原になる可能性があるようです。

ヒトハプロタイプの葉酸受容体のエピトープ

HLA-A2 ハプロタイプの発生率は、西側諸国で 50% を超えています。 HLA-A2 ハプロタイプの発生率は、台湾では約 30% です。 HLA-A2 ハプロタイプにおける葉酸受容体の特定のエピトープが同定されています。 それらは、それぞれ E39 (FR、191-199) EIWTHSKV および E75 (FR、245-253) LLSLALMLL です。 葉酸受容体は、卵巣癌の免疫療法の標的抗原になる可能性があるようです.

私たちの研究チームは、数年間、がんワクチンと免疫療法の開発に注力してきました。 私たちの実験施設は、国立台湾大学病院から支援された助成金により、ヒトパピローマウイルス16型E7抗原のヒト免疫学的アッセイを評価するためにも設置されています。 将来の臨床試験において、癌ワクチンまたは卵巣癌に対する免疫療法の効果を評価するために、ヒトの様々な葉酸受容体特異的免疫アッセイを設定することは非常に重要です。 そこで、ヒトにおける葉酸受容体特異的免疫アッセイの開発に対処するために、この提案を提供したいと思います. このプロジェクトにはいくつかの目的があります。

1. 葉酸受容体に対するCTLを測定するためのアッセイを開発および利用すること、および、
2. 正常対照と卵巣癌患者の間の葉酸受容体特異的免疫応答を評価する。