Indsamling af blod hos normale forsøgspersoner og forsøgspersoner med Von Willebrands sygdom (VWD)

Formål: Formålet med denne protokol er at få blodprøver fra normale forskningspersoner og patienter med Von Willebrands sygdom for at isolere blodudvækst endotelceller (BOEC) fra perifert blod og udvikle en ex vivo genoverførsel for Von Willebrands sygdom.

Eksperimentel procedure. Denne protokol er designet til at indsamle ca. 90 ml (6 spiseskefulde) blod fra normale personer uden Von Willebrands sygdom og personer med kendt Von Willebrands sygdom. I alt 20 normale individer og 20 Von Willebrands sygdomspatienter vil blive indskrevet i undersøgelsen.

Undersøgelser, der skal udføres på blodprøverne:

Hvert blodudtag kræver 10 store blå/sort hætte (Na Citrate) vacutainer (16x125 mm, BD# 362761, Cell Preparation Tubes (CPT), der skal fyldes fra hver frivillig. Alt blodet vil blive brugt til cellebehandling.

I indledende proof-of-concept-eksperimenter vil BOEC-linjer blive etableret fra det perifere blod fra normale individer og forskningspersoner med Von Willebrands sygdom. Efter dyrkning og fænotypisk karakterisering vil de blive transduceret med en lentivirus-genoverførselsvektor, der udtrykker et reportergen eller vildtype Von Willebrand-faktor. Efter at have demonstreret vellykket transduktion, vil det næste trin være at skrive en dyreprotokol, der vil introducere de modificerede celler i immunkompromitterede mus og overvåge musene for stabil implantation.