Plasma adiponectin niveauer og relationer med cytokiner hos børn med akut gigtfeber

I alt blev 33 børn (aldersinterval: 5 - 17 år; 15 mænd og 18 kvinder) tilmeldt undersøgelsen, som blev diagnosticeret som ARF ved den pædiatriske kardiologiske afdeling, det medicinske fakultet, Eskişehir Osmangazi University. Undersøgelsesprotokollen blev godkendt af etisk komité ved det medicinske fakultet, Eskişehir Osmangazi Universitet (afgørelse nr. 41 dateret 4. juni 2008). Forældre til undersøgelsesdeltagere blev informeret om undersøgelsens formål og metode, og der blev indhentet skriftlige samtykker.

For forsøgspersonerne blev diagnosen ARF stillet i henhold til Modified Jones-kriterierne (4), og passende behandling blev startet. Patienterne blev inddelt i tre grupper efter kliniske fund. Gruppe 1 omfattede patienter med kun chorea, mens patienter med gigt og carditis var involveret i gruppe 2 og patienter med kun carditis var inkluderet i gruppe 3. En gruppe med kun gigt blev ikke etableret, da patienterne med isoleret arthritis normalt følges op kl. primære og sekundære sundhedsfaciliteter i stedet for at henvise disse patienter til vores tertiære sundhedscenter.

Venøs blodprøvetagning Følgende test blev analyseret ved hjælp af venøse blodprøver udtaget fra patienter og raske kontrolpersoner; komplet blodtælling, ESR, nefelometrisk CRP og immun turbidimetrisk hsCRP, total kolesterol, triglycerid, LDL-C og HDL-C niveauer ved enzymatisk coloxrimetrisk metode og FSH og LH og total testosteron (for mandlige forsøgspersoner) og østradiol (for kvindelige forsøgspersoner) niveauer ved kemoluminescensanalyse. Plasma- og serumprøver blev udtaget for adiponectin, TNF-α, IL-6 og IL-8. Blodprøver blev udtaget til analyse af akutfasereaktanter på dag 2., 5., 10. og 15. dag og efter uge 8 for at evaluere respons på behandlingen, mens blodprøver blev udtaget samtidigt til analyse af adiponectin, TNF-α, IL-6 og IL-8 niveauer.

Plasma Adiponectin-måling Venøse blodprøver blev tilsat til centrifugerørene med EDTA, de blev centrifugeret ved 3000 rpm, 4 °C i 15 minutter, og de resulterende plasmaprøver blev opbevaret ved -80 °C. Plasmaprøver blev fortyndet (1:300) som anvist af brugsanvisningen til sættet, før analysen blev udført. Prøver taget for plasma adiponectin niveauer blev analyseret ved hjælp af Human Adiponectin ELISA, High Sensitivity kit (BioVendor Research and Diagnostic Products, Modrice, Tjekkiet) med enzym-linked immunosorbent assay (ELISA) metode. Absorbans blev aflæst ved 450 nm. Resultaterne blev udtrykt som ng/ml og omdannet til µg/ml ved at dividere dem med 1000.

Serum-TNF-a-, IL-6- og IL-8-målinger De venøse blodprøver blev tilsat i centrifugerør, der ikke indeholdt antikoagulant, til måling af serum-TNF-α-, IL-6- og IL-8-niveauer. Prøver blev centrifugeret ved 3000 rpm, 4 °C i 15 minutter, og de resulterende serumprøver blev opbevaret ved -80 °C. Prøver taget til måling af serum-TNF-, IL-6- og IL-8-niveauer blev analyseret med ELISA-metoden under anvendelse af Human TNF-α ELISA, Human IL-6 ELISA, Human IL-8/NAP-1 ELISA-sæt (Bender MedSystems, Wien, Østrig). Absorbans blev aflæst ved 450 nm. Resultater blev udtrykt som pg/ml.