Niveles plasmáticos de adiponectina y relaciones con las citoquinas en niños con fiebre reumática aguda

En total, se inscribieron en el estudio 33 niños (rango de edad: 5 a 17 años; 15 hombres y 18 mujeres) que fueron diagnosticados con IRA en el Departamento de Cardiología Pediátrica, Facultad de Medicina, Universidad Eskişehir Osmangazi. El protocolo de estudio fue aprobado por el Comité de Ética de la Facultad de Medicina de la Universidad Eskişehir Osmangazi (Decisión No. 41 del 4 de junio de 2008). Se informó a los padres de los participantes del estudio sobre el objetivo y el método del estudio y se obtuvieron los consentimientos por escrito.

A los sujetos del estudio se les realizó el diagnóstico de IRA según los criterios de Jones Modificados (4) y se inició el tratamiento adecuado. Los pacientes se dividieron en tres grupos según los hallazgos clínicos. El grupo 1 incluyó pacientes con solo corea, mientras que los pacientes con artritis y carditis se incluyeron en el grupo 2 y los pacientes con solo carditis se incluyeron en el grupo 3. No se estableció un grupo con solo artritis ya que los pacientes con artritis aislada generalmente se siguen en instalaciones de atención médica primaria y secundaria en lugar de derivar a esos pacientes a nuestro centro de atención médica terciaria.

Muestreo de sangre venosa Las siguientes pruebas se analizaron utilizando muestras de sangre venosa extraídas de pacientes y sujetos de control sanos; hemograma completo, VSG, PCR nefelométrica e inmunoturbidimétrica hsCRP, niveles de colesterol total, triglicéridos, LDL-C y HDL-C por método coloroxrimétrico enzimático y niveles de FSH y LH y testosterona total (para hombres) y estradiol (para mujeres) por ensayo quimioluminiscente. Se extrajeron muestras de plasma y suero para adiponectina, TNF-α, IL-6 e IL-8. Se extrajeron muestras de sangre para analizar reactivos de fase aguda los días 2, 5, 10 y 15 y a las 8 semanas para evaluar la respuesta al tratamiento, mientras que simultáneamente se extrajeron muestras de sangre para analizar adiponectina, TNF-α, IL-6 y niveles de IL-8.

Medición de adiponectina plasmática Se agregaron muestras de sangre venosa a los tubos de centrífuga con EDTA, se centrifugaron a 3000 rpm, 4 °C durante 15 minutos y las muestras de plasma resultantes se almacenaron a -80 °C. Las muestras de plasma se diluyeron (1:300) según las instrucciones de uso del kit, antes de realizar el análisis. Las muestras tomadas para determinar los niveles de adiponectina en plasma se analizaron utilizando el kit ELISA de alta sensibilidad para adiponectina humana (BioVendor Research and Diagnostic Products, Modrice, República Checa) con el método de ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). La absorbancia se leyó a 450 nm. Los resultados se expresaron como ng/ml y se convirtieron en µg/ml dividiéndolos por 1000.

Mediciones de TNF-α, IL-6 e IL-8 en suero Las muestras de sangre venosa se añadieron a tubos de centrífuga que no contenían anticoagulante para medir los niveles de TNF-α, IL-6 e IL-8 en suero. Las muestras se centrifugaron a 3000 rpm, 4 °C durante 15 minutos y las muestras de suero resultantes se almacenaron a -80 °C. Las muestras tomadas para medir los niveles séricos de TNF-, IL-6 e IL-8 se analizaron con el método ELISA usando los kits Human TNF-α ELISA, Human IL-6 ELISA, Human IL-8/NAP-1 ELISA (Bender MedSystems, Viena, EE. Austria). La absorbancia se leyó a 450 nm. Los resultados se expresaron como pg/ml.