A plazma adiponektin szintje és a citokinekkel való kapcsolata akut reumás lázban szenvedő gyermekeknél

Összesen 33 gyermeket (5-17 éves korosztály; 15 férfi és 18 nő) vontak be a vizsgálatba, akiknél ARF-t diagnosztizáltak az Eskişehir Osmangazi Egyetem Orvosi Karának Gyermekkardiológiai Osztályán. A vizsgálati protokollt az Eskişehir Osmangazi Egyetem Orvostudományi Karának Etikai Bizottsága hagyta jóvá (2008. június 4-i 41. számú határozat). A vizsgálatban résztvevők szüleit tájékoztatták a vizsgálat céljáról és módszeréről, valamint írásos hozzájárulást kaptak.

A vizsgálati alanyok esetében az ARF diagnózisát a Modified Jones-kritériumok (4) szerint végezték el, és megkezdték a megfelelő kezelést. A betegeket három csoportra osztották a klinikai leletek alapján. Az 1. csoportba csak a choreában szenvedő betegek, míg az ízületi gyulladásban és carditisben szenvedő betegek a 2. csoportba, a csak karditiszben szenvedők pedig a 3. csoportba kerültek. Csak arthritises csoportot nem hoztak létre, mivel az izolált ízületi gyulladásban szenvedő betegeket általában a következő időpontban követik nyomon. elsődleges és másodlagos egészségügyi intézményekben, ahelyett, hogy ezeket a betegeket a mi felsőfokú egészségügyi központunkba irányítanánk.

Vénás vérmintavétel A következő teszteket betegektől és egészséges kontrollalanyoktól vett vénás vérminták felhasználásával elemeztük; teljes vérkép, ESR, nefelometrikus CRP és immunturbidimetriás hsCRP, összkoleszterin, triglicerid, LDL-C és HDL-C szint enzimatikus koloxrimetriás módszerrel, valamint FSH és LH és teljes tesztoszteron (férfi alanyoknál) és ösztradiol (női alanyoknál) szint kemolumineszcens vizsgálattal. Plazma- és szérummintákat vettünk adiponektin, TNF-α, IL-6 és IL-8 kimutatására. Vérmintákat vettünk az akut fázis reaktánsainak analíziséhez a 2., 5., 10. és 15. napon, valamint a 8. héten, hogy értékeljük a kezelésre adott választ, míg egyidejűleg vérmintákat vettünk az adiponektin, a TNF-α, az IL-6 és az IL-6 elemzésére. IL-8 szintek.

Plazma adiponektin mérés A vénás vérmintákat a centrifugacsövekbe EDTA-val töltöttük, 3000 rpm-en, 4 °C-on 15 percig centrifugáltuk, majd a kapott plazmamintákat -80 °C-on tároltuk. A plazmamintákat a kit használati utasításában leírtak szerint hígítottuk (1:300) az elemzés elvégzése előtt. A plazma adiponektinszintjére vett mintákat Human Adiponectin ELISA, High Sensitivity kit (BioVendor Research and Diagnostic Products, Modrice, Csehország) segítségével, enzim-linked immunosorbent assay (ELISA) módszerrel elemeztük. Az abszorbanciát 450 nm-en olvastuk le. Az eredményeket ng/ml-ben fejeztük ki, és 1000-zel osztva µg/ml-re konvertáltuk.

Szérum TNF-α, IL-6 és IL-8 mérések A vénás vérmintákat antikoagulánst nem tartalmazó centrifugacsövekbe töltöttük a szérum TNF-α, IL-6 és IL-8 szintjének mérésére. A mintákat 3000 fordulat/perc sebességgel, 4 °C-on 15 percig centrifugáltuk, és a kapott szérummintákat -80 °C-on tároltuk. A szérum TNF-, IL-6 és IL-8 szintjének mérésére vett mintákat ELISA módszerrel elemeztük Humán TNF-α ELISA, Humán IL-6 ELISA, Humán IL-8/NAP-1 ELISA kittel (Bender MedSystems, Bécs, Ausztria). Az abszorbanciát 450 nm-en olvastuk le. Az eredményeket pg/ml-ben fejeztük ki.