Níveis de adiponectina plasmática e relações com citocinas em crianças com febre reumática aguda

No total, 33 crianças (faixa etária: 5 - 17 anos; 15 homens e 18 mulheres) foram incluídas no estudo e foram diagnosticadas como IRA no Departamento de Cardiologia Pediátrica da Faculdade de Medicina da Universidade Eskişehir Osmangazi. O protocolo do estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética da Faculdade de Medicina da Universidade Eskişehir Osmangazi (Decisão nº 41 de 4 de junho de 2008). Os pais dos participantes do estudo foram informados sobre o objetivo e o método do estudo e os consentimentos por escrito foram obtidos.

Para os sujeitos do estudo, o diagnóstico de IRA foi feito de acordo com os critérios modificados de Jones (4) e o tratamento adequado foi iniciado. Os pacientes foram divididos em três grupos por achados clínicos. O Grupo 1 incluiu pacientes apenas com coréia, enquanto os pacientes com artrite e cardite foram incluídos no Grupo 2 e os pacientes com apenas cardite foram incluídos no Grupo 3. Um grupo apenas com artrite não foi estabelecido, pois os pacientes com artrite isolada geralmente são acompanhados em unidades de saúde primárias e secundárias, em vez de encaminhar esses pacientes para nosso centro de saúde terciário.

Amostragem de Sangue Venoso Os testes seguintes foram analisados ​​usando amostras de sangue venoso retiradas de pacientes e indivíduos de controle saudáveis; hemograma completo, VHS, PCR nefelométrica e imunoturbidimétrica PCR-us, níveis de colesterol total, triglicerídeos, LDL-C e HDL-C pelo método coloximétrico enzimático e níveis de FSH e LH e testosterona total (para indivíduos do sexo masculino) e estradiol (para indivíduos do sexo feminino) por ensaio quimioluminescente. Amostras de plasma e soro foram coletadas para adiponectina, TNF-α, IL-6 e IL-8. Amostras de sangue foram coletadas para análise de reagentes de fase aguda nos dias 2, 5, 10 e 15 e na 8ª semana para avaliar a resposta ao tratamento, enquanto amostras de sangue foram coletadas simultaneamente para análise de adiponectina, TNF-α, IL-6 e Níveis de IL-8.

Medição de Adiponectina no Plasma Amostras de sangue venoso foram adicionadas aos tubos da centrífuga com EDTA, elas foram centrifugadas a 3000 rpm, 4°C por 15 minutos e as amostras de plasma resultantes foram armazenadas a -80°C. As amostras de plasma foram diluídas (1:300) conforme indicado nas instruções de uso do kit, antes da realização da análise. As amostras colhidas para os níveis de adiponectina plasmática foram analisadas usando ELISA de adiponectina humana, kit de alta sensibilidade (BioVendor Research and Diagnostic Products, Modrice, República Tcheca) com o método de ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA). A absorvância foi lida a 450 nm. Os resultados foram expressos em ng/ml e convertidos em µg/ml dividindo-os por 1000.

Dosagens Séricas de TNF-α, IL-6 e IL-8 As amostras de sangue venoso foram adicionadas em tubos de centrífuga sem anticoagulante para dosagem dos níveis séricos de TNF-α, IL-6 e IL-8. As amostras foram centrifugadas a 3000 rpm, 4 °C durante 15 minutos e as amostras de soro resultantes foram armazenadas a -80 °C. As amostras coletadas para medir os níveis séricos de TNF-, IL-6 e IL-8 foram analisadas com o método ELISA usando kits ELISA TNF-α Humano, IL-6 ELISA Humano, IL-8/NAP-1 Humano (Bender MedSystems, Viena, Áustria). A absorvância foi lida a 450 nm. Os resultados foram expressos em pg/ml.