Måling af virkningen af ​​kosttilskud med et højt fiberindhold, højt antioxidant aleuron på biomarkører for hjerte-kar-sygdomme og tarmmikrobiota hos voksne med højt kropsmasseindeks

UNDERSØGELSESMÅL Det generelle formål med undersøgelsen er at evaluere, om kosttilskud, der er rigt på hvedealeuron, ændrer de kardiovaskulære og metaboliske risikoprofiler hos forsøgspersoner med øget metabolisk risiko.

Det primære formål med forsøget er at evaluere, om kosttilskud, der er rigt på hvedealeuron, ændrer:

1. total plasma homocystein (tHcy)
2. plasmametabolitter relateret til homocysteinmetabolisme (herunder betain, dimethylglycin, methionin, cholin, folat, riboflavin, vitamin B6);
3. humane biofluid sekundære (mikrobiota-afledte) polyphenolmetabolitter;
4. fækal galdesyre og fækale sterolkoncentrationer.
5. fækal mikrobiotaprofil som genereret ved hjælp af Illumina-sekventering

Sekundære mål er at evaluere, om kosttilskud, der er rigt på hvedealeuron, ændrer:

1. plasma- og urin-MS-baseret metabolitprofilering;
2. totalt kolesterol, triglycerider, LDL- og HDL-kolesterolniveauer;
3. serum glucose og insulin niveauer;
4. antropometriske indekser;
5. urin isoprostan niveauer;
6. markører for intestinal permeabilitet i plasma;

7. C-reaktive proteinniveauer som markør for inflammation

   Oversigt over undersøgelsesdesign og endepunkter Studiet er sat op som et placebo-kontrolleret, randomiseret, dobbelt-blindt parallelt forsøg med 2 testfødevarer, hvede Aleuron-rige fødevarer eller kontrolfødevarer (placebo). De primære og sekundære endepunkter er angivet i ovenstående afsnit, STUDIEMÅL.

   Designoversigt Deltagerne vil blive identificeret og rekrutteret ved U.O.S. di Dietetica e Nutrizione Clinica, St Chiara, APSS Trento og Fondazione Edmund Mach. Deltagerne vil blive informeret om undersøgelsens mål og procedurer og vil blive forhåndsscreenet på grundlag af inklusions-/eksklusionskriterier. Hvis de er berettigede, vil de underskrive det informerede samtykke og gå ind i undersøgelsen med besøg T-1, udført på klinikken mellem kl. 8.00 og 9.00, hvor en klinisk og biokemisk evaluering af sundhedstilstanden vil blive udført. Hvis forsøgspersoner stadig er kvalificerede til undersøgelsen i henhold til alle eksklusionskriterierne, vil de blive inkluderet i forsøget og randomiseret til at modtage det aktive tilskud eller placebo ved besøg T0, 2 uger senere (indkøringsperiode). Der vil blive givet kostvejledning ved besøg T-1 og T0. Deltagerne vil blive rådet til at følge middelhavskostvaner og udøve moderat fysisk aktivitet.

   Klinisk besøg, kliniske tests og blodudtagning vil blive udført efter faste natten over i starten af ​​indkøringsfasen (besøg T-1). Kliniske tests, blodtagning, afføring og urinopsamling vil blive udført ved besøg T0 (uge 2) og T1 (uge 6). En fire dages maddagbog vil blive distribueret og udfyldt i fire på hinanden følgende dage af studiedeltagere før besøg T0 og T1.

   Hver deltager vil blive udsat for:

   • Klinisk og biokemisk evaluering for at udelukke mulig sygdomsstatus (T-1, uge ​​0): anamnestisk spørgeskema, EKG, hæmokrom, kreatinin, leverenzymer).
   • Blodtagning (30 ml) til biokemiske analyser (T-1 -uge 0-, T0 - uge 2- og T1 - uge 6-).
   • Afføring og 24 timers urinopsamling til biokemiske analyser (T0 - uge 2- og T1 - uge 6-).
   • Antropometrisk evaluering: systolisk og diastolisk blodtryk, puls, højde og vægt til BMI-beregning og talje- og hofteomkreds (T-1 -uge 0-, T0 - uge 2- og T1 - uge 6-).

   Alle besøgene vil blive udført på klinikken mellem 8.00 og 9.00, i fastende status. Hvert besøg varer omkring 1 time. Deltagerne vil blive bedt om ikke at ændre deres nuværende kost, med undtagelse af tilskudsintroduktion som erstatning for de tilsvarende fødevarer. De vil også blive bedt om at undgå lægemidler, kosttilskud og integratorer og omgående at meddele monitorerne enhver sygdomsstatus eller ændringer i lægemiddelordination (ny eller aktuel lægemiddelbehandling).

   Deltagerrekruttering Deltagerne vil blive identificeret og rekrutteret ved U.O.S. di Dietetica e Nutrizione Clinica, St Chiara, APSS Trento og Fondazione Edmund Mach. De vil omfatte arbejdere ved både institutioner og medlemmer af offentligheden. Deltagerne vil blive informeret om undersøgelsens mål og procedurer og vil blive forhåndsscreenet på grundlag af inklusions-/eksklusionskriterier. Hvis de er berettigede, vil de underskrive det informerede samtykke og gå ind i undersøgelsen med besøg T-1, hvor der vil blive udført en klinisk og biokemisk evaluering af sundhedstilstanden. Hvis forsøgspersoner forbliver kvalificerede til undersøgelsen i henhold til alle inklusions-/eksklusionskriterierne, vil de blive inkluderet i forsøget og randomiseret til at modtage det aktive tilskud eller placebo ved besøg T0, to uger senere (indkøringsperiode).

   Supplering Efter en indkøringsfase på to uger vil deltagerne blive randomiseret til at modtage tilskud med enten hvede Aleuron-rig mad eller placebo-mad i fire uger på en dobbeltblind måde.

   Kostvejledning Der vil blive givet kostvejledning ved besøg T-1 og T0. Deltagerne vil blive rådet til at følge middelhavskostvaner og udøve moderat fysisk aktivitet.

   Opfølgning Interventionen vil omfatte fire ugers behandlingsperioder. Klinisk besøg, kliniske tests og blodtagning vil blive udført efter en natfaste ved besøg T-1 - uge 0-. Kliniske tests, blodudtagning og afføring og urinopsamling vil blive udført ved besøg T0 og T1 (T0 dagen før tilskud, T1 vil være uge 4 efter behandlingen enten aleuron-suppleret mad eller placebo-tilskud). Et et års tilbagekaldelsesspørgeskema til madhyppighed vil blive administreret ved besøg T-1. Et spørgeskema med en uges tilbagekaldelse af madhyppighed vil blive udført før besøg T0 og T1.

   Klinisk evaluering Elektrokardiogram. Et 12-aflednings EKG vil blive udført ved screeningen. Elektrokardiografer vil blive gennemgået og fortolket af U.O.S. di Dietetica og Nutrizione Clinica, St Chiara, APSS Trento.

   Arterielt blodtryk (BP) vil blive målt i henhold til retningslinjerne for hypertension fra ISH/WHO 2004. 'OMRON HEM705CP Oscillometrisk blodtryksmåler' vil blive brugt. Forsøgspersonerne vil blive holdt hvilende og siddende i 10 minutter, før de måler blodtrykket på højre arm; Den første foranstaltning vil blive afsluttet; det andet og det tredje mål følger det første med 2 minutter hver, på en afslappet og nøgen arm og med armvinklen på samme niveau som hjertet. Middelværdien af ​​de to sidste mål vil blive brugt til analysen.

   Vægt og højde vil blive målt på en standardvægt, med påsat højdemåler til højdemålinger og vil blive registreret som lig med henholdsvis nærmeste 100 g og 1 cm, hvis det er nødvendigt. Foranstaltninger vil blive udført på emner uden sko, frakker eller tung påklædning. BMI vil blive beregnet som kg/m2.

   Taljeomkreds (navlestreng) vil blive målt i henhold til National Institutes of Health, National Heart, Lung, and Blood Institute. Kliniske retningslinjer for identifikation, evaluering og behandling af overvægt og fedme hos voksne; bevisrapporten. I praksis, med forsøgspersonen stående oprejst med maven afslappet, armen i siderne og fødderne samlet, vil taljeomkredsen blive målt på nærmeste 0,1 cm i et niveau midt mellem den nederste ribben og hoftekammen med tape hele vejen rundt om kroppen i vandret position. Hofteomkredsen vil blive målt på bitrokantært niveau. Forholdet mellem talje og hofteomkreds (WHR) vil blive beregnet.

   Spørgeskemaer. Alle oplysninger vil blive indsamlet og registreret i validerede spørgeskemaer, herunder personlig identifikation, sygehistorie og information om risikofaktorer for CVD, stofbrug, fysisk aktivitet og kostvaner. Desuden vil en tre dages maddagbog blive indsamlet.

   Blodprøvetagning og urinopsamling Blod (≤ 30 ml) vil blive opsamlet fra en antecubital vene, med minimal stase mellem kl. 8.00 og 9.00 efter 12 timers faste, fra forsøgspersoner, der afstod fra at ryge i mindst 6 timer. 24 timers urinopsamling vil blive opnået fra hver deltager. Urinvolumen vil blive målt, og 5 alikvoter af 5 ml vil blive opbevaret ved -80°C.

   Fækalprøveindsamling Fækalprøver vil blive behandlet inden for 2 timer efter prøveproduktion. Kort fortalt vil 1 g alikvoter af fæces blive blandet med RNA-senere og opbevaret ved -80°C til senere DNA. Fækale prøver vil også blive frosset direkte ved -80°C til metabolitanalyse.

   Laboratorieprøver (U.O.S. di Dietetica e Nutrizione Clinica, St. Chiara, APSS Trento) Blodprøver vil blive centrifugeret i henhold til kravene i de test, der skal udføres, umiddelbart efter blodprøvetagning. Plasma eller serum vil blive adskilt, til dels straks testet, og den resterende fraktion opbevares ved -80°C.

   Kolesterol, triglycerider, HDL-kolesterol og glucose vil blive evalueret ved kromogene assays. LDL-kolesterol vil blive beregnet efter Friedewald-formlen.

   Insulinniveauer vil blive evalueret ved ELISA. Antallet af blodlegemer vil blive evalueret ved standardtests. C-RP vil blive målt ved nefelometriske assays; F2-isoprostaner vil blive målt i urin som et mål for oxidant-stress, ved hjælp af specifikt EIA-kit (Cayman Chemicals, Ann Arbor, Michigan, USA), efter oprensning ved fastfase-kromatografi (SepPack-søjler).

   Laboratorietest (Fondazione Edmund Mach [FEM]) Plasma-LPS, LPS-specifikt IgG, CD14, LPS-bindende protein og urin-8-Isorpostan vil blive målt spektrofotometrisk ved hjælp af et kommercielt ELISA-kit.

   Urin- og plasmametabolitprofilering (FEM). Urin- og blodprøver (plasma og serum) vil blive udsat for både målrettet metabolomics (UPLC-MS/MS for ikke-flygtige forbindelser og GC-MS/MS for flygtige forbindelser) og ikke-målrettet metabolomics (ULPC-Q-TOF-MS og Nano) -FTMS-Q-TOF for ikke-flygtige og GC-TOF for flygtige forbindelser) (Vanza et al., 2001 2012). Til målrettet metabolitprofilering af plasma vil det MS-baserede Biocrates AbsoluteIDQ® p180 Kit blive brugt, der genererer nøjagtige kvantitative data om 180 humane metabolitter relateret til diabetessygdomsrisiko. Der vil også blive anvendt specifik målrettet analyse for serumlipidprofiler, galdesyrer, SCFA og mikrobielle polyphenolmetabolitter kvantificering i biovæsker (inklusive fæces) ved hjælp af UPLC/QqQ-MS/MS (Vrhovsek et al., 2012).

   Fækal mikrobiotaanalyse (FEM). Fækale mikrobiologiske ændringer vil blive vurderet ved hjælp af 454 pyrosequencing metagenomics. Kort fortalt, efter levering af fækale prøver vil metagenomisk DNA blive ekstraheret ved hjælp af FastDNA SPIN Kit til FECES fra MPbio.com. Ved at bruge universelle bakterielle primere vil V1-V3-regionen inklusive 16S rRNA-genet, der er til stede i det fecale metagenomiske DNA, blive amplificeret og udsat for 454-pyrosequencing. Multiplex Identifier (MID) adaptere vil blive brugt til GS FLX Titanium Chemistry - Extended MID Set for at opnå sekvenser på ca. 600 bp længde, som vil blive BLASTED mod offentligt tilgængelige 16S rRNA fylogenetiske databaser ved hjælp af QIIME pipeline (http://qiime.org / ) giver gode artsniveauidentifikationer af den menneskelige tarmmikrobiota. I alt 20.000 brugbare sekvenser pr. fækal prøve er målrettet. Efter kvalitetskontrol og mikrobiel økologisk analyse vil multivariat statistik blive anvendt til at korrelere ændringer i den fækale mikrobiota sammensætning og struktur hos forsøgspersoner efter indtagelse af Aleurone-suppleret fødevarer sammenlignet med kontrolfødevarer (De Filippo et al., 2010). Kvantitativ PCR med arts- og gruppespecifikke primere vil blive anvendt til at bekræfte ændringer i mikrobielle populationer identificeret ud fra de pyrosekventerende metagenomiske data. Ved at bruge qPCR vil totale bifidobakterier, totale enterobakterier, totale bakterier og lactobaciller i alle fækale prøver blive opregnet. Dette vil være et minimum og vil fungere som uafhængig kvalitetskontrol for pyrosequencingen. Derudover og afhængigt af hvad der ses med hensyn til artsniveauændringer fra pyrosekventeringen, vil artsspecifikke primere blive anvendt til at bekræfte alle statistisk signifikante forskelle set ved sammenligning mellem Aleurone og kontrolfodringstidspunkter.

   Randomisering og blinding Deltagere, stratificeret efter køn, vil blive randomiseret til aleuronbehandling eller placebobehandling ved elektronisk genereret nummer leveret af statistikeren. Kliniske efterforskere og laboratoriepersonale vil blive blindet for randomisering.

   Undersøgelsesprodukter (brødmel, kiks, RTE-korn) vil blive leveret af Cargill på en blind måde, men markeret med enten E eller W for at differentiere behandlinger. Testprodukter vil blive pakket i lignende indpakninger og i daglige portioner. Placebo-fødevarer indeholder de samme ingredienser som de aktive fødevarer, undtagen med cellulose, der erstatter Aleurone og minder meget om sidstnævnte i størrelse, form og farve.

   Behandling Studiesupplementet vil blive introduceret i den daglige kost i henhold til deltagerens præference til i alt 27 g Aleurone/dag eller tilsvarende dosis placebo. En brødskive (35 g) indeholder 4,8 g Aleurone; en kiks (15 g) indeholder 4,5 g Aleurone; 36 g RTE-korn indeholder 9 g Aleurone. Placebo-fødevarer indeholder de samme ingredienser som de aktive fødevarer, undtagen med cellulose, der erstatter indholdet af Aleurone-fiber og minder meget om sidstnævnte i størrelse, form og farve. Undersøgelsesprodukterne (aktive eller placebo) leveres i produktpakker, der vil være mærket på det lokale sprog med undersøgelseskodenummeret, stedets kodenummer, producentens navn, patientnummer, undersøgelsesbesøgsnummeret, batchnummeret, opbevaringsinstruktioner , og udløbsdatoer. Produkter vil blive udleveret til deltagerne ved besøg T0.

   Undersøgelsens varighed og planlægning Efter en indkøringsfase på to uger vil deltagerne blive randomiseret til Aleurone-suppleret fødevaregruppe eller placebo-suppleret gruppe i 4 ugers diætintervention.

   Den samlede varighed af undersøgelsen, inklusive indkøring og behandling, vil være 6 uger. Emnerekruttering vil påbegyndes efter positiv vurdering af APSS forsknings- og etikkomité, og de første emner vil starte indkøringsperioden inden for to uger efter dette startpunkt. Forsøgspersonerne vil blive rekrutteret over en 6-måneders periode, og undersøgelsen vil blive afsluttet 8 måneder fra tidspunktet for første emnerekruttering.

   Afbrydelseskriterier Kriterier I overensstemmelse med Helsinki-erklæringen, ICH Good Clinical Practice Guidelines og United States Food and Drug Administration (FDA) regulativer, har en forsøgsperson ret til at trække sig fra undersøgelsen til enhver tid af en hvilken som helst grund uden at det berører hans /hendes fremtidige lægehjælp hos lægen eller på institutionen. Undersøgeren og sponsoren har også ret til at trække forsøgspersoner ud af undersøgelsen (se nedenfor). Derudover kan sponsoren vælge at afslutte undersøgelsen til enhver tid af en hvilken som helst årsag.

   Hvis en forsøgsperson (eller en forsøgspersons juridisk autoriserede repræsentant) beslutter at trække sig, vil der blive gjort alt for at færdiggøre og rapportere observationerne så grundigt som muligt. En fuldstændig slutevaluering bør foretages på tidspunktet for forsøgspersonens tilbagetrækning, årsagen til tilbagetrækningen bør registreres, og der bør forsøges at udføre en opfølgende evaluering.

   Forsøgspersoner kan blive fjernet fra undersøgelsen af ​​årsager, herunder følgende:

   • væsentlig protokolovertrædelse fra efterforskerens side
   • væsentlig manglende overholdelse fra fagets side
   • forsøgspersonens afvisning af at fortsætte behandlingen eller observationer
   • uacceptabel toksicitet
   • Efterforskerens beslutning om, at opsigelse er i forsøgspersonens bedste medicinske interesse
   • ikke-relateret medicinsk sygdom eller komplikation
   • graviditet
   • bevis for alkohol- eller stofmisbrug. Forsøgspersoner, der afbryder eller trækker sig fra undersøgelsen, vil ikke blive erstattet.

   Procedure for tidlig seponering

   Hvis en forsøgsperson afbryde før afslutningen af ​​undersøgelsen, vil årsagen til og datoen for afbrydelsen blive indhentet. Datoen for sidste dosis af undersøgelsesproduktet vil også blive oplyst. I tilfælde af tidlig seponering skal følgende procedurer udføres:

   • Kliniske tests (systolisk og diastolisk blodtryk, puls, højde og vægt til BMI-beregning samt talje- og hofteomkredse)
   • Blodtagning, afføring og urinopsamling
   • Et 1-uges spørgeskema til tilbagekaldelse af mad I tilfælde af at forsøgspersonen ikke kan vende tilbage til opfølgningsbesøget, bør webstedet forsøge at kontakte forsøgspersonen telefonisk for at følge eventuelle uønskede hændelser.

   Hvis en forsøgsperson trækker sit samtykke til at modtage undersøgelsesprodukt, vil de blive opfordret til at forblive i undersøgelsen uden at modtage behandling til indsamling af sikkerhedsdata.

   Ansvarlighedsprocedurer for undersøgelsesprodukt Undersøgelsesprodukterne (aktive eller placebo) vil blive leveret i produktpakker, der vil være mærket på det lokale sprog med undersøgelseskodenummeret, stedets kodenummer, producentens navn, produktkodenummeret, studiebesøgsnummeret , batchnummer, opbevaringsinstruktioner og udløbsdatoer. Produkter vil blive udleveret til deltagerne ved besøg T0. Brød vil blive frosset i portioner af 2 boller og kiks vil blive frosset i portioner af 2 kiks, der vil blive optøet hjemme af deltagerne inden indtagelse.

   Vedligeholdelse af randomiseringskode Randomiseringskoder for deltagere vil blive opbevaret i en forseglet kuvert på FEM. Produktkodeoplysninger vil blive opbevaret i en forseglet kuvert hos Cargill.

   Kildedatakontrol Alle data indsamlet i løbet af undersøgelsen vil blive indhentet fra primære kilder, der er blevet registreret i skriftlige og elektroniske dokumenter, såsom forsøgspersonens lægejournal. Resultaterne af kliniske undersøgelser, laboratoriefund og EKG-optagelser vil blive registreret i forsøgspersonens elektroniske medicinske fil. Ingen data vil blive indtastet direkte på sagsrapportformularen (CRF) uden at blive overført fra en anden tidligere kilde, såsom skriftlige eller elektroniske optegnelser.

   Udvælgelse og tilbagetrækning af emner Inklusionskriterier Mindst én af følgende betingelser: Alder 18-65 år; BMI >27 kg/m^2. Eksklusionskriterier Forsøgspersoner skal udelukkes fra deltagelse i undersøgelsen, hvis de opfylder et af følgende eksklusionskriterier: fastende blodsukker >300 mg/dl; triglycerider >500 mg/dl; ukontrolleret hypertension (BP >160/100 mm Hg under antihypertensiv terapi); kardiovaskulær sygdom (myokardieinfarkt, perkutan transluminal koronar angioplastik eller koronar arterie bypass-transplantation, ustabil angina pectoris, stoke, perifer arteriel sygdom); hypo- eller hyperthyroidisme; akutte inflammatoriske sygdomme; alvorlige gastrointestinale sygdomme; hjerte-, lever-, nyre- eller lungesvigt eller anden livstruende sygdom med prognose <5 år; kronisk brug af systemiske kortikosteroider, anti-koagulanter, antiinflammatoriske eller lipidsænkende og antidiabetiske lægemidler; behandling inden for de foregående 6 uger med enhver medicin, der vides at påvirke lipoproteinniveauer eller fækal mikrobiota (specifikt antibiotika); fødevareintolerancer; alkoholindtag >5 drikkevarer om dagen eller brug af narkotiske stoffer; brug af antioxidant vitamin- eller mineraltilskud; særlig diæt; graviditet, rygning.

   Samtidig lægemiddelterapi Enhver terapi, som forsøgspersonen modtager inden for en måned før starten af ​​undersøgelsen og/eller administreret under undersøgelsen, vil blive betragtet som samtidig terapi. En sådan behandling skal dokumenteres på den relevante CRF-side og i forsøgspersonernes journaler. Eventuelle ændringer i den samtidige behandling under undersøgelsen skal tydeligt registreres, og årsagen til ændringen skal dokumenteres.

   Brug af følgende medicin vil ikke være tilladt under undersøgelsen:

   Kortikosteroider, antikoagulanter, antiinflammatoriske, lipidsænkende og antidiabetika; enhver medicin, der vides at påvirke lipoproteinniveauer eller fækal mikrobiota (specifikt antibiotika), kosttilskud, probiotika, præbiotika eller urter, undtagen til håndtering af uønskede hændelser.

   Subject Compliance For at evaluere overensstemmelsen med tilskuddet vil phenoler i urinen blive målt i forsøgspersoner suppleret med Aleuron-rig mad på tidspunktet T0 og T1. Desuden vil alle ubrugte eller tomme pakker i slutningen af ​​hver uge, ledsaget af en selvregistrering af de brugte portioner, blive returneret til efterforskerne.

   Registrering og rapportering af uønskede hændelser Uønskede hændelser Bivirkninger, både opfordrede og uopfordrede, vil blive registreret under hele undersøgelsen og i 30 dage efter den sidste behandling med undersøgelsesprodukter.

   En uønsket hændelse (AE) er enhver fysisk eller klinisk ændring eller sygdom, som forsøgspersonen oplever på et hvilket som helst tidspunkt i løbet af undersøgelsen, uanset om det anses for at være relateret til brugen af ​​undersøgelsesproduktet. Dette omfatter opståen af ​​ny sygdom og forværring af allerede eksisterende tilstande. Unormale laboratorieværdier eller testresultater bør generelt ikke betragtes som bivirkninger, medmindre de inducerer kliniske tegn eller symptomer eller kræver terapeutisk intervention. Bivirkninger vil blive fulgt nøje, indtil de er løst.

   En ordret beskrivelse af hændelsen, dens forhold til undersøgelsesproduktet, og hvorvidt hændelsen også blev registreret som en alvorlig bivirkning (SAE), skal rapporteres på bivirknings-CRF for hver AE, der er registreret i forsøgspersonens diagram. Eventuelle bivirkninger, der opstår efter den første undersøgelsesprocedure og under hele undersøgelsesforløbet, gennem den afsluttende undersøgelsesprocedure, skal rapporteres, uanset om de anses for at være relateret til undersøgelsesproduktet eller ej. Hvert bidrag skal indeholde start- og slutdatoer og tidspunkter, alvor, alvor, forhold til undersøgelsesprodukt og handling/resultat. Alle AE'er skal registreres ved hjælp af terminologi som defineret af Medical Dictionary for Regulatory Activities (MedDRA), version 10.

   Statistiske analyser Planlagt optagelse og begrundelse Prøvestørrelse 34 blev bestemt til at detektere en ændring på 0,4 μmol/L total homocystein (tHcy) i plasma med en standardvariation på 0,5 μmol/L (taget fra Price et al., 2010) ved hjælp af Snedecor og Cochran-ligning med α på 0,05 og 1-β på 0,9 (Dell et al., 2002). Under hensyntagen til den tidligere undersøgelse med aleuron hos raske individer af Price et al., (2010), og behovet for at tage højde for frafald, foreslår vi at rekruttere 40 individer pr. behandlingsgruppe i denne undersøgelse.

   Basale karakteristika vil blive præsenteret for hver gruppe. Til sidst vil resterende forskelle mellem aktiv mad og placebogruppe efter randomisering blive overvejet til justering i multivariable modeller i alle yderligere analyser. Kontinuerlige variable vil blive udtrykt som middel +/- standardafvigelse eller medianer med interkvartile intervaller og som procent for kategoriske variable. Post-intervention data vil blive sammenlignet af ANOVA ved hjælp af den generelle lineære model med baseline som en kovariat. Data med en skæv fordeling vil blive logtransformeret før analyser. Simpel og multipel lineær regression vil blive brugt til at bestemme sammenhænge mellem variable og uafhængige t-test udført for at evaluere forskelle i rapporteret compliance mellem grupper. Resultater vil blive udtrykt som middel +/- SEM, og forskelle vil blive betragtet som signifikante ved P < 0,05.

   "Intention to treat"-princippet vil blive vedtaget til analysen af ​​de primære endepunkter: evalueringen af ​​effektiviteten tager hensyn til den indledende randomisering uafhængigt af overensstemmelsen med behandlingen af ​​forsøgspersonen.

   Hovedanalysen vil være baseret på sammenligningen af ​​forskellen i gennemsnitsniveauer ved afslutningen af ​​undersøgelsen hos forsøgspersoner suppleret med aktive fødevarer og forsøgspersoner, der fik placeboføde.

   Hovedanalysen vil være baseret på sammenligningen af ​​forskellen i gennemsnitsniveauer ved afslutningen af ​​undersøgelsen i forsøgspersoner suppleret med aktive fødevarer og i placebo-fødevarer suppleret.

   Forskellene over tid mellem behandlingsarme vil blive evalueret ved analysen af ​​Variansen for gentagne mål (GLM-procedure, SAS Institute Inc. SAS/STAT Brugervejledning, Version 9.1.3 Til Windows. Cary, NC: SAS Institute Inc. 1989).

   Signifikansniveauet vil være alfa=0,05 to-halede.

   Demografi og baseline karakteristika Demografi og baseline karakteristika inklusive men ikke begrænset til alder, køn, race, etnicitet, kropsvægt, højde og body mass index, blodtryk og kostvaner vil blive opstillet ved hjælp af beskrivende statistikker Baseline vurderinger Eventuelle unormale fund ved baseline elektrokardiogram vurdering, lægemiddelscreening eller virusscreening vil blive opsummeret beskrivende.

   Laboratorieværdier Laboratoriedata fra hver prøveudtagning og ændringer fra baseline vil blive opsummeret for hvert besøg med middelværdi, median, standardafvigelse, minimum og maksimum.

   DIREKTE ADGANG TIL KILDEDATA/DOKUMENTER Tilsynsmyndigheder kan ønske at udføre audit af kliniske forskningsaktiviteter for at evaluere overholdelse af GCP-principperne. En regulerende myndighed kan også ønske at foretage en inspektion (under undersøgelsen eller endda efter dens afslutning). Hvis der anmodes om en inspektion af en regulerende myndighed og/eller IRB, skal investigator straks informere sponsoren eller dennes udpegede. Efterforskeren skal acceptere at give de regulerende myndigheder adgang til undersøgelsesrelateret dokumentation. Efterforskeren vil give sponsoren mulighed for at hjælpe med at svare på eventuelle citater samt modtage kopier af alle dokumenter, der er givet til en inspektør/revisor.

   ETIK Institutional Review Board/Ethics Committee Før implementering af denne undersøgelse, vil protokollen og det informerede samtykke blive gennemgået af Comitato etico per le Sperimentazioni Cliniche c/o APSS di Trento. En underskrevet og dateret erklæring om, at protokollen og det informerede samtykke er blevet godkendt af Comitato etico per le Sperimentazioni Cliniche c/o APSS di Trento, skal være registreret på stedet før studiestart. En liste over medlemmerne af Comitato etico per le Sperimentazioni Cliniche c/o APSS di Trento skal også være registreret på webstedet. Eventuelle ændringer til protokollen, bortset fra administrative, skal godkendes af Comitato etico per le Sperimentazioni Cliniche c/o APSS di Trento.

   Informeret samtykke Formularer til informeret samtykke vil blive underskrevet.

   Afsløring og fortrolighed Ved at underskrive protokollen accepterer efterforskeren at holde alle oplysninger leveret af Cargill strengt fortrolige og anmode om lignende fortrolighed fra hans/hendes personale og IRB.

   Studiedokumenter leveret af Cargill (protokoller, efterforskerbrochurer og andet materiale) vil blive opbevaret korrekt for at sikre fortrolighed. De oplysninger, som Cargill har givet til efterforskeren, må ikke videregives til andre uden direkte skriftlig tilladelse fra Cargill, undtagen i det omfang det er nødvendigt for at opnå informeret samtykke fra forsøgspersoner, der ønsker at deltage i forsøget.

   DATAHÅNDTERING OG REGISTRERING Kildedata/dokumentation er defineret som det første sted, hvor data registreres. Alle kildedokumenter skal vedligeholdes og kunne hentes på webstedet. Undersøgeren skal vedligeholde kildedokumenter for hvert emne i undersøgelsen.

   Data indsamlet på CRF'er under forsøget vil blive dokumenteret på en anonym måde, og forsøgspersoner vil kun blive identificeret med emnenumre og initialer. Hvis det som en undtagelse er nødvendigt af sikkerhedsmæssige eller lovmæssige årsager at identificere forsøgspersonen, er Cargill og efterforskeren forpligtet til at holde disse oplysninger fortrolige.

   Alle data, der indtastes på CRF'erne, skal være læseligt registreret med sort blæk. Hvis en rettelse er nødvendig, skal den foretages ved at strege den forkerte indtastning igennem med en enkelt linje og indtaste den korrekte information ved siden af. Rettelsen skal paraferes og dateres af efterforskeren eller en udpeget kvalificeret person. Enhver anmodet information, der ikke er opnået som specificeret i protokollen, skal have en forklaring på udeladelsen noteret på CRF. En kopi af hvert fags CRF skal sammen med relaterede forespørgsler opbevares på undersøgelsesstedet.

   Alle oplysninger om CRF'er skal kunne spores til kildedokumenter, som generelt vedligeholdes i forsøgspersonens fil. Kildedokumenterne skal indeholde alle demografiske og medicinske oplysninger, herunder laboratoriedata, EKG'er osv., og også en kopi af den underskrevne informerede samtykkeformular, som skal angive undersøgelsens nummer og titel på forsøget.

   Væsentlige dokumenter, som angivet nedenfor, skal opbevares af investigator i en periode, der identificeres af Cargill i begyndelsen af ​​undersøgelsen. Cargill vil underrette efterforskeren/institutionen, når de undersøgelsesrelaterede optegnelser ikke længere er nødvendige. Efterforskeren indvilliger i at overholde procedurerne for opbevaring af dokumenter ved at underskrive protokollen. Væsentlige dokumenter omfatter, men er ikke begrænset til, protokoller, reklamemateriale, AE-rapporter, emnekilderegistreringer, IRB-korrespondance, samtykkeformularer, curriculum vitaes, overvågningsbesøgslogfiler, laboratoriejournaler, referenceintervaller, certificeringer, kvalitetskontroldokumentation og enhver anden relevante dokumenter.

   Enhver ændring eller tilføjelse til denne protokol kræver en skriftlig protokolændring, som skal godkendes af Cargill før implementering. Hvis der foretages væsentlige ændringer i designet af undersøgelsen, skal IRB underrettes, og om nødvendigt godkende ændringen før medtagelsen af ​​nye forsøgspersoner.

   Alle datahåndteringsprocedurer vil blive beskrevet i separate, specifikt identificerede filer, der tilsammen vil blive refereret til som Data Management Plan (DMP).