Messung der Auswirkungen einer Nahrungsergänzung mit ballaststoffreichem, antioxidativem Aleuron auf Biomarker von Herz-Kreislauf-Erkrankungen und Darmmikrobiota bei Erwachsenen mit hohem Body-Mass-Index

STUDIENZIELE Das allgemeine Ziel der Studie ist die Bewertung, ob eine Aleuron-reiche Nahrungsergänzung mit Weizen die kardiovaskulären und metabolischen Risikoprofile bei Personen mit erhöhtem metabolischen Risiko verändert.

Primäre Ziele der Studie sind die Bewertung, ob eine Aleuron-reiche Nahrungsergänzung mit Weizen Folgendes verändert:

1. Gesamthomocystein im Plasma (tHcy)
2. Plasmametaboliten im Zusammenhang mit dem Homocysteinstoffwechsel (einschließlich Betain, Dimethylglycin, Methionin, Cholin, Folsäure, Riboflavin, Vitamin B6);
3. sekundäre (aus Mikrobiota stammende) Polyphenol-Metabolite aus menschlichen Bioflüssigkeiten;
4. fäkale Gallensäure- und fäkale Sterolkonzentrationen.
5. fäkales Mikrobiota-Profil, wie es mit Illumina-Sequenzierung erstellt wurde

Sekundäre Ziele sind die Bewertung, ob eine Aleuron-reiche Nahrungsergänzung mit Weizen Folgendes verändert:

1. Plasma- und Urin-MS-basiertes Metaboliten-Profiling;
2. Gesamtcholesterin, Triglyceride, LDL- und HDL-Cholesterinspiegel;
3. Serumglukose- und -insulinspiegel;
4. anthropometrische Indizes;
5. Isoprostanspiegel im Urin;
6. Marker der intestinalen Permeabilität im Plasma;

7. C-reaktiver Proteinspiegel als Entzündungsmarker

   Überblick über das Studiendesign und Endpunkte Die Studie ist als placebokontrollierte, randomisierte, doppelblinde Parallelstudie mit 2 Testnahrungsmitteln, Aleuron-reichen Weizennahrungsmitteln oder Kontrollnahrungsmitteln (Placebo), angelegt. Die primären und sekundären Endpunkte sind im obigen Abschnitt STUDIENZIELE angegeben.

   Designübersicht Die Teilnehmer werden am U.O.S. di Dietetica e Nutrizione Clinica, St. Chiara, APSS Trento und Fondazione Edmund Mach. Die Teilnehmer werden über die Studienziele und -verfahren informiert und anhand von Einschluss-/Ausschlusskriterien vorgescreent. Wenn sie geeignet sind, unterzeichnen sie die Einverständniserklärung und nehmen an der Studie mit Besuch T-1 teil, der zwischen 8.00 und 9.00 Uhr in der Klinik durchgeführt wird, wo eine klinische und biochemische Bewertung des Gesundheitszustands durchgeführt wird. Wenn die Probanden nach allen Ausschlusskriterien immer noch für die Studie in Frage kommen, werden sie in die Studie aufgenommen und randomisiert, um bei Besuch T0, 2 Wochen später (Run-in-Phase), die aktive Ergänzung oder Placebo zu erhalten. Bei den Besuchen T-1 und T0 wird eine Ernährungsberatung durchgeführt. Den Teilnehmern wird empfohlen, sich an mediterrane Ernährungsgewohnheiten zu halten und sich in Maßen körperlich zu betätigen.

   Klinischer Besuch, klinische Tests und Blutentnahme werden nach einer nächtlichen Fastenzeit zu Beginn der Einlaufphase (Besuch T-1) durchgeführt. Klinische Tests, Blutabnahme, Stuhl- und Urinsammlung werden bei Besuch T0 (Woche 2) und T1 (Woche 6) durchgeführt. Vor den Besuchen T0 und T1 wird von den Studienteilnehmern ein viertägiges Ernährungstagebuch verteilt und an vier aufeinanderfolgenden Tagen ausgefüllt.

   Jeder Teilnehmer wird unterzogen:

   • Klinische und biochemische Bewertung zum Ausschluss eines möglichen Krankheitsstatus (T-1, Woche 0): Anamnestischer Fragebogen, EKG, Hämochrom, Kreatinin, Leberenzyme).
   • Blutentnahme (30 ml) für biochemische Analysen (T-1 -Woche 0-, T0 - Woche 2- und T1 - Woche 6-).
   • Stuhl- und 24-Stunden-Urinsammlung für biochemische Analysen (T0 – Woche 2 – und T1 – Woche 6 –).
   • Anthropometrische Auswertung: systolischer und diastolischer Blutdruck, Pulsfrequenz, Größe und Gewicht zur BMI-Berechnung sowie Taillen- und Hüftumfang (T-1 - Woche 0-, T0 - Woche 2- und T1 - Woche 6-).

   Alle Besuche werden in der Klinik zwischen 8.00 und 9.00 Uhr im Nüchternzustand durchgeführt. Jeder Besuch dauert etwa 1 Stunde. Die Teilnehmer werden gebeten, ihre derzeitige Ernährung nicht zu ändern, mit Ausnahme der Einführung von Nahrungsergänzungsmitteln als Ersatz für die entsprechenden Lebensmittel. Sie werden auch gebeten, Medikamente, Nahrungsergänzungsmittel und Integratoren zu vermeiden und den Monitoren jeden Krankheitsstatus oder Änderungen der Medikamentenverschreibung (neue oder aktuelle medikamentöse Therapie) unverzüglich mitzuteilen.

   Teilnehmerrekrutierung Die Teilnehmer werden bei der U.O.S. di Dietetica e Nutrizione Clinica, St. Chiara, APSS Trento und Fondazione Edmund Mach. Dazu gehören Mitarbeiter beider Institutionen und Mitglieder der Öffentlichkeit. Die Teilnehmer werden über die Studienziele und -verfahren informiert und anhand von Einschluss-/Ausschlusskriterien vorgescreent. Wenn sie geeignet sind, unterzeichnen sie die Einverständniserklärung und nehmen an der Studie mit Besuch T-1 teil, bei dem eine klinische und biochemische Bewertung des Gesundheitszustands durchgeführt wird. Wenn die Probanden gemäß allen Einschluss-/Ausschlusskriterien weiterhin für die Studie in Frage kommen, werden sie in die Studie aufgenommen und randomisiert, um bei Besuch T0 zwei Wochen später (Run-in-Phase) die aktive Ergänzung oder Placebo zu erhalten.

   Nahrungsergänzung Nach einer zweiwöchigen Einlaufphase werden die Teilnehmer randomisiert und erhalten vier Wochen lang doppelblind eine Nahrungsergänzung mit Aleurone-reichem Weizen oder Placebo-Lebensmitteln.

   Ernährungsberatung Ernährungsberatung wird bei den Besuchen T-1 und T0 durchgeführt. Den Teilnehmern wird empfohlen, sich an mediterrane Ernährungsgewohnheiten zu halten und sich in Maßen körperlich zu betätigen.

   Nachsorge Die Intervention umfasst eine vierwöchige Behandlungsperiode. Der klinische Besuch, die klinischen Tests und die Blutabnahme werden nach einer nächtlichen Fastenzeit bei Besuch T-1 – Woche 0 – durchgeführt. Klinische Tests, Blutentnahmen sowie Stuhl- und Urinsammlungen werden bei Besuch T0 und T1 durchgeführt (T0 am Tag vor der Supplementierung, T1 ist Woche 4 nach der Behandlung entweder mit Aleuron-ergänzten Lebensmitteln oder mit Placebo-ergänzten Lebensmitteln). Bei Besuch T-1 wird ein einjähriger Fragebogen zur Rückrufhäufigkeit von Lebensmitteln verabreicht. Vor den Besuchen T0 und T1 wird ein einwöchiger Fragebogen zur Rückrufhäufigkeit durchgeführt.

   Klinische Bewertung Elektrokardiogramm. Beim Screening wird ein 12-Kanal-EKG durchgeführt. Elektrokardiographen werden von U.O.S. überprüft und interpretiert. di Dietetica e Nutrizione Clinica, St. Chiara, APSS Trento.

   Der arterielle Blutdruck (BP) wird gemäß den Richtlinien für Bluthochdruck von ISH/WHO 2004 gemessen. Zum Einsatz kommt das „Oszillometrische Blutdruckmessgerät OMRON HEM705CP“. Die Probanden werden 10 Minuten lang ruhen und sitzen gelassen, bevor der Blutdruck am rechten Arm gemessen wird; Die erste Maßnahme wird ausgetragen; der zweite und der dritte Takt folgen dem ersten um jeweils 2 Minuten, auf einem entspannten und nackten Arm und mit dem Armwinkel auf der gleichen Höhe des Herzens. Der Mittelwert der letzten beiden Maße wird für die Analyse verwendet.

   Gewicht und Größe werden auf einer Standardskala gemessen, mit einem angebrachten Höhenmesser für die Größenmessung und werden, falls erforderlich, entsprechend den nächsten 100 g bzw. 1 cm aufgezeichnet. Die Messungen werden an Probanden ohne Schuhe, Mäntel oder schwere Kleidung durchgeführt. Der BMI wird in kg/m2 berechnet.

   Der Umfang der Taille (Nabelschnur) wird gemäß den National Institutes of Health, National Heart, Lung, and Blood Institute gemessen. Klinische Leitlinien zur Erkennung, Bewertung und Behandlung von Übergewicht und Adipositas bei Erwachsenen; der Beweisbericht. In der Praxis wird bei aufrecht stehendem Probanden mit entspanntem Bauch, den Armen an den Seiten und den Füßen zusammengelegt, der Taillenumfang auf 0,1 cm genau auf einer Höhe in der Mitte zwischen dem unteren Rippenrand und dem Beckenkamm gemessen Klebeband rund um den Körper in horizontaler Position. Der Hüftumfang wird auf bitrochanterischer Ebene gemessen. Das Verhältnis von Taillen- zu Hüftumfang (WHR) wird berechnet.

   Fragebögen. Alle Informationen werden gesammelt und in validierten Fragebögen aufgezeichnet, einschließlich Personenidentifikation, Krankengeschichte und Informationen zu Risikofaktoren für Herz-Kreislauf-Erkrankungen, Drogenkonsum, körperliche Aktivität und Ernährungsgewohnheiten. Außerdem wird ein dreitägiges Ernährungstagebuch geführt.

   Blutentnahme und Urinsammlung Blut (≤ 30 ml) wird aus einer antekubitalen Vene mit minimaler Stase zwischen 8.00 und 9.00 Uhr nach 12-stündigem Fasten von Probanden entnommen, die mindestens 6 Stunden lang nicht geraucht haben. 24-Stunden-Urinsammlungen werden von jedem Teilnehmer erhalten. Das Urinvolumen wird gemessen und 5 Aliquots von 5 ml werden bei –80°C gelagert.

   Entnahme von Kotproben Kotproben werden innerhalb von 2 Stunden nach der Probenentnahme verarbeitet. Kurz gesagt, 1-g-Aliquots von Fäkalien werden später mit RNA gemischt und bei –80°C für spätere DNA gelagert. Kotproben werden auch direkt bei -80 °C für die Metabolitenanalyse eingefroren.

   Labortests (U.O.S. di Dietetica e Nutrizione Clinica, St. Chiara, APSS Trento) Blutproben werden gemäß den Anforderungen der durchzuführenden Tests unmittelbar nach der Blutentnahme zentrifugiert. Plasma oder Serum werden abgetrennt, teilweise sofort getestet und die verbleibende Fraktion bei -80°C gelagert.

   Cholesterin, Triglyceride, HDL-Cholesterin und Glukose werden durch chromogene Assays bewertet. LDL-Cholesterin wird nach der Friedewald-Formel berechnet.

   Die Insulinspiegel werden durch ELISA bewertet. Die Anzahl der Blutkörperchen wird durch Standardtests bewertet. C-RP wird durch nephelometrische Assays gemessen; F2-Isoprostane werden im Urin als Maß für oxidativen Stress mit einem spezifischen EIA-Kit (Cayman Chemicals, Ann Arbor, Michigan, USA) nach Reinigung durch Festphasenchromatographie (SepPack-Säulen) gemessen.

   Labortests (Fondazione Edmund Mach [FEM]) Plasma-LPS, LPS-spezifisches IgG, CD14, LPS-bindendes Protein und 8-Isorpostan im Urin werden spektrophotometrisch unter Verwendung eines kommerziellen ELISA-Kits gemessen.

   Urin- und Plasma-Metaboliten-Profiling (FEM). Urin- und Blutproben (Plasma und Serum) werden sowohl der gezielten Metabolomik (UPLC-MS/MS für nichtflüchtige Verbindungen und GC-MS/MS für flüchtige Verbindungen) als auch der ungezielten Metabolomik (ULPC-Q-TOF-MS und Nano -FTMS-Q-TOF für nicht flüchtige und GC-TOF für flüchtige Verbindungen) (Vanza et al., 2001 2012). Für die gezielte Metabolitenprofilierung von Plasma wird das MS-basierte Biocrates AbsoluteIDQ® p180 Kit verwendet, das genaue quantitative Daten zu 180 menschlichen Metaboliten im Zusammenhang mit dem Risiko einer Diabeteserkrankung generiert. Außerdem wird eine spezifische gezielte Analyse für die Quantifizierung von Serumlipidprofilen, Gallensäuren, SCFA und mikrobiellen Polyphenolmetaboliten in Bioflüssigkeiten (einschließlich Fäkalien) unter Verwendung von UPLC/QqQ-MS/MS (Vrhovsek et al., 2012) angewendet.

   Analyse der fäkalen Mikrobiota (FEM). Veränderungen der Fäkalmikrobiologie werden unter Verwendung von 454 Pyrosequenzierungs-Metagenomik bewertet. Kurz gesagt, nach der Lieferung von Stuhlproben wird metagenomische DNA mit dem FastDNA SPIN Kit für FECES von MPbio.com extrahiert. Unter Verwendung universeller bakterieller Primer wird die V1-V3-Region einschließlich des 16S-rRNA-Gens, das in der fäkalen metagenomischen DNA vorhanden ist, amplifiziert und einer 454-Pyrosequenzierung unterzogen. Multiplex Identifier (MID) Adapter werden für das GS FLX Titanium Chemistry – Extended MID Set verwendet, um Sequenzen mit einer Länge von etwa 600 bp zu erhalten, die unter Verwendung der QIIME-Pipeline (http://qiime.org / ), die eine gute Identifizierung der menschlichen Darmmikrobiota auf Artebene ermöglicht. Insgesamt werden 20.000 nutzbare Sequenzen pro Stuhlprobe angestrebt. Nach der Qualitätskontrolle und mikrobiellen ökologischen Analyse werden multivariate Statistiken eingesetzt, um Veränderungen in der Zusammensetzung und Struktur der fäkalen Mikrobiota bei Probanden nach dem Verzehr von mit Aleuron ergänzten Lebensmitteln im Vergleich zu den Kontrollnahrungsmitteln zu korrelieren (De Filippo et al., 2010). Quantitative PCR mit art- und gruppenspezifischen Primern wird eingesetzt, um Veränderungen in mikrobiellen Populationen zu bestätigen, die aus den metagenomischen Daten der Pyrosequenzierung identifiziert wurden. Mittels qPCR werden die gesamten Bifidobakterien, die gesamten Enterobakterien, die gesamten Bakterien und Laktobazillen in allen Stuhlproben gezählt. Dies ist ein Minimum und dient als unabhängige Qualitätskontrolle für die Pyrosequenzierung. Zusätzlich und abhängig davon, was in Bezug auf Änderungen auf Artenebene aus der Pyrosequenzierung ersichtlich ist, werden artspezifische Primer verwendet, um alle statistisch signifikanten Unterschiede zu bestätigen, die beim Vergleich zwischen Aleurone- und Kontrollfütterungszeitpunkten festgestellt werden.

   Randomisierung und Verblindung Die nach Geschlecht stratifizierten Teilnehmer werden anhand einer vom Statistiker bereitgestellten elektronisch generierten Nummer randomisiert einer Aleuronbehandlung oder einer Placebobehandlung zugeteilt. Klinische Forscher und Laborpersonal werden bezüglich der Randomisierung verblindet.

   Studienprodukte (Brotmehl, Kekse, RTE-Cerealien) werden von Cargill verblindet geliefert, aber entweder mit E oder W gekennzeichnet, um Behandlungen zu unterscheiden. Testprodukte werden in ähnlichen Verpackungen und in Tagesportionen verpackt. Placebo-Lebensmittel enthalten die gleichen Inhaltsstoffe wie die aktiven Lebensmittel, mit Ausnahme von Zellulose, die Aleuron ersetzt, und sind letzterem in Größe, Form und Farbe sehr ähnlich.

   Behandlung Die Studienergänzung wird je nach Präferenz des Teilnehmers in die tägliche Ernährung bis zu einer Gesamtmenge von 27 g Aleurone/Tag oder einer äquivalenten Placebo-Dosis eingeführt. Eine Brotscheibe (35 g) enthält 4,8 g Aleurone; ein Keks (15 g) enthält 4,5 g Aleurone; 36 g RTE-Cerealien enthalten 9 g Aleurone. Placebo-Lebensmittel enthalten die gleichen Inhaltsstoffe wie die aktiven Lebensmittel, außer dass Zellulose den Aleuron-Fasergehalt ersetzt, und sind letzterem in Größe, Form und Farbe sehr ähnlich. Die Studienprodukte (aktiv oder Placebo) werden in Produktverpackungen bereitgestellt, die in der Landessprache mit der Studiencodenummer, Standortcodenummer, Name des Herstellers, Patientennummer, Nummer des Studienbesuchs, Chargennummer und Aufbewahrungshinweisen gekennzeichnet sind , und Ablaufdaten. Die Produkte werden an die Teilnehmer beim Besuch T0 ausgegeben.

   Studiendauer und Planung Nach einer zweiwöchigen Einlaufphase werden die Teilnehmer für eine 4-wöchige diätetische Intervention randomisiert der Aleurone-ergänzten Nahrungsmittelgruppe oder der Placebo-ergänzten Gruppe zugeteilt.

   Die Gesamtdauer der Studie einschließlich Anlaufphase und Behandlung beträgt 6 Wochen. Die Probandenrekrutierung beginnt nach positiver Bewertung durch die APSS-Forschungs- und Ethikkommission, und die ersten Probanden beginnen die Einlaufphase innerhalb von zwei Wochen nach diesem Startpunkt. Die Probanden werden über einen Zeitraum von 6 Monaten rekrutiert und die Studie wird 8 Monate nach der Rekrutierung des ersten Probanden abgeschlossen sein.

   Abbruchkriterien Kriterien In Übereinstimmung mit der Deklaration von Helsinki, den ICH-Leitlinien für gute klinische Praxis und den Vorschriften der US-amerikanischen Food and Drug Administration (FDA) hat ein Proband das Recht, die Studie jederzeit aus beliebigem Grund unbeschadet seines Anspruchs abzubrechen /ihre künftige medizinische Versorgung durch den Arzt oder in der Einrichtung. Der Prüfarzt und der Sponsor haben auch das Recht, Probanden von der Studie zurückzuziehen (siehe unten). Darüber hinaus kann der Sponsor die Studie jederzeit aus beliebigem Grund beenden.

   Sollte sich ein Proband (oder ein gesetzlich bevollmächtigter Vertreter) zum Rücktritt entschließen, werden alle Anstrengungen unternommen, um die Beobachtungen so vollständig wie möglich zu vervollständigen und zu melden. Zum Zeitpunkt des Ausscheidens des Probanden sollte eine vollständige Schlussevaluation erfolgen, der Grund des Ausscheidens festgehalten und eine Nachevaluation angestrebt werden.

   Probanden können aus folgenden Gründen aus der Studie entfernt werden:

   • erheblicher Protokollverstoß seitens des Ermittlers
   • erhebliche Nichteinhaltung seitens des Subjekts
   • Weigerung des Subjekts, die Behandlung oder Beobachtung fortzusetzen
   • inakzeptable Toxizität
   • Entscheidung des Ermittlers, dass der Abbruch im besten medizinischen Interesse des Patienten liegt
   • unabhängiger medizinischer Erkrankung oder Komplikation
   • Schwangerschaft
   • Hinweise auf Alkohol- oder Drogenmissbrauch Probanden, die die Studie abbrechen oder aus der Studie ausscheiden, werden nicht ersetzt.

   Verfahren zur vorzeitigen Beendigung

   Sollte ein Proband vor Abschluss der Studie abbrechen, werden der Grund und das Datum des Abbruchs eingeholt. Das Datum der letzten Dosis des Studienprodukts wird ebenfalls ermittelt. Im Falle eines vorzeitigen Abbruchs sollten die folgenden Verfahren durchgeführt werden:

   • Klinische Tests (systolischer und diastolischer Blutdruck, Pulsfrequenz, Größe und Gewicht zur BMI-Berechnung sowie Taillen- und Hüftumfang),
   • Blutabnahme, Stuhl- und Urinabnahme
   • Ein 1-wöchiger Fragebogen zur Lebensmittelrückrufaktion Für den Fall, dass der Proband zum Nachsorgebesuch nicht zurückkehren kann, sollte der Standort versuchen, den Probanden telefonisch zu kontaktieren, um etwaige unerwünschte Ereignisse zu verfolgen.

   Wenn ein Proband sein Einverständnis zum Erhalt des Studienprodukts widerruft, wird er ermutigt, in der Studie zu bleiben, ohne eine Behandlung für die Erhebung von Sicherheitsdaten zu erhalten.

   Verfahren zur Rechenschaftspflicht für Studienprodukte Die Studienprodukte (aktiv oder Placebo) werden in Produktpaketen bereitgestellt, die in der jeweiligen Landessprache mit der Studiencodenummer, der Standortcodenummer, dem Namen des Herstellers, der Produktcodenummer und der Nummer des Studienbesuchs gekennzeichnet sind , Chargennummer, Aufbewahrungshinweise und Ablaufdaten. Die Produkte werden an die Teilnehmer beim Besuch T0 ausgegeben. Brot wird in Portionen von 2 Brötchen eingefroren und Kekse werden in Portionen von 2 Keksen eingefroren, die von den Teilnehmern vor dem Verzehr zu Hause aufgetaut werden.

   Verwaltung des Randomisierungscodes Randomisierungscodes für Teilnehmer werden in einem verschlossenen Umschlag bei FEM aufbewahrt. Produktcodeinformationen werden bei Cargill in einem versiegelten Umschlag aufbewahrt.

   Quellendatenkontrolle Alle im Laufe der Studie gesammelten Daten stammen aus Primärquellen, die in schriftlichen und elektronischen Dokumenten wie der Krankenakte des Probanden aufgezeichnet wurden. Die Ergebnisse klinischer Untersuchungen, Laborbefunde und EKG-Aufzeichnungen werden in der elektronischen Krankenakte des Probanden aufgezeichnet. Es werden keine Daten direkt in das Fallberichtsformular (CRF) eingegeben, ohne aus einer anderen früheren Quelle wie schriftlichen oder elektronischen Aufzeichnungen übertragen zu werden.

   Auswahl und Rücknahme von Fächern Einschlusskriterien Mindestens eine der folgenden Bedingungen: Alter 18-65 Jahre; BMI >27 kg/m^2. Ausschlusskriterien Probanden sind von der Studienteilnahme auszuschließen, wenn sie eines der folgenden Ausschlusskriterien erfüllen: Nüchtern-Blutzucker > 300 mg/dl; Triglyceride >500 mg/dl; unkontrollierter Bluthochdruck (BD > 160/100 mmHg unter antihypertensiver Therapie); kardiovaskuläre Erkrankung (Myokardinfarkt, perkutane transluminale koronare Angioplastie oder Koronararterien-Bypasstransplantation, instabile Angina pectoris, Schlaganfall, periphere arterielle Erkrankung); Hypo- oder Hyperthyreose; akute entzündliche Erkrankungen; schwere Magen-Darm-Erkrankungen; Herz-, Leber-, Nieren- oder Lungenversagen oder andere lebensbedrohliche Erkrankungen mit Prognose < 5 Jahre; chronischer Gebrauch von systemischen Kortikosteroiden, Antikoagulantien, entzündungshemmenden oder lipidsenkenden und Antidiabetika; Behandlung innerhalb der letzten 6 Wochen mit Medikamenten, von denen bekannt ist, dass sie den Lipoproteinspiegel oder die fäkale Mikrobiota beeinflussen (insbesondere Antibiotika); Nahrungsmittelunverträglichkeiten; Alkoholkonsum >5 Getränke pro Tag oder Konsum von Betäubungsmitteln; Verwendung von antioxidativen Vitamin- oder Mineralergänzungen; spezielle Diät; schwangerschaft, rauchen.

   Begleitende medikamentöse Therapie Jede Therapie, die der Proband innerhalb eines Monats vor Beginn der Studie erhält und/oder während der Studie verabreicht wird, gilt als Begleittherapie. Eine solche Behandlung muss auf der entsprechenden CNI-Seite und in den Krankenakten der Probanden dokumentiert werden. Jegliche Änderungen der Begleittherapie während der Studie sind nachvollziehbar zu protokollieren und der Grund für die Änderung zu dokumentieren.

   Die Verwendung der folgenden Medikamente ist während der Studie nicht erlaubt:

   Kortikosteroide, Antikoagulanzien, entzündungshemmende, lipidsenkende und Antidiabetika; alle Medikamente, von denen bekannt ist, dass sie den Lipoproteinspiegel oder die fäkale Mikrobiota beeinflussen (insbesondere Antibiotika), Nahrungsergänzungsmittel, Probiotika, Präbiotika oder Kräuter, mit Ausnahme der Behandlung unerwünschter Ereignisse.

   Compliance der Probanden Um die Compliance mit der Supplementierung zu bewerten, werden Urinphenole bei Probanden gemessen, die zum Zeitpunkt T0 und T1 mit Aleuron-reicher Nahrung ergänzt wurden. Darüber hinaus werden alle unbenutzten oder leeren Packungen am Ende jeder Woche zusammen mit einem Selbstprotokoll der verbrauchten Portionen an die Prüfer zurückgegeben.

   Aufzeichnung und Berichterstattung von unerwünschten Ereignissen.

   Ein unerwünschtes Ereignis (AE) ist jede körperliche oder klinische Veränderung oder Krankheit, die der Proband zu irgendeinem Zeitpunkt im Verlauf der Studie erfährt, unabhängig davon, ob sie als mit der Verwendung des Studienprodukts zusammenhängend angesehen wird oder nicht. Dazu gehören der Beginn einer neuen Krankheit und die Verschlimmerung von Vorerkrankungen. Abnormale Laborwerte oder Testergebnisse sollten im Allgemeinen nicht als UE angesehen werden, es sei denn, sie führen zu klinischen Anzeichen oder Symptomen oder erfordern eine therapeutische Intervention. Unerwünschte Ereignisse werden sorgfältig verfolgt, bis sie behoben sind.

   Eine wörtliche Beschreibung des Ereignisses, seines Zusammenhangs mit dem Studienprodukt und ob das Ereignis auch als schwerwiegendes unerwünschtes Ereignis (SAE) aufgezeichnet wurde oder nicht, muss auf dem CRF für unerwünschte Ereignisse für jedes in der Akte des Probanden aufgezeichnete AE angegeben werden. Alle UE, die nach dem ersten Studienverfahren und während des gesamten Verlaufs der Studie bis zum abschließenden Studienverfahren auftreten, sollten gemeldet werden, unabhängig davon, ob sie als mit dem Studienprodukt zusammenhängend angesehen werden oder nicht. Jeder Eintrag muss Datum und Uhrzeit des Beginns und des Endes, Ernsthaftigkeit, Schweregrad, Beziehung zum Studienprodukt und Maßnahme/Ergebnis enthalten. Alle UE sollten unter Verwendung der im Medical Dictionary for Regulatory Activities (MedDRA), Version 10, definierten Terminologie aufgezeichnet werden.

   Statistische Analysen Geplante Aufnahme und Begründung Die Stichprobengröße 34 wurde bestimmt, um eine Veränderung von 0,4 μmol/L Gesamt-Homocystein (tHcy) im Plasma mit einer Standardabweichung von 0,5 μmol/L (entnommen aus Price et al., 2010) unter Verwendung des Snedecor nachzuweisen und Cochran-Gleichung mit α von 0,05 und 1-β von 0,9 (Dell et al., 2002). Unter Berücksichtigung der früheren Studie mit Aleuron an gesunden Personen von Price et al., (2010) und der Notwendigkeit, Drop-Outs zu berücksichtigen, schlagen wir vor, in der vorliegenden Studie 40 Personen pro Behandlungsgruppe zu rekrutieren.

   Grundeigenschaften werden für jede Gruppe präsentiert. Eventuell verbleibende Unterschiede zwischen aktiver Nahrungs- und Placebogruppe nach der Randomisierung werden in allen weiteren Analysen zur Anpassung in multivariablen Modellen berücksichtigt. Kontinuierliche Variablen werden als Mittelwerte +/- Standardabweichung oder Mediane mit Intervallen zwischen den Quartilen und als Prozentsatz für kategoriale Variablen ausgedrückt. Die Daten nach der Intervention werden durch ANOVA unter Verwendung des allgemeinen linearen Modells mit der Grundlinie als Kovariate verglichen. Daten mit einer schiefen Verteilung werden vor der Analyse log-transformiert. Einfache und multiple lineare Regression werden verwendet, um Beziehungen zwischen Variablen zu bestimmen, und unabhängige t-Tests werden durchgeführt, um Unterschiede in der berichteten Compliance zwischen Gruppen zu bewerten. Die Ergebnisse werden als Mittelwert +/- SEM ausgedrückt und Unterschiede gelten als signifikant bei P < 0,05.

   Für die Analyse der primären Endpunkte wird das „Intention-to-treat“-Prinzip angewendet: Die Bewertung der Wirksamkeit berücksichtigt die anfängliche Randomisierung unabhängig von der Compliance der Behandlung des Patienten.

   Die Hauptanalyse basiert auf dem Vergleich der Differenz der mittleren Werte am Ende der Studie bei Probanden, die mit aktiven Nahrungsmitteln ergänzt wurden, und Probanden, denen Placebo-Nahrungsmittel verabreicht wurden.

   Die Hauptanalyse basiert auf dem Vergleich der Differenz der mittleren Werte am Ende der Studie bei Probanden, die mit aktiven Nahrungsmitteln ergänzt wurden, und bei mit Placebo ergänzten Nahrungsmitteln.

   Die zeitlichen Unterschiede zwischen den Behandlungsarmen werden durch die Analyse der Varianz für wiederholte Messungen bewertet (GLM-Verfahren, SAS Institute Inc. SAS/STAT-Benutzerhandbuch, Version 9.1.3 für Windows. Cary, NC: SAS Institute Inc. 1989).

   Das Signifikanzniveau beträgt alpha=0,05 zweischwänzig.

   Demografische und grundlegende Merkmale Demografische und grundlegende Merkmale, einschließlich, aber nicht beschränkt auf Alter, Geschlecht, Rasse, ethnische Zugehörigkeit, Körpergewicht, Größe und Body-Mass-Index, Blutdruck und Ernährungsgewohnheiten, werden anhand deskriptiver Statistiken tabelliert Assessment, Drug Screen oder Virus Screen werden beschreibend zusammengefasst.

   Laborwerte Labordaten von jeder Probenahme und Änderungen gegenüber dem Ausgangswert werden für jeden Besuch als Mittelwert, Median, Standardabweichung, Minimum und Maximum zusammengefasst.

   DIREKTER ZUGANG ZU QUELLDATEN/DOKUMENTEN Regulierungsbehörden möchten möglicherweise Audits klinischer Forschungsaktivitäten durchführen, um die Einhaltung der GCP-Grundsätze zu bewerten. Eine Aufsichtsbehörde kann auch eine Inspektion (während der Studie oder sogar nach ihrem Abschluss) durchführen wollen. Wenn eine Inspektion von einer Aufsichtsbehörde und/oder dem IRB angefordert wird, muss der Prüfarzt den Sponsor oder seinen Beauftragten unverzüglich informieren. Der Prüfarzt muss zustimmen, den Aufsichtsbehörden Zugang zu studienbezogener Dokumentation zu gewähren. Der Ermittler gestattet dem Sponsor, bei der Beantwortung von Zitaten behilflich zu sein und Kopien aller Dokumente zu erhalten, die einem Inspektor/Auditor zur Verfügung gestellt werden.

   ETHIK Institutional Review Board/Ethics Committee Vor der Durchführung dieser Studie werden das Protokoll und die Einverständniserklärung vom Comitato etico per le Sperimentazioni Cliniche c/o APSS di Trento überprüft. Eine unterschriebene und datierte Erklärung, dass das Protokoll und die Einverständniserklärung vom Comitato etico per le Sperimentazioni Cliniche c/o APSS di Trento genehmigt wurden, muss vor Beginn der Studie am Standort hinterlegt sein. Eine Liste der Mitglieder des Comitato etico per le Sperimentazioni Cliniche c/o APSS di Trento muss ebenfalls am Standort hinterlegt sein. Alle Änderungen des Protokolls, mit Ausnahme der administrativen, müssen vom Comitato etico per le Sperimentazioni Cliniche c/o APSS di Trento genehmigt werden.

   Einverständniserklärung Formulare zur Einverständniserklärung werden unterzeichnet.

   Offenlegung und Vertraulichkeit Durch die Unterzeichnung des Protokolls verpflichtet sich der Ermittler, alle von Cargill bereitgestellten Informationen streng vertraulich zu behandeln und eine ähnliche Vertraulichkeit von seinen/ihren Mitarbeitern und dem IRB zu verlangen.

   Von Cargill bereitgestellte Studienunterlagen (Protokolle, Prüfarztbroschüren und andere Materialien) werden angemessen aufbewahrt, um die Vertraulichkeit zu gewährleisten. Die dem Prüfarzt von Cargill bereitgestellten Informationen dürfen ohne direkte schriftliche Genehmigung von Cargill nicht an Dritte weitergegeben werden, es sei denn, dies ist erforderlich, um eine informierte Zustimmung von Probanden einzuholen, die an der Studie teilnehmen möchten.

   DATENHANDHABUNG UND AUFZEICHNUNG Quelldaten/Dokumentation ist definiert als der erste Ort, an dem Daten aufgezeichnet werden. Sämtliche Quelldokumente müssen gepflegt und vor Ort abrufbar sein. Der Prüfarzt muss Quelldokumente für jedes Subjekt in der Studie aufbewahren.

   Die während der Studie zu CNI gesammelten Daten werden auf anonyme Weise dokumentiert, und die Probanden werden nur durch Probandennummern und Initialen identifiziert. Wenn es aus Sicherheits- oder regulatorischen Gründen ausnahmsweise erforderlich ist, die betroffene Person zu identifizieren, sind Cargill und der Ermittler verpflichtet, diese Informationen vertraulich zu behandeln.

   Alle auf den CRFs eingegebenen Daten müssen leserlich in schwarzer Tinte aufgezeichnet werden. Wenn eine Berichtigung erforderlich ist, sollte diese vorgenommen werden, indem die fehlerhafte Eingabe mit einem Strich durchgestrichen und die korrekten Informationen daneben eingetragen werden. Die Korrektur muss vom Ermittler oder einer benannten qualifizierten Person abgezeichnet und datiert werden. Alle angeforderten Informationen, die nicht wie im Protokoll angegeben erhalten werden, sollten eine Erklärung für die auf dem CRF vermerkte Auslassung enthalten. Eine Kopie des CRF jedes Probanden muss zusammen mit den zugehörigen Abfragen am Studienort aufbewahrt werden.

   Alle Informationen zu CRFs müssen auf Quelldokumente zurückführbar sein, die im Allgemeinen in der Akte des Probanden aufbewahrt werden. Die Quelldokumente sollten alle demografischen und medizinischen Informationen enthalten, einschließlich Labordaten, EKGs usw., sowie eine Kopie der unterschriebenen Einverständniserklärung, die die Studiennummer und den Titel der Studie enthalten sollte.

   Wesentliche Dokumente, wie unten aufgeführt, müssen vom Prüfarzt für einen von Cargill zu Beginn der Studie festgelegten Zeitraum aufbewahrt werden. Cargill wird den Prüfarzt/die Einrichtung benachrichtigen, wenn die studienbezogenen Aufzeichnungen nicht mehr benötigt werden. Der Ermittler stimmt zu, sich an die Verfahren zur Aufbewahrung von Dokumenten zu halten, indem er das Protokoll unterzeichnet. Zu den wesentlichen Dokumenten gehören unter anderem Protokolle, Werbematerialien, AE-Berichte, Quellenaufzeichnungen von Personen, IRB-Korrespondenz, Einverständniserklärungen, Lebensläufe, Überwachungsbesuchsprotokolle, Laboraufzeichnungen, Referenzbereiche, Zertifizierungen, Qualitätskontrolldokumentation und andere dazugehörige Dokumente.

   Jede Änderung oder Ergänzung dieses Protokolls erfordert eine schriftliche Protokollergänzung, die vor der Umsetzung von Cargill genehmigt werden muss. Wenn wesentliche Änderungen am Design der Studie vorgenommen werden, muss das IRB benachrichtigt werden und die Änderung gegebenenfalls genehmigen, bevor neue Probanden aufgenommen werden.

   Alle Datenverwaltungsverfahren werden in separaten, speziell gekennzeichneten Dateien detailliert beschrieben, die gemeinsam als Datenverwaltungsplan (DMP) bezeichnet werden.