Medindo o impacto da suplementação dietética com um alto teor de fibra, alto antioxidante aleurona em biomarcadores de doença cardiovascular e microbiota intestinal em adultos com alto índice de massa corporal

OBJETIVOS DO ESTUDO O objetivo geral do estudo é avaliar se a suplementação alimentar rica em aleurona de trigo modifica os perfis de risco cardiovascular e metabólico em indivíduos com risco metabólico aumentado.

Os objetivos primários do estudo são avaliar se a suplementação alimentar rica em aleurona de trigo modifica:

1. homocisteína plasmática total (tHcy)
2. metabólitos plasmáticos relacionados ao metabolismo da homocisteína (incluindo betaína, dimetilglicina, metionina, colina, folato, riboflavina, vitamina B6);
3. metabólitos de polifenóis secundários (derivados da microbiota) de biofluidos humanos;
4. concentrações fecais de ácidos biliares e esteróis fecais.
5. perfil da microbiota fecal gerado usando o sequenciamento Illumina

Os objetivos secundários são avaliar se a suplementação alimentar rica em aleurona de trigo modifica:

1. perfil de metabólito baseado em plasma e urina MS;
2. colesterol total, triglicerídeos, níveis de colesterol LDL e HDL;
3. níveis séricos de glicose e insulina;
4. índices antropométricos;
5. níveis urinários de isoprostano;
6. marcadores de permeabilidade intestinal no plasma;

7. Níveis de proteína C-reativa como marcador de inflamação

   Visão geral do desenho do estudo e pontos finais O estudo é configurado como um ensaio paralelo duplo-cego, randomizado, controlado por placebo com 2 alimentos de teste, alimentos ricos em aleurona de trigo ou alimentos de controle (placebo). Os endpoints primários e secundários são fornecidos na seção acima, OBJETIVOS DO ESTUDO.

   Visão geral do projeto Os participantes serão identificados e recrutados no U.O.S. di Dietetica e Nutrizione Clinica, St Chiara, APSS Trento e Fondazione Edmund Mach. Os participantes serão informados sobre os objetivos e procedimentos do estudo e serão pré-selecionados com base nos critérios de inclusão/exclusão. Se elegíveis, assinarão o consentimento informado e entrarão no estudo com visita T-1, realizada na clínica entre 8h00 e 9h00, onde será realizada uma avaliação clínica e bioquímica do estado de saúde. Se os indivíduos ainda forem elegíveis para o estudo de acordo com todos os critérios de exclusão, eles serão incluídos no estudo e randomizados para receber a suplementação ativa ou placebo na visita T0, 2 semanas depois (período inicial). Um aconselhamento dietético será administrado nas visitas T-1 e T0. Os participantes serão aconselhados a seguir hábitos alimentares mediterrâneos e praticar atividade física moderada.

   Visita clínica, testes clínicos e coleta de sangue serão realizados após jejum noturno no início da fase inicial (visita T-1). Serão realizados exames clínicos, coleta de sangue, coleta de fezes e urina, nas visitas T0 (semana 2) e T1 (semana 6). Um diário alimentar de quatro dias será distribuído e preenchido por quatro dias consecutivos pelos participantes do estudo antes das visitas T0 e T1.

   Cada participante será submetido a:

   • Avaliação clínica e bioquímica para excluir possível estado de doença (T-1, semana 0): questionário anamnéstico, ECG, hemocromo, creatinina, enzimas hepáticas).
   • Coleta de sangue (30 ml) para análises bioquímicas (T-1 -semana 0-, T0 - semana 2- e T1 - semana 6-).
   • Coleta de fezes e urina de 24 horas para análises bioquímicas (T0 - semana 2- e T1 - semana 6-).
   • Avaliação antropométrica: pressão arterial sistólica e diastólica, pulsação, altura e peso para cálculo do IMC e circunferências de cintura e quadril (T-1 -semana 0-, T0 - semana 2- e T1 - semana 6-).

   Todas as visitas serão realizadas na clínica entre as 8h00 e as 9h00, em regime de jejum. Cada visita durará cerca de 1 hora. Será pedido aos participantes que não modifiquem a sua alimentação atual, com exceção da introdução de suplementos em substituição dos alimentos correspondentes. Também serão solicitados a evitar medicamentos, suplementos e integradores e a comunicar imediatamente aos monitores qualquer estado de doença ou alteração na prescrição medicamentosa (terapia medicamentosa nova ou atual).

   Recrutamento de participantes Os participantes serão identificados e recrutados na U.O.S. di Dietetica e Nutrizione Clinica, St Chiara, APSS Trento e Fondazione Edmund Mach. Eles incluirão trabalhadores de ambas as instituições e membros do público. Os participantes serão informados sobre os objetivos e procedimentos do estudo e serão pré-selecionados com base nos critérios de inclusão/exclusão. Se elegíveis, eles assinarão o consentimento informado e entrarão no estudo com a visita T-1, durante a qual será realizada uma avaliação clínica e bioquímica do estado de saúde. Se os indivíduos permanecerem elegíveis para o estudo de acordo com todos os critérios de inclusão/exclusão, eles serão incluídos no estudo e randomizados para receber a suplementação ativa ou placebo na visita T0, duas semanas depois (período inicial).

   Suplementação Após uma fase inicial de duas semanas, os participantes serão randomizados para receber suplementação com alimentos ricos em aleurona de trigo ou alimentos placebo por quatro semanas de maneira duplo-cega.

   Aconselhamento dietético O aconselhamento dietético será administrado nas visitas T-1 e T0. Os participantes serão aconselhados a seguir hábitos alimentares mediterrâneos e praticar atividade física moderada.

   Acompanhamento A intervenção incluirá períodos de tratamento de quatro semanas. Visita clínica, testes clínicos e coleta de sangue serão realizados após jejum noturno na visita T-1 - semana 0-. Testes clínicos, coleta de sangue e coleta de fezes e urina serão realizados na visita T0 e T1 (T0 no dia anterior à suplementação, T1 será a semana 4 após o tratamento com alimentos suplementados com aleurona ou alimentos suplementados com placebo). Um questionário de frequência alimentar recordatório de um ano será administrado na visita T-1. Um questionário de frequência alimentar recordatório de uma semana será realizado antes das visitas T0 e T1.

   Avaliação clínica Eletrocardiograma. Um ECG de 12 derivações será realizado na triagem. Os eletrocardiogramas serão revisados ​​e interpretados pelo U.O.S. di Dietetica e Nutrizione Clinica, St Chiara, APSS Trento.

   A pressão arterial (PA) será medida de acordo com as diretrizes para hipertensão da ISH/OMS 2004. O 'monitor de pressão arterial oscilométrico OMRON HEM705CP' será usado. Os sujeitos serão mantidos em repouso e sentados por 10 minutos antes da aferição da pressão arterial no braço direito; A primeira medida será apurada; a segunda e a terceira medidas seguirão a primeira por 2 minutos cada, em um braço relaxado e nu e com o ângulo do braço no mesmo nível do coração. A média das duas últimas medidas será utilizada para a análise.

   O peso e a altura serão medidos em uma balança padrão, com altímetro acoplado para medições de altura e serão registrados como iguais aos 100 g e 1 cm mais próximos, se necessário, respectivamente. As medidas serão realizadas em indivíduos sem sapatos, casacos ou roupas pesadas. O IMC será calculado em kg/m2.

   A circunferência da cintura (umbilical) será medida de acordo com os Institutos Nacionais de Saúde, Instituto Nacional do Coração, Pulmão e Sangue. Diretrizes clínicas para identificação, avaliação e tratamento de sobrepeso e obesidade em adultos; o relatório de provas. Na prática, com o indivíduo em pé ereto com o abdômen relaxado, o braço ao lado do corpo e os pés juntos, a circunferência da cintura será medida, com precisão de 0,1 cm, no nível médio entre a margem inferior da costela e a crista ilíaca com a fita ao redor do corpo na posição horizontal. A circunferência do quadril será medida no nível bitrocantérico. A relação entre cintura e circunferência do quadril (RCQ) será calculada.

   Questionários. Todas as informações serão coletadas e registradas em questionários validados, incluindo identificação pessoal, histórico médico e informações sobre fatores de risco para DCV, uso de drogas, atividade física e hábitos alimentares. Além disso, um diário alimentar de três dias será coletado.

   Coleta de sangue e coleta de urina Sangue (≤ 30 ml) será coletado de uma veia antecubital, com estase mínima entre 8h e 9h, após jejum de 12 h, de indivíduos que abstiveram-se de fumar por pelo menos 6 h. Coletas de urina de 24 horas serão obtidas de cada participante. O volume de urina será medido e 5 alíquotas de 5 ml serão armazenadas a -80°C.

   Coleta de amostras fecais As amostras fecais serão processadas em até 2 horas após a produção da amostra. Resumidamente, alíquotas de 1 g de fezes serão misturadas com RNA posteriormente e armazenadas a -80°C para posterior DNA. Amostras fecais também serão congeladas diretamente a -80°C para análise de metabólitos.

   Testes laboratoriais (U.O.S. di Dietetica e Nutrizione Clinica, St Chiara, APSS Trento) As amostras de sangue serão centrifugadas de acordo com os requisitos dos testes a serem realizados, imediatamente após a coleta de sangue. O plasma ou soro será separado, em parte testado imediatamente e a fração restante armazenada a -80°C.

   Colesterol, triglicerídeos, colesterol HDL e glicose serão avaliados por ensaios cromogênicos. O colesterol LDL será calculado de acordo com a fórmula de Friedewald.

   Os níveis de insulina serão avaliados por ELISA. As contagens de células sanguíneas serão avaliadas por testes padrão. C-RP será medido por ensaios nefelométricos; Os F2-isoprostanos serão medidos na urina como medida de estresse oxidativo, por kit EIA específico (Cayman Chemicals, Ann Arbor, Michigan, EUA), após purificação por cromatografia em fase sólida (colunas SepPack).

   Testes laboratoriais (Fondazione Edmund Mach [FEM]) LPS plasmático, IgG específico de LPS, CD14, proteína de ligação a LPS e 8-isorpostano urinário serão medidos espectrofotometricamente usando um kit ELISA comercial.

   Perfil metabólito urinário e plasmático (FEM). Amostras de urina e sangue (plasma e soro) serão submetidas a metabolômica direcionada (UPLC-MS/MS para compostos não voláteis e GC-MS/MS para compostos voláteis) e metabolômica não direcionada (ULPC-Q-TOF-MS e Nano -FTMS-Q-TOF para não voláteis e GC-TOF para compostos voláteis) (Vanza et al., 2001 2012). Para o perfil de metabólitos direcionados do plasma, o Kit Biocrates AbsoluteIDQ® p180 baseado em MS será usado, gerando dados quantitativos precisos sobre 180 metabólitos humanos relacionados ao risco de diabetes. Também serão aplicadas análises direcionadas específicas para perfis lipídicos séricos, ácidos biliares, SCFA e quantificação de metabólitos de polifenóis microbianos em biofluidos (incluindo fezes) usando UPLC/QqQ-MS/MS (Vrhovsek et al., 2012).

   Análise da microbiota fecal (MEF). As alterações da microbiologia fecal serão avaliadas usando metagenômica 454 pyrosequencing. Resumidamente, após a entrega de amostras fecais, o DNA metagenômico será extraído usando o kit FastDNA SPIN para FECES da MPbio.com. Utilizando primers bacterianos universais, a região V1-V3 inclusive do gene 16S rRNA presente no DNA metagenômico fecal será amplificada e submetida a 454-pyrosequencing. Os adaptadores Multiplex Identifier (MID) serão usados ​​para o GS FLX Titanium Chemistry - Extended MID Set para obter sequências de cerca de 600 pb de comprimento que serão BLASTED contra bancos de dados filogenéticos 16S rRNA publicamente disponíveis usando o pipeline QIIME (http://qiime.org / ) fornecendo boas identificações em nível de espécie da microbiota intestinal humana. Um total de 20.000 sequências utilizáveis ​​por amostra fecal é alvo. Após o controle de qualidade e a análise ecológica microbiana, estatísticas multivariadas serão empregadas para correlacionar mudanças na composição e estrutura da microbiota fecal em indivíduos após o consumo de alimentos suplementados com Aleurona em comparação com os alimentos de controle (De Filippo et al., 2010). PCR quantitativo com primers específicos de espécies e grupos será empregado para confirmar mudanças nas populações microbianas identificadas a partir dos dados metagenômicos de pirosequenciamento. Usando qPCR, bifidobactérias totais, enterobactérias totais, bactérias totais e lactobacilos em todas as amostras fecais serão enumeradas. Isso será um mínimo e atuará como controle de qualidade independente para o pirosequenciamento. Além disso, e dependendo do que for observado em termos de mudanças no nível de espécie do pirosequenciamento, primers específicos de espécie serão empregados para confirmar todas as diferenças estatisticamente significativas observadas na comparação entre Aleurone e pontos de tempo de alimentação de controle.

   Randomização e Cegueira Os participantes, estratificados por sexo, serão randomizados para tratamento com aleurona ou placebo por número gerado eletronicamente fornecido pelo estatístico. Investigadores clínicos e pessoal de laboratório serão cegados sobre a randomização.

   Os produtos do estudo (farinha de pão, biscoitos, cereais RTE) serão entregues pela Cargill de maneira cega, mas marcados com E ou W para diferenciar os tratamentos. Os produtos de teste serão embalados em embalagens semelhantes e em porções diárias. Os alimentos placebo contêm os mesmos ingredientes que os alimentos ativos, exceto com a celulose substituindo a Aleurona e são muito semelhantes a esta última em tamanho, forma e cor.

   Tratamento A suplementação do estudo será introduzida na dieta diária de acordo com a preferência do participante até um total de 27 g de Aleurone/dia ou dose equivalente de placebo. Uma fatia de pão (35 g) contém 4,8 g de Aleurona; um biscoito (15 g) contém 4,5 g de Aleurona; 36 g de cereais RTE contêm 9 g de Aleurona. Os alimentos placebo contêm os mesmos ingredientes que os alimentos ativos, exceto com a celulose substituindo o teor de fibra Aleurone e são muito semelhantes a estes últimos em tamanho, forma e cor. Os produtos do estudo (ativos ou placebo) serão fornecidos em embalagens de produtos que serão rotuladas no idioma local com o número do código do estudo, número do código do local, nome do fabricante, número do paciente, número da visita do estudo, número do lote, instruções de armazenamento , e datas de expiração. Os produtos serão dispensados ​​aos participantes na visita T0.

   Duração e agendamento do estudo Após uma fase inicial de duas semanas, os participantes serão randomizados para o grupo de alimentos suplementados com Aleurona ou grupo suplementado com placebo por 4 semanas de intervenção dietética.

   A duração total do estudo, incluindo run-in e tratamento, será de 6 semanas. O recrutamento de participantes começará após avaliação favorável do comitê de pesquisa e ética da APSS e os primeiros participantes iniciarão o período de execução dentro de duas semanas a partir deste ponto inicial. Os indivíduos serão recrutados durante um período de 6 meses e o estudo será concluído em 8 meses a partir do momento do recrutamento do primeiro indivíduo.

   Critérios de descontinuação De acordo com a Declaração de Helsinque, as Diretrizes de Boas Práticas Clínicas do ICH e os Regulamentos da Food and Drug Administration (FDA) dos Estados Unidos, um sujeito tem o direito de se retirar do estudo a qualquer momento por qualquer motivo, sem prejuízo de sua /seus cuidados médicos futuros pelo médico ou na instituição. O Investigador e o Patrocinador também têm o direito de retirar os participantes do estudo (veja abaixo). Além disso, o Patrocinador pode optar por encerrar o estudo a qualquer momento por qualquer motivo.

   Se um sujeito (ou um representante legalmente autorizado de um sujeito) decidir se retirar, todos os esforços serão feitos para completar e relatar as observações da forma mais completa possível. Uma avaliação final completa deve ser feita no momento da retirada do sujeito, o motivo da retirada deve ser registrado e uma tentativa deve ser feita para realizar uma avaliação de acompanhamento.

   Os participantes podem ser removidos do estudo por razões, incluindo as seguintes:

   • violação significativa do protocolo por parte do Investigador
   • descumprimento significativo por parte do sujeito
   • recusa do sujeito em continuar o tratamento ou observações
   • toxicidade inaceitável
   • decisão do Investigador de que a rescisão é do melhor interesse médico do sujeito
   • doença ou complicação médica não relacionada
   • gravidez
   • evidência de abuso de álcool ou substâncias Os sujeitos que descontinuarem ou forem retirados do estudo não serão substituídos.

   Procedimento para descontinuação antecipada

   Se um sujeito descontinuar antes da conclusão do estudo, o motivo e a data da descontinuação serão obtidos. A data da última dose do produto do estudo também será obtida. Em caso de descontinuação precoce, os seguintes procedimentos devem ser realizados:

   • Exames clínicos (pressão arterial sistólica e diastólica, pulsação, altura e peso para cálculo do IMC e circunferências da cintura e do quadril),
   • Coleta de sangue, fezes e urina
   • Um questionário recordatório alimentar de 1 semana Caso o sujeito não possa retornar para a visita de acompanhamento, o centro deve tentar entrar em contato com o sujeito por telefone para acompanhar quaisquer eventos adversos.

   Se um sujeito retirar o consentimento para receber o produto do estudo, ele será encorajado a permanecer no estudo sem receber tratamento para a coleta de dados de segurança.

   Procedimentos de responsabilidade para o produto do estudo Os produtos do estudo (ativos ou placebo) serão fornecidos em embalagens de produtos que serão rotuladas no idioma local com o número do código do estudo, número do código do local, nome do fabricante, número do código do produto, número da visita do estudo , número do lote, instruções de armazenamento e datas de validade. Os produtos serão dispensados ​​aos participantes na visita T0. O pão será congelado em porções de 2 pãezinhos e os biscoitos serão congelados em porções de 2 biscoitos que serão descongelados em casa pelos participantes antes do consumo.

   Manutenção do código de randomização Os códigos de randomização para os participantes serão mantidos em um envelope lacrado na FEM. As informações do código do produto serão mantidas em um envelope lacrado na Cargill.

   Controle de dados da fonte Todos os dados coletados durante o estudo serão obtidos de fontes primárias registradas em documentos escritos e eletrônicos, como o arquivo médico do paciente. Os resultados dos exames clínicos, achados laboratoriais e traçados de ECG serão registrados no arquivo médico eletrônico do paciente. Nenhum dado será inserido diretamente no formulário de relato de caso (CRF) sem ser transferido de alguma outra fonte anterior, como registros escritos ou eletrônicos.

   Seleção e Retirada de Sujeitos Critérios de Inclusão Pelo menos uma das seguintes condições: Idade de 18 a 65 anos; IMC >27 kg/m^2. Critérios de exclusão Os indivíduos devem ser excluídos da participação no estudo se atenderem a qualquer um dos seguintes critérios de exclusão: glicemia de jejum >300 mg/dl; triglicerídeos >500 mg/dl; hipertensão não controlada (PA >160/100 mm Hg sob terapia anti-hipertensiva); doença cardiovascular (infarto do miocárdio, angioplastia coronária transluminal percutânea ou cirurgia de revascularização miocárdica, angina pectoris instável, acidente vascular cerebral, doença arterial periférica); hipo ou hipertireoidismo; doenças inflamatórias agudas; doenças gastrointestinais graves; insuficiência cardíaca, hepática, renal ou pulmonar ou outra doença potencialmente fatal com prognóstico <5 anos; uso crônico de corticosteroides sistêmicos, anticoagulantes, anti-inflamatórios ou hipolipemiantes e antidiabéticos; tratamento nas 6 semanas anteriores com qualquer medicamento que afete os níveis de lipoproteína ou microbiota fecal (especificamente, antibióticos); intolerâncias alimentares; consumo de álcool >5 drinques por dia ou uso de substâncias entorpecentes; uso de suplementos vitamínicos ou minerais antioxidantes; dieta especial; gravidez, tabagismo.

   Terapia medicamentosa concomitante Qualquer terapia recebida pelo sujeito dentro de um mês antes do início do estudo e/ou administrada durante o estudo será considerada como terapia concomitante. Tal tratamento deve ser documentado na página apropriada do CRF e nos registros médicos dos participantes. Quaisquer alterações na terapia concomitante durante o estudo devem ser claramente registradas e o motivo da alteração deve ser documentado.

   O uso dos seguintes medicamentos não será permitido durante o estudo:

   Corticosteroides, anticoagulantes, antiinflamatórios, hipolipemiantes e antidiabéticos; qualquer medicamento que afete os níveis de lipoproteína ou microbiota fecal (especificamente antibióticos), suplementos, probióticos, prebióticos ou ervas, exceto para o gerenciamento de eventos adversos.

   Conformidade do Sujeito Para avaliar a adesão à suplementação, os fenóis urinários serão medidos em indivíduos suplementados com alimentos ricos em Aleurona nos tempos T0 e T1. Além disso, todos os pacotes não utilizados ou vazios no final de cada semana, acompanhados de um auto-registro das porções usadas, serão devolvidos aos investigadores.

   Registro e notificação de eventos adversos Eventos adversos Os eventos adversos, tanto solicitados quanto não solicitados, serão registrados durante todo o estudo e por 30 dias após o último tratamento com os produtos do estudo.

   Um evento adverso (EA) é qualquer alteração física ou clínica ou doença experimentada pelo sujeito a qualquer momento durante o curso do estudo, considerado ou não relacionado ao uso do produto do estudo. Isso inclui o aparecimento de uma nova doença e a exacerbação de condições pré-existentes. Valores anormais de laboratório ou resultados de testes geralmente não devem ser considerados EAs, a menos que induzam sinais ou sintomas clínicos ou requeiram intervenção terapêutica. Os eventos adversos serão acompanhados cuidadosamente até serem resolvidos.

   Uma descrição literal do evento, sua relação com o produto do estudo e se o evento também foi ou não registrado como um evento adverso grave (SAE) deve ser relatado no CRF de Evento Adverso para cada EA registrado no prontuário do sujeito. Quaisquer EAs ocorridos após o primeiro procedimento do estudo e durante todo o curso do estudo, até o procedimento final do estudo, devem ser relatados, sejam ou não considerados relacionados ao produto do estudo. Cada entrada deve incluir as datas e horários de início e término, gravidade, gravidade, relação com o produto do estudo e ação/resultado. Todos os EAs devem ser registrados usando a terminologia definida pelo Dicionário Médico para Atividades Regulatórias (MedDRA), versão 10.

   Análises estatísticas Inscrição planejada e justificativa O tamanho da amostra 34 foi determinado para detectar uma alteração de 0,4 μmol/L de homocisteína total (tHcy) no plasma com uma variação padrão de 0,5 μmol/L (retirado de Price et al., 2010) usando o Snedecor e equação de Cochran com α de 0,05 e 1-β de 0,9 (Dell et al., 2002). Tendo em consideração o estudo anterior com aleurona em indivíduos saudáveis ​​de Price et al., (2010), e a necessidade de contabilizar desistências, propomos recrutar 40 indivíduos por grupo de tratamento no presente estudo.

   As características basais serão apresentadas para cada grupo. Eventualmente, as diferenças residuais entre o alimento ativo e o grupo placebo após a randomização serão consideradas para ajuste em modelos multivariáveis ​​em todas as análises posteriores. Variáveis ​​contínuas serão expressas como média +/- desvio padrão ou mediana com intervalos interquartis e como porcentagem para variáveis ​​categóricas. Os dados pós-intervenção serão comparados por ANOVA usando o Modelo Linear Geral com linha de base como covariável. Os dados com uma distribuição assimétrica serão transformados em log antes das análises. A regressão linear simples e múltipla será usada para determinar as relações entre as variáveis ​​e os testes t independentes serão realizados para avaliar as diferenças na adesão relatada entre os grupos. Os resultados serão expressos como média +/- SEM e as diferenças serão consideradas significativas em P < 0,05.

   O princípio da 'intenção de tratar' será adotado para a análise dos endpoints primários: a avaliação da eficácia leva em consideração a randomização inicial independentemente da adesão ao tratamento do sujeito.

   A análise principal será baseada na comparação da diferença nos níveis médios no final do estudo em indivíduos suplementados com alimentos ativos e indivíduos que receberam alimentos placebo.

   A análise principal será baseada na comparação da diferença dos níveis médios ao final do estudo em indivíduos suplementados com alimentos ativos e em alimentos placebo suplementados.

   As diferenças ao longo do tempo entre os braços de tratamento serão avaliadas pela análise da Variância para medidas repetidas (Procedimento GLM, SAS Institute Inc. Guia do Usuário SAS/STAT, Versão 9.1.3 para Windows. Cary, NC: SAS Institute Inc. 1989).

   O nível de significância será alfa=0,05 de duas caudas.

   Características demográficas e de linha de base As características demográficas e de linha de base, incluindo, entre outros, idade, sexo, raça, etnia, peso corporal, altura e índice de massa corporal, pressão arterial e hábitos alimentares serão tabuladas usando estatísticas descritivas Avaliações de linha de base Quaisquer achados anormais no eletrocardiograma de linha de base avaliação, triagem de drogas ou triagem de vírus serão resumidas descritivamente.

   Valores laboratoriais Os dados laboratoriais de cada amostragem e as alterações da linha de base serão resumidos para cada visita pela média, mediana, desvio padrão, mínimo e máximo.

   ACESSO DIRETO À FONTE DE DADOS/DOCUMENTOS As autoridades reguladoras podem desejar conduzir auditorias de atividades de pesquisa clínica para avaliar a conformidade com os princípios do GCP. Uma autoridade reguladora também pode desejar realizar uma inspeção (durante o estudo ou mesmo após sua conclusão). Se uma inspeção for solicitada por uma autoridade reguladora e/ou IRB, o Investigador deve informar o Patrocinador ou seu designado imediatamente. O Investigador deve concordar em fornecer às autoridades reguladoras acesso à documentação relacionada ao estudo. O Investigador permitirá que o Patrocinador ajude a responder a quaisquer citações, bem como receba cópias de quaisquer documentos fornecidos a um inspetor/auditor.

   ÉTICA Conselho de Revisão Institucional/Comitê de Ética Antes de implementar este estudo, o protocolo e o consentimento informado serão revisados ​​pelo Comitato etico per le Sperimentazioni Cliniche c/o APSS di Trento. Uma declaração assinada e datada de que o protocolo e o consentimento informado foram aprovados pelo Comitato etico per le Sperimentazioni Cliniche c/o APSS di Trento deve estar arquivada no local antes do início do estudo. Uma lista dos membros do Comitato etico per le Sperimentazioni Cliniche c/o APSS di Trento também deve estar arquivada no site. Quaisquer alterações ao protocolo, exceto as administrativas, devem ser aprovadas pelo Comitato etico per le Sperimentazioni Cliniche c/o APSS di Trento.

   Consentimento informado Os formulários de consentimento informado serão assinados.

   Divulgação e Confidencialidade Ao assinar o protocolo, o Investigador concorda em manter todas as informações fornecidas pela Cargill em sigilo absoluto e em solicitar confidencialidade semelhante de sua equipe e do IRB.

   Os documentos do estudo fornecidos pela Cargill (protocolos, brochuras do investigador e outros materiais) serão armazenados adequadamente para garantir a confidencialidade. As informações fornecidas pela Cargill ao Investigador não podem ser divulgadas a outras pessoas sem autorização direta por escrito da Cargill, exceto na medida do necessário para obter o consentimento informado dos indivíduos que desejam participar do estudo.

   MANUSEIO DE DADOS E MANUTENÇÃO DE REGISTROS Os dados/documentação de origem são definidos como o primeiro local em que os dados são registrados. Todo e qualquer documento de origem deve ser mantido e recuperável no site. O Investigador deve manter os documentos de origem para cada sujeito no estudo.

   Os dados coletados nos CRFs durante o estudo serão documentados de forma anônima e os indivíduos serão identificados apenas por números e iniciais do indivíduo. Se, como exceção, for necessário por motivos de segurança ou regulamentares identificar o sujeito, a Cargill e o Investigador são obrigados a manter essas informações confidenciais.

   Todos os dados inseridos nos CRFs devem ser registrados de forma legível em tinta preta. Se uma correção for necessária, ela deve ser feita riscando a entrada incorreta com uma única linha e inserindo as informações corretas adjacentes a ela. A correção deve ser rubricada e datada pelo Investigador ou por um indivíduo qualificado designado. Qualquer informação solicitada que não seja obtida conforme especificado no protocolo deverá ter a justificativa da omissão anotada no CRF. Uma cópia do CRF de cada sujeito, juntamente com as consultas relacionadas, deve ser mantida no local do estudo.

   Todas as informações nos CRFs devem ser rastreáveis ​​aos documentos de origem, que geralmente são mantidos no arquivo do assunto. Os documentos de origem devem conter todas as informações demográficas e médicas, incluindo dados laboratoriais, ECGs, etc., e também uma cópia do formulário de consentimento informado assinado, que deve indicar o número do estudo e o título do estudo.

   Os documentos essenciais, conforme listados abaixo, devem ser retidos pelo Investigador por um período identificado pela Cargill no início do estudo. A Cargill notificará o Investigador/instituição quando os registros relacionados ao estudo não forem mais necessários. O Investigador concorda em aderir aos procedimentos de retenção de documentos assinando o protocolo. Documentos essenciais incluem, mas não estão limitados a, protocolos, materiais publicitários, relatórios de EA, registros de fonte de assunto, correspondência IRB, formulários de consentimento, currículos, registros de visitas de monitoramento, registros de laboratório, intervalos de referência, certificações, documentação de controle de qualidade e qualquer outro documentos pertinentes.

   Qualquer alteração ou adição a este protocolo requer uma emenda de protocolo por escrito que deve ser aprovada pela Cargill antes da implementação. Se forem feitas alterações substanciais no desenho do estudo, o CEP deve ser notificado e, quando necessário, aprovar a alteração antes da inclusão de novos sujeitos.

   Todos os procedimentos de gerenciamento de dados serão detalhados em arquivos separados e especificamente identificados que coletivamente serão referenciados como o Plano de Gerenciamento de Dados (DMP).