Identifikation af HDL-sammensætning og funktion i præeklamptiske og normale graviditeter

Videnskabelig baggrund Præeklampsi er et syndrom karakteriseret ved indtræden af ​​hypertension og proteinuri eller anden end-organ dysfunktion. Det udvikler sig efter 20 ugers svangerskab og kan forårsage betydelig morbiditet og mortalitet (1,2). Patofysiologien af ​​præeklampsi menes at være udviklingsmæssige abnormiteter af placenta vaskulatur, der fører til placenta underperfusion eller iskæmi. Denne iskæmi menes at mediere frigivelsen af ​​anti-angiogene faktorer i moderens kredsløb, hvilket forårsager endothelial dysfunktion, hypertension og end-organskade (2). Den elementære faktor, der fører til udvikling af placenta vaskulatur abnormiteter, skal stadig belyses. Histologiske ændringer i placenta omfatter dog atherose (lipidladede celler i arteriolens væg), fibrinoid nekrose, trombose, sklerotisk forsnævring af arterioler og placentainfarkt, som alle ligner fund set i aterosklerotisk plak (1-3) ). En anden tæt sammenhæng mellem mekanismerne for præeklampsi og åreforkalkning blev fundet i store epidemiologiske undersøgelser, der viste en stærk sammenhæng mellem præeklampsi (PET) og udvikling af hjertekarsygdomme senere i livet (4). Kvinder med PET er mere tilbøjelige end dem med normal graviditet til at udvikle kronisk hypertension, hjerte-kar-sygdomme, slagtilfælde, diabetes og nyresygdom i slutstadiet (1,4). Almindelige aterosklerotiske sygdomme, såsom hypertension, kronisk nyresygdom (CKD), hyperkolesterolæmi og diabetes er stærkt forbundet med præeklampsi under graviditet (5-6).

Store epidemiologiske og eksperimentelle undersøgelser har vist en sammenhæng mellem lave niveauer af højdensitetslipider (HDL) i blodet og øget kardiovaskulær risiko (7). De kardiobeskyttende egenskaber af HDL menes at være sammensat af flere mekanismer, herunder regulering af endotelfunktioner, der øger NO-produktion og opretholder endotelintegritet, samt antiinflammatoriske, antioxidative og antitrombotiske effekter (8-9). Imidlertid rapporterede farmakologiske undersøgelser, at stigninger i plasma HDL ikke forbedrede kardiovaskulære resultater (10-12).

Samtidig har nye data afsløret vigtigheden af ​​kvaliteten af ​​HDL mere end dens kvantitet. HDL fra patienter med CKD viste sig at miste sin anti-atherogene og endotelbeskyttende virkning. I en undersøgelse af Shroff et al. (13), HDL fra patienter med CKD blev inkuberet med en primær endotelcellelinje. Adskillige endotelfunktioner, såsom reduceret NO-produktion, tilladelse til SO-produktion, øget VCAM-1-ekspression og reduktion af kolesteroludstrømningskapacitet blev reduceret sammenlignet med HDL fra raske individer. Disse virkninger var forbundet med vaskulære dysfunktionsmarkører hos disse patienter, såsom høje niveauer af urat, angiopoeitin og IL-6, såvel som dårlige målinger af vaskulær funktion, som målt ved aortapulshastighed og carotis intima media tykkelse. Disse negative funktioner steg efterhånden som sværhedsgraden af ​​CKD udviklede sig og viste en delvis forbedring efter nyretransplantation (13).

Oplysninger om sammensætning og funktion af serumlipider og lipoproteiner blandt præeklamptiske graviditeter sammenlignet med normale graviditeter er sparsomme. Dyslipidæmi i tidlig graviditet, især hypertriglyceridæmi, synes at være forbundet med øget risiko for præeklampsi (14). Imidlertid blev der fundet tvetydige resultater vedrørende paraoxonase 1 (PON1) aktivitet, som er et antioxidativt enzym fundet i HDL, som hæmmer lavdensitetslipid (LDL) og HDL-oxidation. PON1-aktivitet er nedsat ved sygdomme forbundet med endotelaktivering og dysfunktion, herunder diabetes, hyperkolesterolæmi og hjerte-kar-sygdomme (15). Demir et al. (16) fandt lave niveauer af HDL, ApoA1 og paraoxonaseaktivitet i præeklamptiker sammenlignet med normale graviditeter, hvorimod Acikgoz et al. (17) påviste signifikant højere PON1-aktivitet i præeklamptiker sammenlignet med normale graviditeter.

Spyt indeholder bestanddele, der afspejler en sygdom eller fysiologisk tilstand af den menneskelige krop og kan derfor bruges til diagnostiske formål. Kilderne og sammensætningen af ​​hel spyt (mundvæske) er unikke og komplekse. Spyt består af sekreter fra spytkirtler og tandkødsspaltevæske, mundslimhindetransudat, sekreter fra næseslimhinden og svælgets slimhinde, ikke-adhærente bakterier, afskallede orale epitelceller, keratinrester, blodceller og muligvis mad- eller medicinrester (18). Dens funktioner omfatter smøring, fordøjelse, antimikrobiel aktivitet, facilitering af remineralisering af tandemalje og opretholdelse af normal smagsfølelse (19). Disse vigtige funktioner opnås af de forskellige kemiske komponenter i spyt, herunder vand, uorganiske forbindelser (ioner), organiske forbindelser (ikke-proteiner og lipider), protein/polypeptider og hormoner (19). Søgningen efter pålidelige spytbiomarkører har udviklet sig hurtigt, især i orale kræftformer, ansporet af det faktum, at indsamling af spyt er enklere og mindre invasiv end at tage blod.

Salvador-Moysén et al. (20) havde til formål at bestemme anvendeligheden af ​​spytcortisol som en forudsigelse for præeklampsi hos unge. De fandt, at kortisolkoncentrationer >14,9 nmol/L blev observeret i gruppen, der udviklede præeklampsi, hvorimod kontrolgruppen havde værdier <10,1 nmol/L.

Flygtige organiske forbindelser (VOC) kan påvises i åndedrættet og blodet og bruges til tidlig påvisning og karakterisering af udvikling og progression af sygdomme (21). Mange af de VOC, der påvises i åndedrættet, er systemiske eller endogene og produceres under fysiologiske processer, men de metaboliske veje bag deres produktion er kun kendt for få (22). Andre VOC'er er eksogene og skyldes ekstern kontaminering gennem indåndet luft eller indtaget fødevarer eller drikkevarer.

Fastfasemikroekstraktion (SPME) er en enkel, automatiseret, hurtig teknik til VOC-detektion kombineret med gaskromatografi-massespektrometri (GC-MS) (20). Så vidt vi ved, er der ikke udført undersøgelser for at identificere VOC i spyt fra præeklamtiske kvinder.

Mål

1. Der er en sammenhæng mellem diagnosen præeklampsi og dens sværhedsgrad til ændringer i HDL-kvalitet, hvad angår sammensætning og funktion.
2. Bestem, om præeklampsi-inducerede ændringer i VOC'er i spyt kan bruges til tidlig diagnose af præeklampsi.

Forskningsmål

1. Vurdere:

   HDL-sammensætning og funktion af normale og præeklamptiske graviditeter i uge 12-14 (andet trimester), uge ​​28-30 (tredje trimester) og ved fødslen Apo-A1-egenskaber, PON1-aktivitet HDL-størrelse HDL-lipidindhold HDL-antioxidantaktivitet (mod LDL og makrofager) ) HDL-medieret kolesteroludstrømning fra makrofager

2. Evaluer effekterne af HDL fra kvinder med PET, normale graviditeter og ikke-gravide kvinder på primær endotelkultur vedrørende proteiner, mRNA og miRNA'er, som er væsentlige komponenter i normal endotelfunktion og relateret til inflammatorisk respons.
3. Evaluer forskelle i de genomiske og lipidprofiler af navlestrengsblod og placenta fra kvinder med PET, normale graviditeter og ikke-gravide kvinder
4. Identificer VOC i spyt som tidlige biomarkører for PET i andet og tredje trimester og ved fødslen.