Identyfikacja składu i funkcji HDL w ciążach przedrzucawkowych i normalnych

Podstawy naukowe Stan przedrzucawkowy to zespół charakteryzujący się wystąpieniem nadciśnienia tętniczego i białkomoczu lub innych dysfunkcji narządów końcowych. Rozwija się po 20. tygodniu ciąży i może powodować znaczną chorobowość i śmiertelność matek i płodów (1,2). Uważa się, że patofizjologią stanu przedrzucawkowego są nieprawidłowości rozwojowe układu naczyniowego łożyska prowadzące do niedokrwienia lub niedokrwienia łożyska. Uważa się, że to niedokrwienie pośredniczy w uwalnianiu czynników antyangiogennych do krążenia matki, powodując dysfunkcję śródbłonka, nadciśnienie i uszkodzenie narządów końcowych (2). Elementarny czynnik, który prowadzi do rozwoju nieprawidłowości w układzie naczyniowym łożyska, wciąż wymaga wyjaśnienia. Jednak zmiany histologiczne w łożysku obejmują miażdżycę tętnic (komórki obciążone lipidami w ścianie tętniczki), martwicę fibrynoidów, zakrzepicę, sklerotyczne zwężenie tętniczek i zawał łożyska, z których wszystkie są podobne do zmian obserwowanych w blaszce miażdżycowej (1-3 ). Inny ścisły związek między mechanizmami stanu przedrzucawkowego i miażdżycy tętnic stwierdzono w dużych badaniach epidemiologicznych, które wykazały silną korelację między stanem przedrzucawkowym (PET) a rozwojem chorób sercowo-naczyniowych w późniejszym życiu (4). Kobiety z PET są bardziej narażone na rozwój przewlekłego nadciśnienia tętniczego, chorób sercowo-naczyniowych, udaru mózgu, cukrzycy i schyłkowej niewydolności nerek niż kobiety z prawidłową ciążą (1,4). Częste choroby miażdżycowe, takie jak nadciśnienie, przewlekła choroba nerek (CKD), hipercholesterolemia i cukrzyca są silnie związane ze stanem przedrzucawkowym w czasie ciąży (5-6).

Duże badania epidemiologiczne i eksperymentalne wykazały związek między niskim poziomem lipidów o dużej gęstości (HDL) we krwi a zwiększonym ryzykiem sercowo-naczyniowym (7). Uważa się, że właściwości kardioprotekcyjne HDL składają się z kilku mechanizmów, w tym regulacji funkcji śródbłonka, które zwiększają produkcję NO i utrzymanie integralności śródbłonka, a także działanie przeciwzapalne, przeciwutleniające i przeciwzakrzepowe (8-9). Jednak badania farmakologiczne wykazały, że wzrost stężenia HDL w osoczu nie poprawia wyników sercowo-naczyniowych (10-12).

Jednocześnie pojawiające się dane ujawniły większe znaczenie jakości HDL niż jego ilości. Stwierdzono, że HDL od pacjentów z przewlekłą chorobą nerek traci działanie przeciwmiażdżycowe i chroniące śródbłonek. W badaniu przeprowadzonym przez Shroffa i in. (13), HDL od pacjentów z CKD inkubowano z pierwotną linią komórek śródbłonka. Kilka funkcji śródbłonka, takich jak zmniejszona produkcja NO, pozwolenie na produkcję SO, zwiększona ekspresja VCAM-1 i zmniejszenie zdolności wypływu cholesterolu było zmniejszonych w porównaniu z HDL u zdrowych osób. Efekty te były związane z markerami dysfunkcji naczyniowej u tych pacjentów, takimi jak wysoki poziom moczanu, angiopoeityny i IL-6, a także słabe pomiary funkcji naczyniowej, mierzone na podstawie prędkości tętna aorty i grubości błony środkowej tętnicy szyjnej. Te negatywne funkcje wzrastały wraz z postępem CKD i wykazywały częściową poprawę po przeszczepie nerki (13).

Informacje dotyczące składu i funkcji lipidów i lipoprotein w surowicy w ciążach ze stanem przedrzucawkowym w porównaniu z ciążami prawidłowymi są skąpe. Wydaje się, że dyslipidemia we wczesnej ciąży, a zwłaszcza hipertrójglicerydemia, wiąże się ze zwiększonym ryzykiem stanu przedrzucawkowego (14). Uzyskano jednak niejednoznaczne wyniki dotyczące aktywności paraoksonazy 1 (PON1), która jest enzymem przeciwutleniającym znajdującym się w HDL, który hamuje utlenianie lipidów o niskiej gęstości (LDL) i HDL. Aktywność PON1 jest zmniejszona w chorobach związanych z aktywacją i dysfunkcją śródbłonka, w tym w cukrzycy, hipercholesterolemii i chorobach sercowo-naczyniowych (15). Demir i in. (16) stwierdzili niski poziom aktywności HDL, ApoA1 i paraoksonazy w stanie przedrzucawkowym w porównaniu z normalnymi ciążami, podczas gdy Acikgoz i in. (17) wykazali istotnie wyższą aktywność PON1 w stanie przedrzucawkowym w porównaniu z normalnymi ciążami.

Ślina zawiera składniki, które odzwierciedlają stan chorobowy lub fizjologiczny organizmu ludzkiego, a zatem może być wykorzystana do celów diagnostycznych. Źródła i skład całej śliny (płynu ustnego) są unikalne i złożone. Ślina składa się z wydzielin gruczołów ślinowych i płynu szczelinowego dziąseł, przesięku z błony śluzowej jamy ustnej, wydzielin z błony śluzowej nosa i gardła, nieprzywierających bakterii, złuszczonych komórek nabłonka jamy ustnej, resztek keratyny, komórek krwi i prawdopodobnie pozostałości pożywienia lub leków (18). Do jego funkcji należy natłuszczanie, trawienie, działanie przeciwdrobnoustrojowe, ułatwianie remineralizacji szkliwa zębów oraz utrzymywanie prawidłowego odczuwania smaku (19). Te ważne funkcje są realizowane przez różne składniki chemiczne śliny, w tym wodę, związki nieorganiczne (jony), związki organiczne (niebiałkowe i lipidy), białka/polipeptydy i hormony (19). Poszukiwania wiarygodnych biomarkerów śliny rozwinęły się szybko, zwłaszcza w przypadku raka jamy ustnej, co było spowodowane faktem, że pobieranie śliny jest prostsze i mniej inwazyjne niż pobieranie krwi.

Salvador-Moysén i in. (20) mieli na celu określenie przydatności kortyzolu w ślinie jako predyktora stanu przedrzucawkowego u młodzieży. Stwierdzili, że w grupie, u której rozwinął się stan przedrzucawkowy, obserwowano stężenia kortyzolu >14,9 nmol/l, podczas gdy w grupie kontrolnej wartości <10,1 nmol/l.

Lotne związki organiczne (LZO) można wykryć w wydychanym powietrzu i we krwi i wykorzystać do wczesnego wykrywania i charakteryzowania rozwoju i postępu chorób (21). Wiele LZO wykrywanych w oddechu ma charakter ogólnoustrojowy lub endogenny i jest wytwarzanych podczas procesów fizjologicznych, ale szlaki metaboliczne stojące za ich wytwarzaniem są znane tylko nielicznym (22). Inne lotne związki organiczne są egzogenne i powstają w wyniku zanieczyszczenia zewnętrznego przez wdychane powietrze lub spożywaną żywność lub napoje.

Mikroekstrakcja do fazy stałej (SPME) to prosta, zautomatyzowana i szybka technika wykrywania LZO w połączeniu z chromatografią gazową i spektrometrią mas (GC-MS) (20). Zgodnie z naszą najlepszą wiedzą nie przeprowadzono badań w celu identyfikacji LZO w ślinie kobiet w stanie przedrzucawkowym.

Cele

1. Istnieje korelacja między rozpoznaniem stanu przedrzucawkowego i jego ciężkością a zmianami jakości HDL pod względem składu i funkcji.
2. Ustal, czy wywołane stanem przedrzucawkowym zmiany LZO w ślinie mogą być wykorzystane do wczesnego rozpoznania stanu przedrzucawkowego.

Cele badawcze

1. Oceniać:

   Skład i funkcja HDL ciąż prawidłowych i ze stanem przedrzucawkowym w 12-14 tygodniu (II trymestr), 28-30 (III trymestr) i przy porodzie Właściwości Apo-A1, aktywność PON1 Wielkość HDL Zawartość lipidów HDL Aktywność antyoksydacyjna HDL (w kierunku LDL i makrofagów ) Wypływ cholesterolu z makrofagów za pośrednictwem HDL

2. Oceń wpływ HDL od kobiet z PET, kobiet w normalnej ciąży i kobiet niebędących w ciąży, na pierwotną hodowlę śródbłonka pod kątem białek, mRNA i miRNA, które są istotnymi składnikami prawidłowej funkcji śródbłonka i są związane z odpowiedzią zapalną.
3. Ocena różnic w profilach genomowych i lipidowych krwi pępowinowej i łożysk od kobiet z PET, kobiet w normalnej ciąży i kobiet niebędących w ciąży
4. Zidentyfikuj LZO w ślinie jako wczesne biomarkery PET w drugim i trzecim trymestrze ciąży oraz podczas porodu.