Identificazione della composizione e della funzione dell'HDL nelle gravidanze preeclamptiche e normali

Background scientifico La preeclampsia è una sindrome caratterizzata dall'insorgenza di ipertensione e proteinuria o altre disfunzioni d'organo. Si sviluppa dopo 20 settimane di gestazione e può causare significativa morbilità e mortalità materna e fetale (1,2). Si ritiene che la fisiopatologia della preeclampsia sia un'anomalia dello sviluppo del sistema vascolare placentare che porta a una sottoperfusione o ischemia placentare. Si ritiene che questa ischemia medii il rilascio di fattori anti-angiogenici nella circolazione materna, causando disfunzione endoteliale, ipertensione e danno d'organo (2). Il fattore elementare che porta allo sviluppo di anomalie della vascolarizzazione placentare deve ancora essere chiarito. Tuttavia, i cambiamenti istologici nella placenta includono l'aterosi (cellule cariche di lipidi nella parete dell'arteriola), la necrosi fibrinoide, la trombosi, il restringimento sclerotico delle arteriole e l'infarto della placenta, che sono tutti simili ai risultati osservati nella placca aterosclerotica (1-3 ). Un'altra stretta associazione tra i meccanismi della preeclampsia e dell'aterosclerosi è stata trovata in ampi studi epidemiologici che hanno dimostrato una forte correlazione tra la preeclampsia (PET) e lo sviluppo di malattie cardiovascolari più avanti nella vita (4). Le donne con PET hanno maggiori probabilità rispetto a quelle con gravidanza normale di sviluppare ipertensione cronica, malattie cardiovascolari, ictus, diabete e malattia renale allo stadio terminale (1,4). Malattie aterosclerotiche comuni, come ipertensione, malattia renale cronica (CKD), ipercolesterolemia e il diabete sono fortemente associati alla preeclampsia durante la gravidanza (5-6).

Ampi studi epidemiologici e sperimentali hanno mostrato un'associazione tra bassi livelli di lipidi ad alta densità (HDL) nel sangue e aumento del rischio cardiovascolare (7). Si ritiene che le proprietà cardioprotettive delle HDL siano composte da diversi meccanismi, inclusa la regolazione delle funzioni endoteliali che migliorano la produzione di NO e mantengono l'integrità endoteliale, nonché effetti antinfiammatori, antiossidanti e antitrombotici (8-9). Tuttavia, studi farmacologici hanno riportato che gli aumenti delle HDL plasmatiche non hanno migliorato gli esiti cardiovascolari (10-12).

Allo stesso tempo, i dati emergenti hanno rivelato l'importanza della qualità dell'HDL più che della sua quantità. È stato riscontrato che l'HDL dei pazienti con CKD perde i suoi effetti protettivi anti-aterogeni ed endoteliali. In uno studio di Shroff et al. (13), le HDL di pazienti con CKD sono state incubate con una linea cellulare endoteliale primaria. Diverse funzioni endoteliali, come la ridotta produzione di NO, l'autorizzazione alla produzione di SO, l'aumento dell'espressione di VCAM-1 e la riduzione della capacità di efflusso del colesterolo erano diminuite rispetto a quelle dell'HDL da individui sani. Questi effetti erano associati a marcatori di disfunzione vascolare in quei pazienti, come alti livelli di urato, angiopoeitina e IL-6, così come scarse misurazioni della funzione vascolare, misurate dalla velocità del polso aortico e dallo spessore dell'intima media carotidea. Queste funzioni negative sono aumentate con il progredire della gravità della malattia renale cronica e hanno mostrato un parziale miglioramento dopo il trapianto di rene (13).

Le informazioni riguardanti la composizione e la funzione dei lipidi sierici e delle lipoproteine ​​nelle gravidanze preeclamptiche rispetto alle gravidanze normali sono scarse. La dislipidemia precoce della gravidanza, in particolare l'ipertrigliceridemia, sembra essere associata ad un aumentato rischio di preeclampsia (14). Tuttavia, sono stati trovati risultati equivoci riguardo all'attività della paraoxonasi 1 (PON1), che è un enzima antiossidante presente nelle HDL che inibisce l'ossidazione dei lipidi a bassa densità (LDL) e delle HDL. L'attività di PON1 è ridotta nelle malattie associate all'attivazione e alla disfunzione endoteliale tra cui diabete, ipercolesterolemia e malattie cardiovascolari (15). Demir et al. (16) hanno riscontrato bassi livelli di HDL, ApoA1 e attività paraoxonasica nella preeclamptica rispetto alle gravidanze normali, mentre Acikgoz et al. (17) hanno dimostrato un'attività PON1 significativamente più alta nella preeclamptica rispetto alle gravidanze normali.

La saliva contiene costituenti che riflettono uno stato malato o fisiologico del corpo umano e quindi potrebbero essere utilizzati per scopi diagnostici. Le fonti e la composizione della saliva intera (fluido orale) sono uniche e complesse. La saliva è costituita da secrezioni delle ghiandole salivari e del fluido crevicolare gengivale, trasudato della mucosa orale, secrezioni della mucosa nasale e faringea, batteri non aderenti, cellule epiteliali orali desquamate, detriti di cheratina, cellule del sangue e possibilmente residui di cibo o farmaci (18). Le sue funzioni includono la lubrificazione, la digestione, l'attività antimicrobica, la facilitazione della remineralizzazione dello smalto dentale e il mantenimento della normale sensazione gustativa (19). Queste importanti funzioni sono svolte dai vari componenti chimici della saliva tra cui acqua, composti inorganici (ioni), composti organici (non proteici e lipidi), proteine/polipeptidi e ormoni (19). La ricerca di biomarcatori salivari affidabili si è sviluppata rapidamente, soprattutto nei tumori orali, stimolata dal fatto che raccogliere la saliva è più semplice e meno invasivo del prelievo di sangue.

Salvador-Moysén et al. (20) miravano a determinare l'utilità del cortisolo salivare come predittore di preeclampsia negli adolescenti. Hanno scoperto che le concentrazioni di cortisolo >14,9 nmol/L sono state osservate nel gruppo che ha sviluppato la preeclampsia, mentre il gruppo di controllo aveva valori <10,1 nmol/L.

I composti organici volatili (COV) possono essere rilevati nel respiro e nel sangue e utilizzati per la diagnosi precoce e la caratterizzazione dello sviluppo e della progressione delle malattie (21). Molti dei COV che vengono rilevati nel respiro sono sistemici o endogeni e vengono prodotti durante processi fisiologici, ma le vie metaboliche alla base della loro produzione sono note solo per pochi (22). Altri COV sono esogeni e derivano dalla contaminazione esterna attraverso l'aria inalata o cibi o bevande ingeriti.

La microestrazione in fase solida (SPME) è una tecnica semplice, automatizzata e rapida per il rilevamento dei COV combinata con la gascromatografia-spettrometria di massa (GC-MS) (20). Per quanto ne sappiamo, non sono stati condotti studi per identificare VOC nella saliva di donne preeclamptiche.

Obiettivi

1. Esiste una correlazione tra la diagnosi di preeclampsia e la sua gravità ai cambiamenti nella qualità delle HDL, in termini di composizione e funzione.
2. Determinare se i cambiamenti indotti dalla preeclampsia nei COV nella saliva possono essere utilizzati per la diagnosi precoce della preeclampsia.

Obiettivi della ricerca

1. Valutare:

   Composizione e funzione delle HDL nelle gravidanze normali e preeclamptiche alle settimane 12-14 (secondo trimestre), settimane 28-30 (terzo trimestre) e al parto Proprietà Apo-A1, attività PON1 Dimensione HDL Contenuto lipidico HDL Attività antiossidante HDL (verso LDL e macrofagi ) Efflusso di colesterolo HDL-mediato dai macrofagi

2. Valutare gli effetti dell'HDL da donne con PET, gravidanze normali e donne non gravide, sulla coltura endoteliale primaria per quanto riguarda proteine, mRNA e miRNA, che sono componenti significativi nella normale funzione endoteliale e correlati alla risposta infiammatoria.
3. Valutare le differenze nei profili genomici e lipidici del sangue del cordone ombelicale e delle placente da donne con PET, gravidanze normali e donne non gravide
4. Identificare i VOC nella saliva, come biomarcatori precoci del PET durante il secondo e terzo trimestre e al momento del parto.