Определение состава и функции ЛПВП при преэклампсии и нормальной беременности

Научная основа Преэклампсия — это синдром, характеризующийся началом гипертонии и протеинурии или дисфункцией других органов-мишеней. Он развивается после 20 недель беременности и может вызывать значительную заболеваемость и смертность матери и плода (1,2). Считается, что патофизиологией преэклампсии являются аномалии развития плацентарной сосудистой сети, приводящие к недостаточной перфузии или ишемии плаценты. Считается, что эта ишемия опосредует высвобождение антиангиогенных факторов в кровоток матери, вызывая эндотелиальную дисфункцию, гипертензию и повреждение органов-мишеней (2). Элементарный фактор, приводящий к развитию аномалий плацентарной сосудистой сети, еще предстоит выяснить. Однако гистологические изменения в плаценте включают атероз (насыщенные липидами клетки в стенке артериол), фибриноидный некроз, тромбоз, склеротическое сужение артериол и инфаркт плаценты; ). Другая тесная связь между механизмами преэклампсии и атеросклероза была обнаружена в крупных эпидемиологических исследованиях, которые продемонстрировали сильную корреляцию между преэклампсией (ПЭТ) и развитием сердечно-сосудистых заболеваний в более позднем возрасте (4). Женщины с ПЭТ более склонны к развитию хронической гипертензии, сердечно-сосудистых заболеваний, инсульта, диабета и терминальной стадии почечной недостаточности, чем женщины с нормальной беременностью (1,4). Распространенные атеросклеротические заболевания, такие как гипертония, хроническая болезнь почек (ХБП), гиперхолестеринемия. и диабет тесно связаны с преэклампсией во время беременности (5-6).

Крупные эпидемиологические и экспериментальные исследования показали связь между низким уровнем липидов высокой плотности (ЛПВП) в крови и повышенным сердечно-сосудистым риском (7). Считается, что кардиопротекторные свойства ЛПВП обусловлены несколькими механизмами, включая регуляцию функций эндотелия, которая увеличивает выработку NO и поддерживает целостность эндотелия, а также противовоспалительные, антиоксидантные и антитромботические эффекты (8-9). Однако фармакологические исследования показали, что увеличение уровня ЛПВП в плазме не улучшало сердечно-сосудистые исходы (10–12).

В то же время новые данные показали, что качество ЛПВП важнее, чем его количество. Установлено, что ЛПВП пациентов с ХБП утрачивают антиатерогенный и эндотелиопротекторный эффекты. В исследовании Shroff et al. (13), ЛПВП пациентов с ХБП инкубировали с первичной линией эндотелиальных клеток. Некоторые эндотелиальные функции, такие как снижение продукции NO, разрешение продукции SO, повышенная экспрессия VCAM-1 и снижение способности оттока холестерина, были снижены по сравнению с функциями ЛПВП у здоровых людей. Эти эффекты были связаны с маркерами сосудистой дисфункции у этих пациентов, такими как высокие уровни уратов, ангиопоэтина и IL-6, а также с плохими показателями сосудистой функции, измеряемыми скоростью пульса на аорте и толщиной интимы сонной артерии. Эти негативные функции возрастали по мере прогрессирования тяжести ХБП и частично улучшались после трансплантации почки (13).

Информация о составе и функции липидов и липопротеинов сыворотки при преэклампсии при беременности по сравнению с нормальной беременностью недостаточна. Дислипидемия на ранних сроках беременности, особенно гипертриглицеридемия, по-видимому, связана с повышенным риском преэклампсии (14). Однако были получены неоднозначные результаты в отношении активности параоксоназы 1 (PON1), которая представляет собой антиоксидантный фермент, обнаруженный в ЛПВП, который ингибирует окисление липидов низкой плотности (ЛПНП) и ЛПВП. Активность PON1 снижается при заболеваниях, связанных с активацией и дисфункцией эндотелия, включая диабет, гиперхолестеринемию и сердечно-сосудистые заболевания (15). Демир и др. (16) обнаружили низкие уровни активности ЛПВП, апоА1 и параоксоназы при преэклампсии по сравнению с нормальной беременностью, тогда как Acikgoz et al. (17) продемонстрировали значительно более высокую активность PON1 при преэклампсии по сравнению с нормальной беременностью.

Слюна содержит компоненты, которые отражают болезненное или физиологическое состояние человеческого организма и, следовательно, могут использоваться в диагностических целях. Источники и состав цельной слюны (жидкости ротовой полости) уникальны и сложны. Слюна состоит из секрета слюнных желез и жидкости десневой борозды, транссудата слизистой оболочки полости рта, секрета слизистой оболочки носа и глотки, неприлипающих бактерий, слущенных эпителиальных клеток полости рта, кератинового детрита, клеток крови и, возможно, остатков пищи или лекарств (18). Его функции включают смазку, пищеварение, антимикробную активность, облегчение реминерализации зубной эмали и поддержание нормальной вкусовой чувствительности (19). Эти важные функции выполняются различными химическими компонентами слюны, включая воду, неорганические соединения (ионы), органические соединения (небелковые и липиды), белки/полипептиды и гормоны (19). Поиск надежных биомаркеров слюны быстро развивался, особенно при раке полости рта, чему способствовал тот факт, что сбор слюны проще и менее инвазивен, чем забор крови.

Сальвадор-Мойсен и др. (20) стремились определить полезность слюнного кортизола в качестве предиктора преэклампсии у подростков. Они обнаружили, что концентрации кортизола >14,9 нмоль/л наблюдались в группе, у которой развилась преэклампсия, тогда как в контрольной группе были значения <10,1 нмоль/л.

Летучие органические соединения (ЛОС) можно обнаружить в выдыхаемом воздухе и крови и использовать для раннего выявления и характеристики развития и прогрессирования заболеваний (21). Многие летучие органические соединения, обнаруживаемые в выдыхаемом воздухе, являются системными или эндогенными и образуются во время физиологических процессов, но метаболические пути их образования известны лишь для некоторых из них (22). Другие ЛОС являются экзогенными и возникают в результате внешнего загрязнения через вдыхаемый воздух или проглатываемые продукты или напитки.

Твердофазная микроэкстракция (ТФМЭ) представляет собой простой, автоматизированный и быстрый метод обнаружения ЛОС в сочетании с газовой хроматографией-масс-спектрометрией (ГХ-МС) (20). Насколько нам известно, исследований по выявлению летучих органических соединений в слюне женщин с преэклампсией не проводилось.

Цели

1. Существует корреляция между диагнозом преэклампсии и ее тяжестью с изменениями качества ЛПВП с точки зрения состава и функции.
2. Определите, могут ли изменения ЛОС в слюне, вызванные преэклампсией, использоваться для ранней диагностики преэклампсии.

Цели исследования

1. Оценивать:

   Состав и функция ЛПВП при нормальной и преэклампсии беременности на 12-14 неделе (второй триместр), 28-30 неделе (третий триместр) и при родах Свойства апо-А1, активность PON1 Размер ЛПВП Содержание липидов ЛПВП Антиоксидантная активность ЛПВП (в отношении ЛПНП и макрофагов) ) Опосредованный ЛПВП отток холестерина из макрофагов

2. Оценить влияние ЛПВП женщин с ПЭТ, нормальных беременных и небеременных женщин на первичную эндотелиальную культуру в отношении белков, мРНК и микроРНК, которые являются важными компонентами нормальной эндотелиальной функции и связаны с воспалительной реакцией.
3. Оценить различия в геномном и липидном профилях пуповинной крови и плаценты у женщин с ПЭТ, при нормальной беременности и у небеременных женщин
4. Идентифицируйте ЛОС в слюне как ранние биомаркеры ПЭТ во втором и третьем триместрах и при родах.