HDL:n koostumuksen ja toiminnan tunnistaminen preeklamptisissa ja normaaleissa raskauksissa

Tieteellinen tausta Preeklampsia on oireyhtymä, jolle on tunnusomaista kohonneen verenpaineen ja proteinurian tai muun pääteelimen toimintahäiriön alkaminen. Se kehittyy 20 raskausviikon jälkeen ja voi aiheuttaa merkittävää äidin ja sikiön sairastuvuutta ja kuolleisuutta (1,2). Preeklampsian patofysiologian uskotaan olevan istukan verisuoniston kehityshäiriöitä, jotka johtavat istukan aliperfuusioon tai iskemiaan. Tämän iskemian uskotaan välittävän antiangiogeenisten tekijöiden vapautumista äidin verenkiertoon aiheuttaen endoteelin toimintahäiriötä, kohonnutta verenpainetta ja pääteelinten vaurioita (2). Perustekijä, joka johtaa istukan verisuonten poikkeavuuksien kehittymiseen, on vielä selvittämättä. Histologisia muutoksia istukassa ovat kuitenkin ateroosi (lipidipitoiset solut valtimoiden seinämässä), fibrinoidinekroosi, tromboosi, arteriolien skleroottinen kapeneminen ja istukkainfarkti, jotka kaikki ovat samanlaisia ​​kuin ateroskleroottisessa plakissa (1-3) ). Toinen läheinen yhteys preeklampsian ja ateroskleroosin mekanismien välillä havaittiin laajoissa epidemiologisissa tutkimuksissa, jotka osoittivat vahvan korrelaation preeklampsian (PET) ja sydän- ja verisuonitautien kehittymisen välillä myöhemmällä iällä (4). Naisilla, joilla on PET, kehittyy todennäköisemmin krooninen kohonnut verenpaine, sydän- ja verisuonitauti, aivohalvaus, diabetes ja loppuvaiheen munuaissairaus (1,4) kuin normaalisti raskaana olevilla naisilla. ja diabetes liittyvät vahvasti preeklampsiaan raskauden aikana (5-6).

Laajat epidemiologiset ja kokeelliset tutkimukset ovat osoittaneet yhteyden korkeatiheyksisten lipidien (HDL) alhaisten pitoisuuksien ja lisääntyneen kardiovaskulaarisen riskin välillä (7). HDL:n sydäntä suojaavien ominaisuuksien uskotaan koostuvan useista mekanismeista, mukaan lukien endoteelin toimintojen säätely, joka tehostaa NO-tuotantoa ja ylläpitää endoteelin eheyttä, sekä anti-inflammatoriset, antioksidantit ja antitromboottiset vaikutukset (8-9). Farmakologiset tutkimukset raportoivat kuitenkin, että plasman HDL-arvon nousu ei parantanut kardiovaskulaarisia tuloksia (10-12).

Samaan aikaan uudet tiedot ovat paljastaneet HDL:n laadun tärkeyden enemmän kuin sen määrän. CKD-potilaiden HDL:n havaittiin menettävän anti-aterogeeniset ja endoteelia suojaavat vaikutuksensa. Shroff et al. (13) CKD-potilaiden HDL:ää inkuboitiin primaarisen endoteelisolulinjan kanssa. Useat endoteelitoiminnot, kuten vähentynyt NO-tuotanto, SO-tuotannon salliminen, lisääntynyt VCAM-1:n ilmentyminen ja kolesterolin ulosvirtauskapasiteetin väheneminen, vähenivät verrattuna terveiden yksilöiden HDL:n toimintoihin. Nämä vaikutukset liittyivät kyseisten potilaiden verisuonten toimintahäiriömarkkereihin, kuten korkeisiin uraatti-, angiopoeitiini- ja IL-6-tasoihin, sekä huonoihin verisuonitoiminnan mittauksiin, jotka mitattiin aortan pulssin nopeudella ja kaulavaltimon sisäkalvon paksuudella. Nämä negatiiviset toiminnot lisääntyivät CKD:n vaikeuden edetessä ja osoittivat osittaista paranemista munuaisensiirron jälkeen (13).

Tiedot seerumin lipidien ja lipoproteiinien koostumuksesta ja toiminnasta preeklamptisissa raskauksissa normaaleihin raskauksiin verrattuna ovat niukkoja. Varhaisraskauden dyslipidemia, erityisesti hypertriglyseridemia, näyttää liittyvän lisääntyneeseen preeklampsian riskiin (14). Kuitenkin epäselviä tuloksia havaittiin koskien paraoksonaasi 1:n (PON1) aktiivisuutta, joka on HDL:stä löydetty antioksidanttientsyymi, joka estää matalatiheyksisiä lipidejä (LDL) ja HDL-hapetusta. PON1-aktiivisuus vähenee sairauksissa, jotka liittyvät endoteelin aktivaatioon ja toimintahäiriöihin, mukaan lukien diabetes, hyperkolesterolemia ja sydän- ja verisuonitaudit (15). Demir et ai. (16) havaitsivat alhaiset HDL-, ApoA1- ja paraoksonaasiaktiivisuustasot preeklampsiassa normaaleihin raskauksiin verrattuna, kun taas Acikgoz et al. (17) osoittivat merkitsevästi korkeampaa PON1-aktiivisuutta preeklampsiassa verrattuna normaaleihin raskauksiin.

Sylki sisältää ainesosia, jotka kuvastavat ihmiskehon sairasta tai fysiologista tilaa ja joita voidaan siten käyttää diagnostisiin tarkoituksiin. Koko syljen (suun nesteen) lähteet ja koostumus ovat ainutlaatuisia ja monimutkaisia. Sylki koostuu eritteistä sylkirauhasista ja ikenen rakonesteestä, suun limakalvon transudaatista, nenän ja nielun limakalvon eritteistä, tarttumattomista bakteereista, hilseilevistä suun epiteelisoluista, keratiinijätteistä, verisoluista ja mahdollisesti ruoka- tai lääkejäämistä (18). Sen toimintoihin kuuluvat voitelu, ruoansulatus, antimikrobinen aktiivisuus, hammaskiilteen remineralisoitumisen helpottaminen ja normaalin makuaistin ylläpitäminen (19). Nämä tärkeät toiminnot saavutetaan syljen erilaisilla kemiallisilla komponenteilla, mukaan lukien vesi, epäorgaaniset yhdisteet (ionit), orgaaniset yhdisteet (ei-proteiinit ja lipidit), proteiini/polypeptidit ja hormonit (19). Luotettavien syljen biomarkkereiden etsintä on kehittynyt nopeasti erityisesti suusyöpätapauksissa, ja sen taustalla on se, että syljen kerääminen on yksinkertaisempaa ja vähemmän invasiivista kuin verenotto.

Salvador-Moysén et ai. (20) pyrki määrittämään syljen kortisolin käyttökelpoisuuden preeklampsian ennustajana nuorilla. He havaitsivat, että kortisolipitoisuudet >14,9 nmol/l havaittiin ryhmässä, jolle kehittyi preeklampsia, kun taas kontrolliryhmän arvot olivat <10,1 nmol/l.

Haihtuvat orgaaniset yhdisteet (VOC) voidaan havaita hengityksestä ja verestä, ja niitä voidaan käyttää sairauksien kehittymisen ja etenemisen varhaiseen havaitsemiseen ja karakterisointiin (21). Monet hengityksestä havaituista VOC-yhdisteistä ovat systeemisiä tai endogeenisiä ja syntyvät fysiologisten prosessien aikana, mutta niiden tuotannon taustalla olevat aineenvaihduntareitit tunnetaan vain harvoille (22). Muut VOC-yhdisteet ovat eksogeenisiä ja ovat seurausta ulkoisesta kontaminaatiosta hengitetyn ilman tai nautittujen ruokien tai juomien kautta.

Kiinteäfaasimikrouutto (SPME) on yksinkertainen, automatisoitu ja nopea tekniikka VOC-detektioon yhdistettynä kaasukromatografia-massaspektrometriaan (GC-MS) (20). Tietojemme mukaan mitään tutkimuksia ei ole tehty VOC-yhdisteiden tunnistamiseksi preeklampsiasta kärsivien naisten syljestä.

Tavoitteet

1. Preeklampsian diagnoosin ja sen vakavuuden välillä on yhteys HDL-laadun muutoksiin koostumuksen ja toiminnan suhteen.
2. Selvitä, voidaanko preeklampsian aiheuttamia muutoksia syljen VOC:issa käyttää preeklampsian varhaiseen diagnosointiin.

Tutkimustavoitteet

1. Arvioida:

   HDL-koostumus ja normaalien ja preeklamptisten raskauksien toiminta viikoilla 12-14 (toinen raskauskolmannes), viikoilla 28-30 (kolmas raskauskolmannes) ja synnytyksen aikana Apo-A1-ominaisuudet, PON1-aktiivisuus HDL-koko HDL-lipidipitoisuus HDL-antioksidanttiaktiivisuus (LDL:ää ja makrofageja kohtaan) ) HDL-välitteinen kolesterolin ulosvirtaus makrofageista

2. Arvioi HDL:n vaikutukset naisilta, joilla on PET, normaaleissa raskauksissa ja ei-raskaana olevilla naisilla primaariseen endoteeliviljelmään koskien proteiineja, mRNA:ta ja miRNA:ita, jotka ovat tärkeitä komponentteja normaalissa endoteelin toiminnassa ja liittyvät tulehdusvasteeseen.
3. Arvioi erot napanuoraveren ja istukan genomi- ja lipidiprofiileissa naisilta, joilla on PET, normaaleissa raskauksissa ja ei-raskaana olevilta naisilta
4. Tunnista VOC syljestä PET:n varhaisina biomarkkereina toisen ja kolmannen raskauskolmanneksen aikana sekä synnytyksen yhteydessä.