Identificando a composição e função do HDL em gestações normais e com pré-eclâmpsia

Antecedentes científicos A pré-eclâmpsia é uma síndrome caracterizada pelo aparecimento de hipertensão e proteinúria ou outra disfunção de órgãos-alvo. Desenvolve-se após 20 semanas de gestação e pode causar significativa morbimortalidade materna e fetal (1,2). Acredita-se que a fisiopatologia da pré-eclâmpsia seja anormalidades do desenvolvimento da vasculatura placentária, levando à subperfusão ou isquemia placentária. Acredita-se que essa isquemia medeie a liberação de fatores antiangiogênicos na circulação materna, causando disfunção endotelial, hipertensão e lesão de órgãos-alvo (2). O fator elementar que leva ao desenvolvimento de anormalidades da vasculatura placentária ainda não foi elucidado. No entanto, as alterações histológicas na placenta incluem aterose (células carregadas de lipídios na parede da arteríola), necrose fibrinoide, trombose, estreitamento esclerótico das arteríolas e infarto placentário, todos semelhantes aos achados observados na placa aterosclerótica (1-3 ). Outra estreita associação entre os mecanismos de pré-eclâmpsia e aterosclerose foi encontrada em grandes estudos epidemiológicos que demonstraram uma forte correlação entre pré-eclâmpsia (PET) e o desenvolvimento de doença cardiovascular mais tarde na vida (4). As mulheres com PET são mais propensas do que aquelas com gravidez normal a desenvolver hipertensão crônica, doença cardiovascular, acidente vascular cerebral, diabetes e doença renal terminal (1,4). Doenças ateroscleróticas comuns, como hipertensão, doença renal crônica (DRC), hipercolesterolemia e diabetes estão fortemente associados à pré-eclâmpsia durante a gravidez (5-6).

Grandes estudos epidemiológicos e experimentais mostraram uma associação entre baixos níveis de lipídios de alta densidade (HDL) no sangue e aumento do risco cardiovascular (7). Acredita-se que as propriedades cardioprotetoras do HDL sejam compostas por vários mecanismos, incluindo a regulação das funções endoteliais que aumentam a produção de NO e mantêm a integridade endotelial, bem como efeitos antiinflamatórios, antioxidantes e antitrombóticos (8-9). No entanto, estudos farmacológicos relataram que aumentos no HDL plasmático não melhoraram os resultados cardiovasculares (10-12).

Ao mesmo tempo, dados emergentes revelaram a importância da qualidade do HDL mais do que sua quantidade. O HDL de pacientes com DRC perdeu seus efeitos antiaterogênicos e protetores endoteliais. Em um estudo de Shroff et al. (13), o HDL de pacientes com DRC foi incubado com uma linha celular endotelial primária. Várias funções endoteliais, como redução da produção de NO, permissão da produção de SO, aumento da expressão de VCAM-1 e redução da capacidade de efluxo de colesterol, foram diminuídas em comparação com as de HDL de indivíduos saudáveis. Esses efeitos foram associados a marcadores de disfunção vascular nesses pacientes, como níveis elevados de urato, angiopoetina e IL-6, bem como medidas de função vascular deficientes, medidas pela velocidade do pulso aórtico e pela espessura da camada íntima da carótida. Essas funções negativas aumentaram à medida que a gravidade da DRC progrediu e mostraram uma melhora parcial após o transplante renal (13).

Informações sobre a composição e função dos lipídios e lipoproteínas séricas entre gestações com pré-eclâmpsia em comparação com gestações normais são escassas. A dislipidemia no início da gravidez, particularmente a hipertrigliceridemia, parece estar associada ao aumento do risco de pré-eclâmpsia (14). No entanto, resultados duvidosos foram encontrados em relação à atividade da paraoxonase 1 (PON1), que é uma enzima antioxidante encontrada no HDL que inibe a oxidação de lipídios de baixa densidade (LDL) e HDL. A atividade da PON1 é diminuída em doenças associadas à ativação e disfunção endotelial, incluindo diabetes, hipercolesterolemia e doença cardiovascular (15). Demir et ai. (16) encontraram baixos níveis de HDL, ApoA1 e atividade da paraoxonase em pré-eclâmptica em comparação com gestações normais, enquanto Acikgoz et al. (17) demonstraram atividade PON1 significativamente maior em pré-eclâmptica em comparação com gestações normais.

A saliva contém constituintes que refletem um estado patológico ou fisiológico do corpo humano e, portanto, pode ser utilizada para fins de diagnóstico. As fontes e a composição da saliva total (fluido oral) são únicas e complexas. A saliva consiste em secreções das glândulas salivares e fluido crevicular gengival, transudato da mucosa oral, secreções da mucosa nasal e faríngea, bactérias não aderentes, células epiteliais orais descamadas, restos de queratina, células sanguíneas e, possivelmente, resíduos de alimentos ou medicamentos (18). Suas funções incluem lubrificação, digestão, atividade antimicrobiana, facilitando a remineralização do esmalte dentário e mantendo a sensação normal do paladar (19). Essas funções importantes são realizadas pelos vários componentes químicos da saliva, incluindo água, compostos inorgânicos (íons), compostos orgânicos (não-proteínas e lipídios), proteínas/polipeptídeos e hormônios (19). A busca por biomarcadores salivares confiáveis ​​desenvolveu-se rapidamente, especialmente em cânceres orais, estimulada pelo fato de que a coleta de saliva é mais simples e menos invasiva do que a coleta de sangue.

Salvador-Moysén et al. (20) teve como objetivo determinar a utilidade do cortisol salivar como preditor de pré-eclâmpsia em adolescentes. Eles descobriram que concentrações de cortisol >14,9 nmol/L foram observadas no grupo que desenvolveu pré-eclâmpsia, enquanto o grupo controle apresentou valores <10,1 nmol/L.

Os compostos orgânicos voláteis (COV) podem ser detectados na respiração e no sangue e utilizados para detecção precoce e caracterização do desenvolvimento e progressão de doenças (21). Muitos dos VOC detectados na respiração são sistêmicos ou endógenos e são produzidos durante processos fisiológicos, mas as rotas metabólicas por trás de sua produção são conhecidas por apenas alguns (22). Outros VOCs são exógenos e resultam de contaminação externa através do ar inalado ou ingestão de alimentos ou bebidas.

A microextração em fase sólida (SPME) é uma técnica simples, automatizada e rápida para detecção de VOC combinada com cromatografia gasosa-espectrometria de massa (GC-MS) (20). Até onde sabemos, nenhum estudo foi conduzido para identificar VOC na saliva de mulheres com pré-eclâmpsia.

Objetivos

1. Existe uma correlação entre o diagnóstico de pré-eclâmpsia e sua gravidade com alterações na qualidade do HDL, em termos de composição e função.
2. Determinar se as alterações induzidas pela pré-eclâmpsia nos VOCs na saliva podem ser usadas para o diagnóstico precoce da pré-eclâmpsia.

Objetivos de pesquisa

1. Avaliar:

   Composição e função do HDL em gestações normais e com pré-eclâmpsia nas semanas 12-14 (segundo trimestre), semanas 28-30 (terceiro trimestre) e no parto Propriedades Apo-A1, atividade PON1 Tamanho do HDL Conteúdo lipídico do HDL Atividade antioxidante do HDL (para LDL e macrófagos ) Efluxo de colesterol mediado por HDL de macrófagos

2. Avaliar os efeitos do HDL de mulheres com PET, gestações normais e não grávidas, na cultura endotelial primária em relação a proteínas, mRNA e miRNAs, componentes significativos na função endotelial normal e relacionados à resposta inflamatória.
3. Avaliar diferenças nos perfis genômicos e lipídicos de sangue de cordão e placentas de mulheres com PET, gestações normais e mulheres não grávidas
4. Identifique VOC na saliva, como biomarcadores precoces de PET durante o segundo e terceiro trimestres e no parto.