Ændringer i biomarkører fra blod over tid hos patienter med bugspytkirteladenokarcinom

Dette er en enkelt-institutionel, prospektiv undersøgelse på Johns Hopkins Hospital, som vil blive udført fra 1. januar 2015 til 31. december 2018. Alle patienter, der kommer til Johns Hopkins Hospital med et pancreas-adenokarcinom (PDAC) til evaluering af behandling med kemoterapi, strålebehandling og/eller kirurgi, vil blive kontaktet for at deltage i denne undersøgelse, men kun dem, der giver samtykke til undersøgelsen, vil blive inkluderet . Alle patienter, der giver samtykke til at deltage i dette forsøg, vil få udtaget blod (ca. 50 ml eller 3-4 spiseskefulde) på tidspunktet for diagnosen, men før nogen behandling er blevet givet. Yderligere blod vil blive udtaget efter enhver behandling. For eksempel vil de patienter, der gennemgår kirurgisk resektion, også få udtaget blod efter resektion før udskrivelsen. De patienter, der gennemgår behandling med kemoterapi, strålebehandling og/eller biologisk/vaccinebehandling, vil få udtaget blod én gang efter, at denne behandling er afsluttet. Hvis en patient gennemgår kemoterapi og derefter kirurgisk resektion, vil han eller hun få udtaget blod efter kemoterapi, men før kirurgisk resektion, og derefter igen efter kirurgisk resektion, alt sammen ud over blodprøven før behandling (se skema inkluderet i IRB). I de første 2 år efter operationen vil der blive indsamlet prøver hver 3.-4. måned. Udover det vil efterforskerne indsamle prøver hver 6. måned i de næste to år. For alle patienter, der viser sig at være i live og sygdomsfri ud over 4 år efter operationen, vil der blive indsamlet prøver en gang om året. Dette blod vil blive opbevaret i efterforskernes forskningsfacilitet og vil som sådan blive mærket med en de-identificeret kode. Hvis en patient på et hvilket som helst tidspunkt under undersøgelsen nægter yderligere blodudtagninger eller mangler at følge op, vil de prøver, der er blevet indsamlet, stadig blive brugt.

Blodet vil blive behandlet på afhentningsdagen inden for 6 timer efter udtagning. Tyve (20) ml blod, opsamlet i to lilla toppede rør, vil blive brugt til isolering af cirkulerende tumorceller (CTC'er) gennem Isolation by Size of Epithelial Tumor Cells assay (ISET), som adskiller tumorceller efter størrelse på en membran som kan bruges til yderligere eksperimenter. Disse 20 ml blod vil blive blandet med ISET-buffer i henhold til standardprotokol og filtreret gennem ISET-maskinen på membraner. Disse membraner vil blive opbevaret ved -20 grader C under et afidentificeret nummer og forblive ved disse forhold i flere år med fuld bevaring af cellerne. Yderligere eksperimenter vil blive udført på disse membraner, som omfatter immunofluorescerende farvning, laser capture mikroskopi og genetisk analyse. De resterende 30 ml blod, opsamlet i røde og lilla rør, behandles efter en standardprotokol inden for 6 timer efter indsamling. Blod vil blive dobbeltspundet for at fjerne hvide blodlegemer og plasma og vil blive frosset. Driver-genmutationer karakteriseret i de resekerede tumorer vil blive overvåget af digital dråbe polymerasekædereaktion (ddPCR), herunder Kirsten rottesarkom viral onkogen homolog (k-ras), p53, p16/cdkn2a og Deleted in Pancreatic Cancer-4 genet ( DPC4/SMAD4) for at identificere tilstedeværelsen af ​​ctDNA og om niveauerne stiger.

Data vil blive indsamlet, afidentificeret og analyseret som et enkelt datasæt på Johns Hopkins Hospital. Data vil blive indhentet fra patient elektroniske og papir kliniske diagrammer fra John Hopkins Hospital fra 1/1/2015, med kun data, der eksisterede pr. 1/1/2015 indsamlet. Mere specifikt vil radiologi, kemoterapi, operations- og patologirapporter, udskrivelsesresuméer og kliniknotater blive gennemgået og data fra disse kilder indsamlet. For patienter, der er mistet til opfølgning, vil Social Security Death Index (men vil ikke skulle indsamle cpr-numre) blive søgt efter bevis for død. Indsamlede patientdata vil blive indtastet i en dedikeret database. Data vil kun blive indsamlet for at korrelere resultater og tumorkarakteristika med de biomarkører, der er identificeret under denne undersøgelse. Efter dataindsamling og før analyse vil alle personlige identifikatorer blive slettet, og der vil ikke være nogen identificerbare oplysninger til stede på tidspunktet for den statistiske analyse. De genererede emnedata vil ikke fremgå af forsøgspersonens journal og vil kun blive brugt til forskningsformål. Dataene vil blive registreret i en adgangskodebeskyttet, sikker database på hovedefterforskerens kontor og vil kun være tilgængelige for nøglepersonalet. Når alle data for et bestemt emne er indsamlet, vil emnets identitet blive slettet for at sikre fortrolighed.

De data, der er indsamlet i denne undersøgelse, vil ikke blive brugt til den kliniske behandling af nogen patient i undersøgelsen.

Inklusions-/Eksklusionskriterier

Efterforskerne vil inkludere alle patienter, der kommer til Johns Hopkins Hospital til behandling med en diagnose af et adenokarcinom i bugspytkirtlen. Forsøgspersoner vil kun blive inkluderet, hvis de er over 18 år og planlægger at gennemgå deres behandling på Johns Hopkins Hospital. Alle patienter med ikke-primære pancreas tumorer, pancreas neuroendokrine tumorer eller benigne pancreas masser vil blive udelukket. Patienter vil blive udelukket, hvis de allerede har gennemgået behandling af nogen art på en anden institution.

Efterforskerne sigter mod at inkludere data fra mindst 200 patienter i løbet af de tre år af denne undersøgelse. Det primære resultat vil være at identificere biomarkører i blodet fra patienter med pancreas adenocarcinom og ændringerne i disse biomarkører over tid i forhold til behandling. Disse biomarkører vil omfatte specifikke antistoffer, cirkulerende tumorceller (CTC'er) og cirkulerende tumor-DNA (ctDNA). Sekundære resultater vil omfatte forholdet mellem biomarkørniveauer før behandling eller ændringer i biomarkørniveauer til sygdomsfri og overordnet overlevelse, risiko for metastaser, tilbagefald af sygdom og respons på behandling. Patient-, tumor- og kirurgiske karakteristika vil blive indsamlet for alle patienter inkluderet i denne undersøgelse. Forskelle mellem karakteristika vil blive statistisk sammenlignet mellem patienter. Derudover vil disse karakteristika blive analyseret som mulige forudsigere for overlevelse ved hjælp af univariate og multivariate analyser gennem log-rank test og Cox-proportional hazard modeller. Disse egenskaber vil omfatte:

1. Patient- og tumorklinisk demografi, herunder alder, køn, race, primær tumorplacering, lokalisering af metastaser, tumorgrad og kulhydratantigen 19-9 (CA19-9) niveauer før og efter kemoterapi og præ- og post-resektion.
2. Kemoterapivariabler inklusive type, antal cyklusser, respons og timing (neoadjuvans og/eller adjuvans).
3. Operative variabler, herunder type af resektion, antal lymfeknuder resekeret, vaskulær nærhed af tumor, histopatologi og postoperativ mortalitet og komplikationer.
4. Langtidsvariable, herunder tilstedeværelse og placering af gentagelse og status (levende/død).
5. Niveauer af specifikke biomarkører på de forskellige tidspunkter for blodudtagninger.
6. Antallet af cirkulerende tumorceller på hvert tidspunkt ud over genetiske mutationer til stede i cellerne.

For alle patienter vil den samlede overlevelse blive beregnet som tiden mellem datoen for den første blodprøve før behandling til datoen for det sidste kendte opfølgningsbesøg eller dødsfald, alt efter hvad der indtræffer først. For patienter, der gennemgår kirurgisk resektion, vil efterforskerne beregne tiden til sygdomsgentagelse målt fra operationsdagen for bugspytkirtelresektion til datoen for dokumenteret sygdomsgentagelse eller død, alt efter hvad der kommer først. Tid til sygdomstilbagefald og samlet overlevelse vil blive beskrevet med Kaplan-Meier kurver og vil blive sammenlignet ved log-rang test. Den 1- og 5-årige samlede overlevelsesrate vil blive estimeret med dets 95% konfidensinterval. Statistisk signifikans vil blive sat for en p-værdi til eller under 0,05.

De primære risici for denne patient vil være forbundet med blodprøvetagningen, men er ikke mere end minimal givet blodprøvetagning ved venepunktur, og der vil ikke blive taget mere end 50 ml ad gangen. De generelle risici forbundet med venøs blodudtagning omfatter blå mærker eller mindre blødninger på stedet for venepunktur, som ville blive håndteret med påføring af tryk.

Der vil ikke være nogen direkte fordel for patienterne i denne undersøgelse, da de genererede resultater ikke vil blive brugt til behandling af disse patienter. Denne undersøgelse har potentiale til at gavne fremtidige patienter ved at identificere metoder til tidlig diagnosticering af patienter med bugspytkirtelkræft og forudsige den samlede overlevelse, respons på behandling eller risiko for metastatisk spredning og forudsige tilbagevenden af ​​sygdommen, som alle har den potentielle fordel at forbedre resultater for denne dødelige sygdom.

Der gives ingen kompensation til emner i denne undersøgelse. Omkostningerne i denne undersøgelse vil være relateret til omkostningerne ved blodudtagninger under forskellige planlagte klinikbesøg. Disse vil være minimale.

Alle patienter, der accepterer at deltage i denne undersøgelse, skal underskrive en samtykkeerklæring til indsamling, opbevaring og brug af deres blod.