Muutokset verestä peräisin olevissa biomarkkereissa ajan myötä potilailla, joilla on haiman adenokarsinooma

Tämä on yhden laitoksen prospektiivinen tutkimus Johns Hopkinsin sairaalassa, joka suoritetaan 1. tammikuuta 2015 - 31. joulukuuta 2018. Kaikki potilaat, jotka saapuvat Johns Hopkinsin sairaalaan haiman adenokarsinooman (PDAC) kanssa kemoterapian, sädehoidon ja/tai leikkauksen hoidon arvioimiseksi, otetaan mukaan tähän tutkimukseen, mutta vain ne, jotka suostuvat tutkimukseen, otetaan mukaan. . Kaikilta potilailta, jotka suostuvat osallistumaan tähän tutkimukseen, otetaan verinäyte (noin 50 ml tai 3-4 ruokalusikallista) diagnoosin yhteydessä, mutta ennen hoidon aloittamista. Lisää verta otetaan minkä tahansa hoidon jälkeen. Esimerkiksi niiltä potilailta, joille tehdään kirurginen resektio, otetaan myös veri leikkauksen jälkeen ennen kotiuttamista. Potilailta, jotka saavat hoitoa kemoterapialla, sädehoidolla ja/tai biologisella/rokotehoidolla, otetaan verikoe kerran tämän hoidon päätyttyä. Jos potilaalle suoritetaan kemoterapia ja sitten kirurginen resektio, häneltä otetaan verinäyte kemoterapian jälkeen, mutta ennen kirurgista resektiota ja sitten uudelleen kirurgisen resektion jälkeen, kaikki hoitoa edeltävän verinäytteen lisäksi (katso IRB:ssä oleva kaavio). Leikkauksen jälkeisten kahden ensimmäisen vuoden aikana näytteet otetaan 3-4 kuukauden välein. Tämän lisäksi tutkijat keräävät näytteitä kuuden kuukauden välein seuraavien kahden vuoden ajan. Kaikilta yli 4 vuoden leikkauksen jälkeen eläviltä ja taudista vapailta potilailta kerätään näytteet kerran vuodessa. Tämä veri säilytetään tutkijoiden tutkimuslaitoksessa, ja sellaisena se merkitään tunnistamattomalla koodilla. Jos potilas kieltäytyy lisäveren ottamisesta milloin tahansa tutkimuksen aikana tai jos hän on poissa seurannasta, kerätyt näytteet hyödynnetään edelleen.

Veri käsitellään keräyspäivänä 6 tunnin sisällä näytteenotosta. Kaksikymmentä (20) ml verta, jotka on kerätty kahteen purppuranpunaiseen putkeen, käytetään verenkierrossa olevien kasvainsolujen (CTC) eristämiseen epiteelisolujen eristäminen koon mukaan -testillä (ISET), joka erottaa kasvainsolut koon mukaan kalvolle. joita voidaan käyttää lisäkokeissa. Nämä 20 ml verta sekoitetaan ISET-puskurilla standardiprotokollan mukaisesti ja suodatetaan ISET-laitteen läpi kalvoille. Näitä kalvoja säilytetään -20 astetta C:ssa tunnistettomana numerona, ja ne pysyvät näissä olosuhteissa useita vuosia solujen täydellisen säilymisen kanssa. Näillä kalvoilla tehdään lisäkokeita, jotka sisältävät immunofluoresenssivärjäyksen, laserkaappausmikroskoopin ja geneettisen analyysin. Loput 30 ml verta, jotka on kerätty punaisella ja purppurapäällisillä putkilla, käsitellään standardiprotokollalla 6 tunnin kuluessa keräämisestä. Veri kehrätään kaksinkertaisesti valkosolujen ja plasman poistamiseksi ja jäädytetään. Resektoiduissa kasvaimissa karakterisoituja kuljettajageenimutaatioita seurataan digitaalisella pisarapolymeraasiketjureaktiolla (ddPCR), mukaan lukien Kirsten-rotan sarkoomaviruksen onkogeenihomologi (k-ras), p53, p16/cdkn2a ja Deleted in Pancreatic Cancer-4 -geeni ( DPC4/SMAD4) ctDNA:n läsnäolon tunnistamiseksi ja nousevatko tasot.

Tietoja kerätään, tunnistetaan ja analysoidaan yhtenä tietokokonaisuutena Johns Hopkinsin sairaalassa. Tiedot saadaan John Hopkins -sairaalan sähköisistä ja paperisista kliinisistä potilaskartoista 1.1.2015 alkaen, ja kerätään vain 1.1.2015 alkaen olemassa olevat tiedot. Tarkemmin sanottuna radiologian, kemoterapian, leikkaus- ja patologiaraportit, kotiutusyhteenvedot ja klinikan muistiinpanot tarkastellaan ja näistä lähteistä kerätään tietoja. Potilaiden, jotka ovat kadonneet seurantaan, etsitään sosiaaliturvan kuolleisuusindeksistä (mutta heidän ei tarvitse kerätä sosiaaliturvatunnuksia) todisteiden kuolemasta. Kerätyt potilastiedot syötetään erityiseen tietokantaan. Tietoja kerätään vain tulosten ja kasvaimen ominaisuuksien korreloimiseksi tämän tutkimuksen aikana tunnistettujen biomarkkerien kanssa. Tietojen keräämisen jälkeen ja ennen analysointia kaikki henkilökohtaiset tunnisteet poistetaan, eikä tunnistettavia tietoja ole saatavilla tilastollisen analyysin aikana. Luodut aihetiedot eivät näy tutkittavan sairauskertomuksessa ja niitä käytetään vain tutkimustarkoituksiin. Tiedot tallennetaan salasanasuojattuun, suojattuun tietokantaan päätutkijan toimistossa ja ne ovat vain avainhenkilöiden käytettävissä. Kun kaikki tiedot tietystä aiheesta on kerätty, tutkittavan henkilöllisyys poistetaan luottamuksellisuuden varmistamiseksi.

Tässä tutkimuksessa kerättyjä tietoja ei käytetä minkään tutkimuksessa olevan potilaan kliiniseen hoitoon.

Sisällyttämis-/poissulkemiskriteerit

Tutkijat kattavat kaikki potilaat, jotka hakeutuvat Johns Hopkins -sairaalaan hoitoon haiman adenokarsinooman diagnoosilla. Koehenkilöt otetaan mukaan vain, jos he ovat yli 18-vuotiaita ja suunnittelevat menevänsä hoitoon Johns Hopkinsin sairaalassa. Kaikki potilaat, joilla on ei-primaarinen haimakasvain, haiman neuroendokriiniset kasvaimet tai hyvänlaatuiset haimamassat, suljetaan pois. Potilaat suljetaan pois, jos he ovat jo saaneet minkäänlaista hoitoa toisessa laitoksessa.

Tutkijat pyrkivät sisällyttämään tiedot vähintään 200 potilaasta tämän tutkimuksen kolmen vuoden ajalta. Ensisijainen tulos on biomarkkerien tunnistaminen haiman adenokarsinoomapotilaiden verestä ja muutokset näissä biomarkkereissa ajan myötä suhteessa hoitoon. Nämä biomarkkerit sisältävät spesifisiä vasta-aineita, kiertäviä kasvainsoluja (CTC) ja kiertäviä kasvain-DNA:ta (ctDNA). Toissijaisiin tuloksiin kuuluvat hoitoa edeltävien biomarkkeritasojen tai biomarkkeritasojen muutosten suhde taudista vapaaseen ja kokonaiseloonjäämiseen, metastaasien riski, taudin uusiutuminen ja hoitovaste. Potilaiden, kasvainten ja kirurgisten ominaisuuksien tiedot kerätään kaikista tähän tutkimukseen osallistuvista potilaista. Ominaisuuksien välisiä eroja verrataan tilastollisesti potilaiden välillä. Lisäksi näitä ominaisuuksia analysoidaan mahdollisina selviytymisen ennustajina käyttämällä yksi- ja monimuuttujaanalyysejä log-rank-testin ja Cox-suhteellisten vaaramallien avulla. Nämä ominaisuudet sisältävät:

1. Potilaiden ja kasvainten kliiniset demografiset tiedot, mukaan lukien ikä, sukupuoli, rotu, primaarisen kasvaimen sijainti, etäpesäkkeiden sijainti, kasvainaste ja hiilihydraattiantigeeni 19-9 (CA19-9) -tasot ennen ja jälkeen kemoterapiaa sekä ennen ja jälkeen resektion.
2. Kemoterapian muuttujat, mukaan lukien tyyppi, syklien lukumäärä, vaste ja ajoitus (neoadjuvantti ja/tai adjuvantti).
3. Operatiiviset muuttujat, mukaan lukien resektion tyyppi, resekoitujen imusolmukkeiden lukumäärä, kasvaimen läheisyys verisuoniin, histopatologia sekä leikkauksen jälkeinen kuolleisuus ja komplikaatiot.
4. Pitkän aikavälin muuttujat, mukaan lukien toistumisen esiintyminen ja sijainti sekä tila (elossa/kuollut).
5. Spesifisten biomarkkerien tasot verenoton eri ajankohtina.
6. Verenkierrossa olevien kasvainsolujen lukumäärä kullakin aikapisteellä soluissa esiintyvien geneettisten mutaatioiden lisäksi.

Kaikille potilaille kokonaiseloonjäämisaika lasketaan ensimmäisen hoitoa edeltävän verenoton ja viimeisen tunnetun seurantakäynnin tai kuoleman välisenä aikana sen mukaan, kumpi tulee ensin. Potilaille, joille tehdään kirurginen resektio, tutkijat laskevat taudin uusiutumiseen kuluvan ajan mitattuna haiman resektioleikkauspäivästä taudin dokumentoidun uusiutumisen tai kuoleman päivämäärään sen mukaan, kumpi tulee ensin. Aika taudin uusiutumiseen ja kokonaiseloonjääminen kuvataan Kaplan-Meier-käyrillä ja niitä verrataan log-rank-testillä. 1 ja 5 vuoden kokonaiseloonjäämisaste arvioidaan sen 95 %:n luottamusvälillä. Tilastollinen merkitsevyys asetetaan p-arvolle 0,05 tai sen alle.

Tälle potilaalle aiheutuvat ensisijaiset riskit liittyvät veren ottamiseen, mutta ne ovat vain minimaalisia, kun otetaan huomioon laskimopunktio, ja kerralla otetaan enintään 50 ml. Laskimoveren ottoon liittyviin yleisiin riskeihin kuuluvat mustelmat tai lievä verenvuoto laskimopunktiokohdassa, joka hoidettaisiin painetta käyttämällä.

Tästä tutkimuksesta ei ole suoraa hyötyä potilaille, koska saatuja tuloksia ei käytetä näiden potilaiden hoitoon. Tämä tutkimus voi hyödyttää tulevia potilaita tunnistamalla menetelmiä haimasyöpäpotilaiden varhaiseen diagnosointiin ja ennustamalla kokonaiseloonjäämistä, hoitovastetta tai metastaattisen leviämisen riskiä sekä ennustamalla taudin uusiutumista. Kaikilla näillä on potentiaalinen etu parantaa. tämän tappavan taudin seurauksia.

Tässä tutkimuksessa koehenkilöille ei makseta korvausta. Tämän tutkimuksen kustannukset liittyvät erilaisten määräaikaisten klinikkakäyntien verenottokustannuksiin. Nämä ovat minimaalisia.

Kaikkien potilaiden, jotka suostuvat osallistumaan tähän tutkimukseen, on allekirjoitettava suostumuslomake verensä keräämisestä, varastoinnista ja käytöstä.