Veränderungen der Biomarker aus dem Blut im Laufe der Zeit bei Patienten mit Adenokarzinom des Pankreas

Dies ist eine prospektive Studie an einer einzelnen Institution am Johns Hopkins Hospital, die vom 1. Januar 2015 bis zum 31. Dezember 2018 durchgeführt wird. Alle Patienten, die sich mit einem Adenokarzinom des Pankreas (PDAC) im Johns Hopkins Hospital zur Bewertung der Behandlung durch Chemotherapie, Strahlentherapie und/oder Operation vorstellen, werden zur Teilnahme an dieser Studie aufgefordert, aber nur diejenigen, die der Studie zustimmen, werden eingeschlossen . Allen Patienten, die der Teilnahme an dieser Studie zustimmen, wird zum Zeitpunkt der Diagnose, jedoch vor der Verabreichung einer Behandlung, Blut abgenommen (ungefähr 50 ml oder 3-4 Esslöffel). Nach jeder Behandlung wird weiteres Blut abgenommen. Zum Beispiel wird den Patienten, die sich einer chirurgischen Resektion unterziehen, auch nach der Resektion vor der Entlassung Blut entnommen. Bei Patienten, die sich einer Chemotherapie, Strahlentherapie und/oder Biologika-/Impfstofftherapie unterziehen, wird nach Abschluss dieser Behandlung einmal Blut abgenommen. Wenn sich ein Patient einer Chemotherapie und dann einer chirurgischen Resektion unterzieht, wird ihm nach der Chemotherapie, aber vor der chirurgischen Resektion und dann erneut nach der chirurgischen Resektion Blut entnommen, alles zusätzlich zur Blutprobe vor der Behandlung (siehe Schema im IRB). In den ersten 2 Jahren nach der Operation werden alle 3-4 Monate Proben entnommen. Darüber hinaus werden die Ermittler in den nächsten zwei Jahren alle 6 Monate Proben entnehmen. Von allen Patienten, die über 4 Jahre nach der Operation als lebend und krankheitsfrei befunden wurden, werden einmal jährlich Proben entnommen. Dieses Blut wird in der Forschungseinrichtung des Ermittlers gelagert und als solches mit einem anonymisierten Code gekennzeichnet. Lehnt ein Patient zu irgendeinem Zeitpunkt während der Studie weitere Blutentnahmen ab oder fällt die Nachsorge aus, werden die entnommenen Proben dennoch verwendet.

Das Blut wird am Tag der Entnahme innerhalb von 6 Stunden nach der Entnahme verarbeitet. Zwanzig (20) ml Blut, gesammelt in zwei Röhrchen mit violettem Verschluss, werden zur Isolierung zirkulierender Tumorzellen (CTCs) durch den Isolation by Size of Epithelial Tumor Cells Assay (ISET) verwendet, der Tumorzellen nach Größe auf einer Membran trennt die für weitere Experimente verwendet werden können. Diese 20 ml Blut werden gemäß Standardprotokoll mit ISET-Puffer gemischt und durch die ISET-Maschine auf Membranen filtriert. Diese Membranen werden bei -20 Grad C unter einer nicht identifizierten Nummer gelagert und bleiben unter diesen Bedingungen mehrere Jahre lang bei vollständiger Konservierung der Zellen. An diesen Membranen werden weitere Experimente durchgeführt, die Immunfluoreszenzfärbung, Lasereinfangmikroskopie und genetische Analyse umfassen. Die restlichen 30 ml Blut, die in Röhrchen mit rotem und violettem Verschluss gesammelt werden, werden innerhalb von 6 Stunden nach der Entnahme nach einem Standardprotokoll verarbeitet. Das Blut wird doppelt geschleudert, um weiße Blutkörperchen und Plasma zu entfernen, und wird eingefroren. In den resezierten Tumoren charakterisierte Treibergenmutationen werden durch digitale Tröpfchen-Polymerase-Kettenreaktion (ddPCR) überwacht, einschließlich des Kirsten-Ratten-Sarkom-Virus-Onkogen-Homologs (k-ras), p53, p16/cdkn2a und des Deleted in Pancreatic Cancer-4-Gens ( DPC4/SMAD4), um festzustellen, ob ctDNA vorhanden ist und ob die Werte ansteigen.

Die Daten werden im Johns Hopkins Hospital als ein einziger Datensatz gesammelt, anonymisiert und analysiert. Die Daten werden ab dem 01.01.2015 aus den elektronischen Patientenakten und den klinischen Krankenakten in Papierform des John Hopkins Hospital bezogen, wobei nur die am 01.01.2015 vorhandenen Daten erhoben werden. Insbesondere werden Radiologie-, Chemotherapie-, Operations- und Pathologieberichte, Entlassungsberichte und Kliniknotizen überprüft und Daten aus diesen Quellen gesammelt. Bei Patienten, die für die Nachsorge verloren gegangen sind, wird der Todesindex der Sozialversicherung (der jedoch keine Sozialversicherungsnummern erfassen muss) nach Todesnachweisen durchsucht. Die gesammelten Patientendaten werden in eine spezielle Datenbank eingegeben. Daten werden nur erhoben, um Ergebnisse und Tumormerkmale mit den in dieser Studie identifizierten Biomarkern zu korrelieren. Nach der Datenerhebung und vor der Auswertung werden alle Personenkennzeichen gelöscht und es liegen zum Zeitpunkt der statistischen Auswertung keine personenbezogenen Daten mehr vor. Die generierten Probandendaten erscheinen nicht in der Krankenakte des Probanden und werden nur für Forschungszwecke verwendet. Die Daten werden in einer passwortgeschützten, sicheren Datenbank im Büro des Hauptermittlers aufgezeichnet und sind nur für das Schlüsselpersonal zugänglich. Nachdem alle Daten für eine bestimmte Person gesammelt wurden, wird die Identität der Person gelöscht, um die Vertraulichkeit zu gewährleisten.

Die in dieser Studie gesammelten Daten werden nicht für das klinische Management von Studienpatienten verwendet.

Einschluss-/Ausschlusskriterien

Die Ermittler werden alle Patienten einbeziehen, die sich mit der Diagnose eines Adenokarzinoms der Bauchspeicheldrüse im Johns Hopkins Hospital zur Behandlung vorstellen. Probanden werden nur aufgenommen, wenn sie über 18 Jahre alt sind und planen, sich ihrer Behandlung im Johns Hopkins Hospital zu unterziehen. Alle Patienten mit nicht-primären Pankreastumoren, neuroendokrinen Tumoren der Bauchspeicheldrüse oder gutartigen Tumoren der Bauchspeicheldrüse werden ausgeschlossen. Patienten werden ausgeschlossen, wenn sie sich bereits in irgendeiner anderen Einrichtung einer Behandlung unterzogen haben.

Die Forscher zielen darauf ab, Daten von mindestens 200 Patienten über die drei Jahre dieser Studie einzubeziehen. Das primäre Ergebnis wird die Identifizierung von Biomarkern im Blut von Patienten mit Pankreas-Adenokarzinom und die Veränderungen dieser Biomarker im Laufe der Zeit in Bezug auf die Behandlung sein. Diese Biomarker umfassen spezifische Antikörper, zirkulierende Tumorzellen (CTCs) und zirkulierende Tumor-DNA (ctDNA). Zu den sekundären Ergebnissen gehören das Verhältnis der Biomarker-Spiegel vor der Behandlung oder Änderungen der Biomarker-Spiegel zum krankheitsfreien Überleben und zum Gesamtüberleben, das Risiko von Metastasen, das Wiederauftreten der Krankheit und das Ansprechen auf die Behandlung. Patienten-, Tumor- und chirurgische Merkmale werden für alle in diese Studie eingeschlossenen Patienten erfasst. Unterschiede zwischen Merkmalen werden statistisch zwischen Patienten verglichen. Darüber hinaus werden diese Merkmale als mögliche Prädiktoren für das Überleben unter Verwendung von univariaten und multivariaten Analysen durch den Log-Rank-Test und Cox-proportionale Hazard-Modelle analysiert. Zu diesen Merkmalen gehören:

1. Klinische Patienten- und Tumordaten, einschließlich Alter, Geschlecht, Rasse, Lage des primären Tumors, Lage der Metastasen, Tumorgrad und Kohlenhydrat-Antigen-19-9 (CA19-9)-Spiegel vor und nach der Chemotherapie sowie vor und nach der Resektion.
2. Chemotherapie-Variablen einschließlich Art, Anzahl der Zyklen, Ansprechen und Zeitpunkt (neoadjuvant und/oder adjuvant).
3. Operative Variablen, einschließlich Art der Resektion, Anzahl der resezierten Lymphknoten, vaskuläre Nähe des Tumors, Histopathologie und postoperative Mortalität und Komplikationen.
4. Langzeitvariablen, einschließlich Anwesenheit und Ort des Wiederauftretens und Status (lebendig/tot).
5. Konzentrationen spezifischer Biomarker zu den verschiedenen Zeitpunkten der Blutentnahmen.
6. Anzahl der zirkulierenden Tumorzellen zu jedem Zeitpunkt zusätzlich zu den in den Zellen vorhandenen genetischen Mutationen.

Für alle Patienten wird das Gesamtüberleben als die Zeit zwischen dem Datum der ersten Blutentnahme vor der Behandlung und dem Datum des letzten bekannten Nachsorgebesuchs oder des Todes, je nachdem, was zuerst eintritt, berechnet. Bei Patienten, die sich einer chirurgischen Resektion unterziehen, berechnen die Prüfärzte die Zeit bis zum Wiederauftreten der Krankheit, gemessen vom Tag der Operation zur Pankreasresektion bis zum Datum des dokumentierten Wiederauftretens der Krankheit oder des Todes, je nachdem, was zuerst eintritt. Die Zeit bis zum Wiederauftreten der Krankheit und das Gesamtüberleben werden mit Kaplan-Meier-Kurven beschrieben und mit einem Log-Rank-Test verglichen. Die 1- und 5-Jahres-Gesamtüberlebensrate wird mit ihrem 95-%-Konfidenzintervall geschätzt. Statistische Signifikanz wird für einen p-Wert bei oder unter 0,05 festgelegt.

Die Hauptrisiken für diesen Patienten sind mit der Blutentnahme verbunden, sind jedoch nicht mehr als eine minimale Entnahme durch Venenpunktion, und es werden nicht mehr als 50 ml auf einmal entnommen. Zu den allgemeinen Risiken im Zusammenhang mit der venösen Blutentnahme gehören Blutergüsse oder leichte Blutungen an der Stelle der venösen Punktion, die durch Anwendung von Druck behandelt würden.

Es wird keinen direkten Nutzen für die Patienten in dieser Studie geben, da die generierten Ergebnisse nicht für die Behandlung dieser Patienten verwendet werden. Diese Studie hat das Potenzial, zukünftigen Patienten zu helfen, indem sie Methoden zur Früherkennung von Patienten mit Bauchspeicheldrüsenkrebs identifiziert und das Gesamtüberleben, das Ansprechen auf die Behandlung oder das Risiko einer Metastasierung vorhersagt und das Wiederauftreten der Krankheit vorhersagt, was alles den potenziellen Vorteil einer Verbesserung hat Ergebnisse für diese tödliche Krankheit.

Den Probanden in dieser Studie wird keine Vergütung gewährt. Die Kosten in dieser Studie beziehen sich auf die Kosten für Blutentnahmen während verschiedener geplanter Klinikbesuche. Diese werden minimal sein.

Alle Patienten, die der Teilnahme an dieser Studie zustimmen, müssen eine Einverständniserklärung für die Entnahme, Lagerung und Verwendung ihres Blutes unterschreiben.