Cambios en los biomarcadores de la sangre a lo largo del tiempo en pacientes con adenocarcinoma de páncreas

Este es un estudio prospectivo de una sola institución en el Hospital Johns Hopkins que se llevará a cabo del 1 de enero de 2015 al 31 de diciembre de 2018. Todos los pacientes que se presenten en el Johns Hopkins Hospital con un adenocarcinoma pancreático (PDAC) para la evaluación del tratamiento con quimioterapia, radioterapia y/o cirugía serán abordados para participar en este estudio, pero solo se incluirán aquellos que den su consentimiento para el estudio. . A todos los pacientes que den su consentimiento para participar en este ensayo se les extraerá sangre (aproximadamente 50 ml o 3-4 cucharadas) en el momento del diagnóstico, pero antes de que se haya administrado cualquier tratamiento. Se extraerá más sangre después de cualquier tratamiento. Por ejemplo, a aquellos pacientes que se someten a una resección quirúrgica también se les extraerá sangre después de la resección antes del alta. A aquellos pacientes que se sometan a tratamiento con quimioterapia, radioterapia y/o terapia biológica/vacuna se les extraerá sangre una vez que se complete este tratamiento. Si un paciente se somete a quimioterapia y luego a una resección quirúrgica, se le extraerá sangre después de la quimioterapia, pero antes de la resección quirúrgica, y luego nuevamente después de la resección quirúrgica, además de la muestra de sangre previa al tratamiento (consulte el esquema incluido en la IRB). Durante los primeros 2 años posteriores a la cirugía, se recolectarán muestras cada 3-4 meses. Más allá de eso, los investigadores recolectarán muestras cada 6 meses durante los próximos dos años. Para todos los pacientes que se encuentren vivos y libres de enfermedades después de 4 años después de la cirugía, se recolectarán muestras una vez al año. Esta sangre se almacenará en las instalaciones de investigación de los investigadores y, como tal, se etiquetará con un código no identificado. Si un paciente rechaza más extracciones de sangre en cualquier momento durante el estudio o se pierde durante el seguimiento, las muestras que se han recolectado aún se utilizarán.

La sangre se procesará el día de la extracción, dentro de las 6 horas posteriores a la extracción. Se utilizarán veinte (20) ml de sangre, recolectados en dos tubos con tapa morada, para el aislamiento de células tumorales circulantes (CTC) a través del ensayo de aislamiento por tamaño de células tumorales epiteliales (ISET), que separa las células tumorales por tamaño en una membrana. que se puede utilizar para otros experimentos. Estos 20 ml de sangre se mezclarán con tampón ISET según el protocolo estándar y se filtrarán a través de la máquina ISET en membranas. Estas membranas se almacenarán a -20 grados C con un número no identificado y permanecerán en estas condiciones durante varios años con la preservación total de las células. Se realizarán más experimentos en estas membranas, que incluyen tinción inmunofluorescente, microscopía de captura láser y análisis genético. Los 30 ml restantes de sangre, recolectados en tubos con tapa roja y morada, se procesarán mediante un protocolo estándar dentro de las 6 horas posteriores a la recolección. La sangre se centrifugará dos veces para eliminar los glóbulos blancos y el plasma y se congelará. Las mutaciones del gen conductor caracterizadas en los tumores resecados se controlarán mediante la reacción en cadena de la polimerasa de gotitas digitales (ddPCR), incluido el homólogo del oncogén viral del sarcoma de rata Kirsten (k-ras), p53, p16/cdkn2a y el gen Deleted in Pancreatic Cancer-4 ( DPC4/SMAD4) para identificar la presencia de ctDNA y si los niveles están aumentando.

Los datos se recopilarán, desidentificarán y analizarán como un solo conjunto de datos en el Hospital Johns Hopkins. Los datos se obtendrán de las historias clínicas electrónicas y en papel de los pacientes del Hospital John Hopkins a partir del 1/1/2015, y solo se recopilarán los datos existentes a partir del 1/1/2015. Más específicamente, se revisarán los informes de radiología, quimioterapia, operaciones y patología, resúmenes de alta y notas clínicas y se recopilarán datos de estas fuentes. Para los pacientes perdidos durante el seguimiento, se buscará evidencia de muerte en el Índice de muerte del Seguro Social (pero no será necesario recopilar números de seguro social). Los datos recopilados del paciente se ingresarán en una base de datos dedicada. Los datos solo se recopilarán para correlacionar los resultados y las características del tumor con los biomarcadores identificados durante este estudio. Después de la acumulación de datos y antes del análisis, se eliminarán todos los identificadores personales y no habrá información identificable presente en el momento del análisis estadístico. Los datos del sujeto generados no aparecerán en el expediente médico del sujeto y se utilizarán únicamente con fines de investigación. Los datos se registrarán en una base de datos segura protegida con contraseña dentro de la oficina del investigador principal y solo el personal clave podrá acceder a ellos. Después de recopilar todos los datos de un sujeto en particular, se eliminará la identidad del sujeto para garantizar la confidencialidad.

Los datos que se recopilan en este estudio no se utilizarán para el manejo clínico de ningún paciente en estudio.

Criterios de inclusión/exclusión

Los investigadores incluirán a todos los pacientes que se presenten en el Hospital Johns Hopkins para recibir tratamiento con un diagnóstico de adenocarcinoma de páncreas. Los sujetos solo se incluirán si son mayores de 18 años y planean someterse a su tratamiento en el Hospital Johns Hopkins. Se excluirán todos los pacientes con tumores pancreáticos no primarios, tumores neuroendocrinos pancreáticos o masas pancreáticas benignas. Serán excluidos los pacientes que ya hayan recibido tratamiento de cualquier tipo en otra institución.

Los investigadores pretenden incluir datos de al menos 200 pacientes durante los tres años de este estudio. El resultado primario será la identificación de biomarcadores en la sangre de pacientes con adenocarcinoma de páncreas y los cambios en estos biomarcadores a lo largo del tiempo en relación con el tratamiento. Estos biomarcadores incluirán anticuerpos específicos, células tumorales circulantes (CTC) y ADN tumoral circulante (ctDNA). Los resultados secundarios incluirán la relación de los niveles de biomarcadores previos al tratamiento o los cambios en los niveles de biomarcadores con la supervivencia general y sin enfermedad, el riesgo de metástasis, la recurrencia de la enfermedad y la respuesta al tratamiento. Se recopilarán las características del paciente, el tumor y la cirugía para todos los pacientes incluidos en este estudio. Las diferencias entre características se compararán estadísticamente entre pacientes. Además, estas características se analizarán como posibles predictores de supervivencia utilizando análisis univariados y multivariados a través de la prueba de rango logarítmico y modelos de riesgo proporcional de Cox. Estas características incluirán:

1. Datos demográficos clínicos del paciente y del tumor, incluidos la edad, el sexo, la raza, la ubicación del tumor primario, la ubicación de las metástasis, el grado del tumor y los niveles del antígeno carbohidrato 19-9 (CA19-9) antes y después de la quimioterapia y antes y después de la resección.
2. Variables de quimioterapia que incluyen tipo, número de ciclos, respuesta y tiempo (neoadyuvante y/o adyuvante).
3. Variables quirúrgicas que incluyen tipo de resección, número de ganglios linfáticos resecados, proximidad vascular del tumor, histopatología y mortalidad y complicaciones posoperatorias.
4. Variables a largo plazo, incluida la presencia y la ubicación de la recurrencia y el estado (vivo/muerto).
5. Niveles de biomarcadores específicos en los distintos puntos temporales de las extracciones de sangre.
6. Números de células tumorales circulantes en cada momento además de las mutaciones genéticas presentes en las células.

Para todos los pacientes, la supervivencia general se calculará como el tiempo entre la fecha de la primera extracción de sangre previa al tratamiento y la fecha de la última visita de seguimiento conocida o la muerte, lo que ocurra primero. Para los pacientes que se someten a una resección quirúrgica, los investigadores calcularán el tiempo hasta la recurrencia de la enfermedad medido desde el día de la cirugía para la resección pancreática hasta la fecha de la recurrencia de la enfermedad documentada o la muerte, lo que ocurra primero. El tiempo hasta la recurrencia de la enfermedad y la supervivencia global se describirán con curvas de Kaplan-Meier y se compararán mediante la prueba de rango logarítmico. La tasa de supervivencia global a 1 y 5 años se estimará con su intervalo de confianza del 95%. La significación estadística se establecerá para un valor p igual o inferior a 0,05.

Los riesgos primarios para este paciente estarán asociados con la extracción de sangre, pero no son más que mínimos, dada la recolección mediante venopunción y no se tomarán más de 50 ml a la vez. Los riesgos generales asociados con la extracción de sangre venosa incluyen hematomas o sangrado menor en el sitio de la punción venosa, que se controlaría con la aplicación de presión.

No habrá beneficio directo para los pacientes en este estudio, ya que los resultados generados no se utilizarán para el tratamiento de estos pacientes. Este estudio tiene el potencial de beneficiar a futuros pacientes al identificar métodos para el diagnóstico temprano de pacientes con cáncer de páncreas y predecir la supervivencia general, la respuesta al tratamiento o el riesgo de diseminación metastásica y predecir la recurrencia de la enfermedad, todo lo cual tiene la ventaja potencial de mejorar resultados de esta enfermedad mortal.

No se otorgará compensación alguna a los sujetos de este estudio. Los costos de este estudio estarán relacionados con el costo de las extracciones de sangre durante varias visitas clínicas programadas. Estos serán mínimos.

Todos los pacientes que acepten participar en este estudio deberán firmar un formulario de consentimiento para la recolección, el almacenamiento y el uso de su sangre.